摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
英文缩略词表 | 第13-14页 |
引言 | 第14-16页 |
第一章 pcDNA3.1/Hygro(+)-MafA 载体和 pEGFP-MafA 载体的构建 | 第16-28页 |
1.1 序言 | 第16页 |
1.2 材料、试剂、仪器 | 第16-18页 |
1.2.1 材料 | 第16页 |
1.2.2 试剂/试剂盒 | 第16-17页 |
1.2.3 仪器 | 第17-18页 |
1.3 方法和步骤 | 第18-23页 |
1.3.1 MafA 基因序列的获得 | 第18-20页 |
1.3.2 MafA 基因与 pcDNA3.1/Hygro(+)载体的连接 | 第20-23页 |
1.3.3 MafA 基因与 pEGFP-C1 载体的连接 | 第23页 |
1.4 结果 | 第23-27页 |
1.4.1 提取的总 RNA 完整性鉴定 | 第23-24页 |
1.4.2 pcDNA3.1/Hygro(+)-MafA 载体的鉴定 | 第24-25页 |
1.4.3 pEGFP-MafA 载体的鉴定 | 第25-27页 |
1.5 讨论 | 第27-28页 |
第二章 大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养和转染及功能测定 | 第28-49页 |
2.1 序言 | 第28-29页 |
2.2 材料、试剂及仪器 | 第29-30页 |
2.2.1 材料 | 第29页 |
2.2.2 试剂/试剂盒 | 第29页 |
2.2.3 仪器 | 第29-30页 |
2.3 方法与步骤 | 第30-40页 |
2.3.1 大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养及冻存 | 第30-31页 |
2.3.2 大鼠骨髓间充质干细胞表面标志鉴定 | 第31-32页 |
2.3.3 Western blot 鉴定转化株 | 第32-37页 |
2.3.4 q-PCR 检测胰岛素相关基因的表达 | 第37-39页 |
2.3.5 ELISA 法检测胰岛素的分泌 | 第39页 |
2.3.6 统计分析 | 第39-40页 |
2.4 结果 | 第40-46页 |
2.4.1 大鼠骨髓间充质干细胞的形态表现 | 第40页 |
2.4.2 大鼠 BMSCs 生长曲线 | 第40-41页 |
2.4.3 流式细胞术检测大鼠骨髓间充质干细胞的表面标志 | 第41页 |
2.4.4 Western blot 鉴定转染株 | 第41-42页 |
2.4.5 绿色荧光质粒的细胞内定位 | 第42-43页 |
2.4.6 形态学改变 | 第43页 |
2.4.7 胰岛素相关基因的表达 | 第43-45页 |
2.4.8 胰岛素分泌浓度的表达 | 第45-46页 |
2.5 讨论 | 第46-49页 |
第三章 小结 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
文献综述 | 第54-64页 |
参考文献 | 第60-64页 |
致谢 | 第64-65页 |