| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-20页 |
| 第一章 FABP4 研究进展 | 第13-20页 |
| 1.1 FABP 家族简介 | 第13-15页 |
| 1.2 FABP4 的结构与分布 | 第15-16页 |
| 1.3 FABP4 的生物学功能 | 第16-17页 |
| 1.4 FABP4 基因的调控 | 第17-18页 |
| 1.5 FABP4 与相关代谢疾病 | 第18页 |
| 1.6 总结与展望 | 第18-20页 |
| 第二部分 试验研究 | 第20-52页 |
| 前言 | 第20-21页 |
| 第二章 FABP4 超表达载体的构建与干扰载体的筛选 | 第21-34页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 试验动物、质粒、细胞 | 第21页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试验仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 pcDNA3.1-Fabp4 超表达载体的构建 | 第22-25页 |
| 2.2.2 small-interfering RNA (siRNA)设计 | 第25-26页 |
| 2.2.3 FABP4 超表达效率和干扰效率的检测 | 第26-28页 |
| 2.2.4 数据统计与分析 | 第28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-32页 |
| 2.3.1 FABP4 基因克隆 | 第28-29页 |
| 2.3.2 pcDNA3.1-Fabp4 重组质粒构建 | 第29-30页 |
| 2.3.3 重组质粒的筛选和鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.4 FABP4 超表达效率检测 | 第31页 |
| 2.3.5 FABP4 干扰载体的筛选 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 FABP4 对 3T3-L1 脂肪细胞中脂肪酸代谢和转运的影响 | 第34-44页 |
| 3.1 试验材料 | 第34页 |
| 3.2 试验方法 | 第34-37页 |
| 3.2.1 质粒提取 | 第34页 |
| 3.2.2 细胞培养与转染 | 第34页 |
| 3.2.3 3T3-L1 细胞的诱导分化 | 第34-35页 |
| 3.2.4 细胞内总 RNA 提取 | 第35页 |
| 3.2.5 细胞内总蛋白的提取 | 第35页 |
| 3.2.6 Real-time PCR 检测脂代谢相关基因 mRNA 表达量 | 第35页 |
| 3.2.7 Western Blot 检测相关蛋白表达 | 第35页 |
| 3.2.8 培养基中游离脂肪酸（Free fatty acid，FFA）和甘油测定 | 第35-36页 |
| 3.2.9 脂肪细胞油红 0 染色 | 第36页 |
| 3.2.10 Bodipy 染色 | 第36页 |
| 3.2.11 酶联免疫反应(ELISA)检测蛋白浓度变化 | 第36-37页 |
| 3.2.12 数据统计与分析 | 第37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-41页 |
| 3.3.1 FABP4 超表达与干扰效率检测 | 第37-38页 |
| 3.3.2 FABP4 对 3T3-L1 前脂肪细胞中脂代谢的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.3 FABP4 对脂代谢相关基因表达的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.4 FABP4 对脂肪酸代谢关键酶活性的影响 | 第40页 |
| 3.3.5 FABP4 对脂肪酸转运因子表达的影响 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-44页 |
| 第四章 FABP4 对 3T3-L1 脂肪细胞中线粒体功能的调控 | 第44-52页 |
| 4.1 材料 | 第44页 |
| 4.2 方法 | 第44-46页 |
| 4.2.1 细胞培养与转染 | 第44页 |
| 4.2.2 3T3-L1 细胞的诱导分化 | 第44-45页 |
| 4.2.3 JC-1 染色检测线粒体膜通透性 | 第45页 |
| 4.2.4 流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位 | 第45页 |
| 4.2.5 3T3-L1 细胞中 Cytc 表达量的免疫荧光分析 | 第45页 |
| 4.2.6 Real-time PCR 检测脂代谢相关基因 mRNA 表达量 | 第45-46页 |
| 4.2.7 Western blot 检测脂代谢标志蛋白及信通路标志蛋白磷酸化水平 | 第46页 |
| 4.2.8 数据统计与分析 | 第46页 |
| 4.4 结果与分析 | 第46-50页 |
| 4.4.1 3T3-L1 细胞中线粒体功能相关基因表达和 mtDNA 数量检测 | 第46-47页 |
| 4.4.2 3T3-L1 细胞线粒体功能相关蛋白的表达 | 第47-48页 |
| 4.4.3 FABP4 对 3T3-L1 细胞线粒体膜通透性的作用 | 第48页 |
| 4.4.4 FABP4 对 3T3-L1 细胞中 Cytc 表达的作用 | 第48-49页 |
| 4.4.5 FABP4 对脂肪细胞中相关信号通路的影响 | 第49-50页 |
| 4.5 讨论 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52页 |
| 创新点 | 第52页 |
| 进一步研究计划 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
