摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1.1 雪莲概述 | 第11-16页 |
1.1.1 雪莲的种类及形态特征 | 第11-12页 |
1.1.2 雪莲的药用成分 | 第12-13页 |
1.1.3 雪莲的药用价值 | 第13-14页 |
1.1.4 野生雪莲资源匮乏 | 第14页 |
1.1.5 雪莲生物学研究 | 第14-16页 |
1.2 类黄酮次生代谢研究 | 第16-21页 |
1.2.1 类黄酮的种类 | 第16页 |
1.2.2 植物类黄酮生物合成途径研究进展 | 第16-19页 |
1.2.3 水母雪莲类黄酮途径及代谢研究 | 第19-20页 |
1.2.4 黄酮合成酶 FNS 基因生物学研究进展 | 第20-21页 |
1.3 研究的目的及意义 | 第21-22页 |
第二章 水母雪莲 SMFNS II 基因克隆及生物信息学分析 | 第22-37页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.1 植物材料与菌株 | 第22页 |
2.1.2 试剂 | 第22页 |
2.1.3 仪器 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-27页 |
2.2.1 引物设计 | 第22页 |
2.2.2 水母雪莲 Total RNA 提取与检测 | 第22-23页 |
2.2.3 cDNA 第一链的合成 | 第23页 |
2.2.4 保守序列片段克隆 | 第23-24页 |
2.2.5 5’- & 3’- RACE 反应 | 第24-25页 |
2.2.6 SmFNS II 基因全长扩增 | 第25-26页 |
2.2.7 T 载体连接及测序 | 第26-27页 |
2.2.8 基因序列的生物信息学分析 | 第27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-36页 |
2.3.1 SmFNS II 基因全长克隆 | 第27-30页 |
2.3.2 SmFNS II 基因序列分析 | 第30-31页 |
2.3.3 水母雪莲 SmFNS II 氨基酸序列比对 | 第31-33页 |
2.3.4 SmFNS II 基因的生物信息学分析 | 第33-36页 |
2.4 小结 | 第36-37页 |
第三章 水母雪莲 SMFNS II 基因表达分析 | 第37-40页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第37页 |
3.1.1 材料 | 第37页 |
3.1.2 试剂 | 第37页 |
3.1.3 仪器 | 第37页 |
3.2 试验方法 | 第37-38页 |
3.2.1 Total RNA 提取 | 第37页 |
3.2.2 cDNA 合成 | 第37页 |
3.2.3 荧光实时定量 PCR 分析 | 第37-38页 |
3.3 结果与分析 | 第38-40页 |
第四章 水母雪莲 SMFNS II 基因原核表达 | 第40-47页 |
4.1 实验材料与试剂 | 第40页 |
4.1.1 载体与菌株 | 第40页 |
4.1.2 试剂 | 第40页 |
4.1.3 仪器 | 第40页 |
4.2 实验方法 | 第40-44页 |
4.2.1 引物设计 | 第40页 |
4.2.2 水母雪莲 SmFNS II 基因原核表达载体构建 | 第40-42页 |
4.2.3 E. coli BL21(DE3)原核表达的诱导 | 第42-43页 |
4.2.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第43-44页 |
4.3 结果与分析 | 第44-46页 |
4.3.1 pET-SmFNSII 载体构建 | 第44-45页 |
4.3.2 原核表达结果 | 第45-46页 |
4.4 小结 | 第46-47页 |
第五章 水母雪莲 SMFNS II 基因遗传转化 | 第47-51页 |
5.1 实验材料与试剂 | 第47页 |
5.1.1 材料与菌株 | 第47页 |
5.1.2 仪器 | 第47页 |
5.2 实验方法 | 第47-48页 |
5.2.1 引物设计 | 第47页 |
5.2.2 水母雪莲 SmFNS II 基因植物表达载体的构建 | 第47页 |
5.2.3 遗传转化夏堇 | 第47-48页 |
5.3 结果与分析 | 第48-51页 |
5.3.1 pBI121-SmFNSII 载体构建 | 第48-49页 |
5.3.2 夏堇遗传转化 | 第49-51页 |
第六章 结论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |