摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
目录 | 第8-11页 |
缩写词 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
1.1 磷的生物学功能 | 第12页 |
1.2 磷的吸收与利用 | 第12页 |
1.3 土壤中磷含量现状 | 第12-13页 |
1.4 植物应对低磷胁迫机制 | 第13-15页 |
1.4.1 形态适应水平 | 第13-14页 |
1.4.2 生理生化水平 | 第14-15页 |
1.5 低磷应答信号网络 | 第15-22页 |
1.5.1 磷信号感知通路 | 第16页 |
1.5.2 磷信号分子 | 第16-20页 |
1.5.3 转录调控 | 第20-22页 |
1.6 论文的选题意义及依据 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-36页 |
2.1 实验仪器 | 第24-25页 |
2.2 实验材料 | 第25-28页 |
2.2.1 植物材料 | 第25页 |
2.2.2 药品和试剂 | 第25页 |
2.2.3 常用培养基与常用溶液的配制 | 第25-26页 |
2.2.4 拟南芥总 DNA 抽提液 | 第26页 |
2.2.5 无机磷含量测定溶液 | 第26-27页 |
2.2.6 GUS 染液试剂(1 mL) | 第27页 |
2.2.7 GUS 酶活测定溶液 | 第27页 |
2.2.8 考马斯亮蓝 G250 染色液(250 mL) | 第27页 |
2.2.9 H~+-ATPase 活性测定液 | 第27-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-36页 |
2.3.1 拟南芥种植方法 | 第28-29页 |
2.3.2 难溶磷培养基的配置 | 第29页 |
2.3.3 低磷胁迫实验方法 | 第29页 |
2.3.4 溴甲酚紫指示剂培养基 pH 原位显示法 | 第29页 |
2.3.5 拟南芥根际酸化能力定量 | 第29-30页 |
2.3.6 拟南芥杂交方法 | 第30页 |
2.3.7 拟南芥根表皮细胞胞质 pH 的测定 | 第30-31页 |
2.3.8 无机磷浓度测定 | 第31页 |
2.3.9 总磷浓度测定 | 第31页 |
2.3.10 ~(33)P 吸收测定 | 第31-32页 |
2.3.11 花青素含量的测定 | 第32页 |
2.3.12 可溶性蛋白质含量的测定 | 第32页 |
2.3.13 H~+-ATPase 活性测定方法 | 第32-33页 |
2.3.14 GUS 染色分析 | 第33页 |
2.3.15 GUS 酶活定量测定 | 第33-34页 |
2.3.16 拟南芥基因组 DNA 提取方法 | 第34页 |
2.3.17 拟南芥总 RNA 提取 | 第34页 |
2.3.18 反转录制备拟南芥 cDNA | 第34-36页 |
3 结果与分析 | 第36-56页 |
3.1 低磷诱导 miR156 表达量上调 | 第36-37页 |
3.2 低磷胁迫下 MIR156 与 MIM156 表型分析 | 第37-41页 |
3.2.1 低磷胁迫下 MIR156 与 MIM156 根系形态发生显著改变 | 第37-38页 |
3.2.2 低磷诱导 MIR156 根际酸化增强 | 第38-41页 |
3.3 低磷诱导 MIR156 胞质 pH 升高 | 第41-44页 |
3.3.1 拟南芥根表皮细胞胞内 pH 标准曲线的制作 | 第41页 |
3.3.2 低磷诱导 MIR156 根表皮细胞胞质 pH 升高 | 第41-44页 |
3.4 MIR156 在低磷胁迫下根冠与侧根原基处胞质碱化严重 | 第44-45页 |
3.5 低磷胁迫下 MIR156 体内 H~+-ATP 酶活性增强 | 第45-46页 |
3.6 MIM156 根际活化不溶性磷酸盐能力缺失 | 第46-48页 |
3.7 MIM156 在磷充足条件下体内磷含量增加 | 第48-49页 |
3.8 低磷胁迫下,受 miR156 调控的 SPL 基因启动子活性降低 | 第49页 |
3.9 受 miR156 调控的 SPLs 基因功能存在冗余现象 | 第49-51页 |
3.10 miR156 的靶基因 SPL9 超表达与 MIM156 表型相似 | 第51-53页 |
3.11 低磷胁迫下 rspl9 胞质 pH 低于 WT | 第53-54页 |
3.12 rspl 对不溶磷环境适应性降低 | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
4.1 miR156 在调控植物根际酸化过程中起着重要作用 | 第56页 |
4.3 根际酸化是植物应对低磷胁迫的重要策略之一 | 第56页 |
4.2 SPL 基因功能有累加效应 | 第56页 |
4.4 植物根际的低浓度磷是触发植物低磷应答的信号 | 第56-57页 |
4.5 胞内 pH 值影响植物低磷应答 | 第57-58页 |
5 结论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68-70页 |