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东亚飞蝗有机磷抗性相关羧酸酯酶基因的特性及功能研究

中文摘要第1-13页
ABSTRACT第13-15页
第一章 前言第15-23页
   ·害虫抗药性研究第15-16页
     ·抗药性的产生第15页
     ·抗药性的检测第15-16页
     ·抗药性生理生化机制第16页
   ·酯酶研究进展第16-17页
     ·酯酶生化水平的研究第16-17页
     ·酯酶分子水平的研究第17页
   ·东亚飞蝗概述第17-20页
     ·东亚飞蝗分布、生活习性及生态特征第18页
     ·东亚飞蝗国内外研究概况第18-20页
       ·国内研究概况第18-19页
       ·国外研究概况第19-20页
   ·我国东亚飞蝗的为害及治理第20页
     ·我国东亚飞蝗的为害第20页
     ·我国东亚飞蝗治理策略第20页
   ·本文研究的内容及意义第20-23页
第二章 东亚飞蝗有机磷抗性相关羧酸酯酶基因特性分析第23-35页
   ·材料与方法第23-28页
     ·供试昆虫的采集及饲养第23页
     ·供试药品及主要仪器第23页
     ·东亚飞蝗EST数据库中羧酸酯酶基因的搜索第23-24页
     ·羧酸酯酶基因引物设计第24-25页
     ·筛选抗性相关羧酸酯酶基因第25-27页
       ·总RNA的提取第25-26页
       ·总RNA的纯化及第一链cDNA的合成第26-27页
       ·实时荧光定量PCR法筛选抗性相关羧酸酯酶基因第27页
     ·抗性相关羧酸酯酶基因不同组织部位的表达第27-28页
       ·总RNA的提取及纯化第27页
       ·第一链cDNA的合成第27页
       ·抗性相关羧酸酯酶基因在敏感种群和抗性品系中组织分布第27-28页
     ·抗性相关羧酸酯酶基因在不同龄期的表达第28页
       ·总RNA的提取及纯化第28页
       ·第一链cDNA的合成第28页
       ·抗性相关羧酸酯酶基因不同龄期的mRNA差异表达第28页
   ·结果与分析第28-33页
     ·东亚飞蝗羧酸酯酶基因在EST数据库中的搜索第28页
     ·抗性相关羧酸酯酶基因的筛选第28-29页
     ·抗性相关羧酸酯酶基因组织组织分布特征第29-32页
     ·抗性相关羧酸酯酶基因不同龄期的表达特性第32-33页
   ·讨论第33-35页
第三章 东亚飞蝗羧酸酯酶基因克隆第35-45页
   ·材料与方法第35-39页
     ·供试昆虫第35页
     ·主要试剂及主要仪器第35页
     ·东亚飞蝗羧酸酯酶基因的克隆第35-39页
       ·总RNA的提取及纯化第35页
       ·RACE cDNA的合成第35-36页
       ·羧酸酯酶基因RACE引物设计第36页
       ·羧酸酯酶基因3’和5’RACE末端快速扩增第36-37页
       ·PCR扩增产物回收与纯化第37-38页
       ·PCR产物与载体的连接反应第38页
       ·转化与菌体扩大培养第38页
       ·质粒回收、检测及测序第38页
       ·核苷酸及推导的氨基酸序列分析第38-39页
     ·羧酸酯酶基因聚类分析第39页
   ·结果与分析第39-43页
     ·东亚飞蝗羧酸酯酶基因的RACE扩增结果第39页
     ·羧酸酯酶基因核苷酸及推导氨基酸序列第39-40页
     ·羧酸酯酶基因聚类分析结果第40-43页
   ·讨论第43-45页
第四章 东亚飞蝗羧酸酯酶基因在抗药性中的功能研究第45-53页
   ·材料与方法第45-48页
     ·供试昆虫的采集与饲养第45页
     ·供试药品第45-46页
     ·生物测定第46页
     ·双链RNA的引物设计第46页
     ·双链RNA的合成第46-47页
       ·总RNA的提取与纯化第46页
       ·cDNA的合成第46-47页
       ·PCR扩增第47页
       ·体外反转录合成双链RNA第47页
     ·东亚飞蝗羧酸酯酶基因沉默对其表达的影响第47页
     ·羧酸酯酶基因沉默后东亚飞蝗对马拉硫磷敏感性分析第47-48页
   ·结果与分析第48-50页
     ·东亚飞蝗敏感品系和天津田间种群2龄若虫对马拉硫磷敏感性的比较第48页
     ·东亚飞蝗羧酸酯酶基因沉默对其表达的影响第48-49页
     ·羧酸酯酶基因沉默后东亚飞蝗对马拉硫磷敏感性分析第49-50页
   ·讨论第50-53页
全文总结第53-55页
参考文献第55-63页
硕士期间研究成果第63-65页
致谢第65-66页
个人简况及联系方式第66-68页

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