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利用BSMV-VIGS技术鉴定SA路径相关基因抗小麦赤霉病的功能

中文摘要第10-12页
ABSTRACT第12-13页
1 前言第14-26页
    1.1 小麦赤霉病第14-16页
        1.1.1 小麦赤霉病的危害第14-15页
        1.1.2 小麦赤霉病抗病类型第15页
        1.1.3 小麦赤霉病抗病机制研究进展第15-16页
            1.1.3.1 植物信号路径与小麦赤霉病抗性第15-16页
            1.1.3.2 小麦赤霉病的抗性分子机制第16页
    1.2 水杨酸介导的抗病信号路径研究进展第16-22页
        1.2.1 水杨酸与植物抗病性第17-19页
            1.2.1.1 植物的一般免疫特性第17-18页
            1.2.1.2 水杨酸的生物合成第18页
            1.2.1.3 水杨酸是植物抗病反应中的重要信号分子第18-19页
        1.2.2 水杨酸介导的信号路径第19-21页
            1.2.2.1 水杨酸与SAR信号转导第19-20页
            1.2.2.2 水杨酸介导的的上游信号第20页
            1.2.2.3 水杨酸介导的的下游信号第20-21页
        1.2.3 NPR1及其同源基因第21-22页
    1.3 病毒诱导的基因沉默技术研究进展第22-24页
        1.3.1 VIGS技术原理第22页
        1.3.2 VIGS技术的优缺点第22-23页
        1.3.3 大麦条纹花叶病毒诱导的基因沉默技术的研究进展第23-24页
            1.3.3.1 大麦条纹花叶病毒简介第23页
            1.3.3.2 大麦条纹花叶病毒诱导的基因沉默技术的应用第23-24页
    1.4 短柄草在小麦功能基因研究上的应用第24-25页
    1.5 本研究的目的和意义第25-26页
2 材料与方法第26-40页
    2.1 材料第26-29页
        2.1.1 植物材料第26页
        2.1.2 菌株与质粒第26页
        2.1.3 酶及生化试剂第26页
        2.1.4 试验地点第26页
        2.1.5 PCR引物第26-28页
        2.1.6 主要溶液和培养基配制第28-29页
        2.1.7 主要仪器第29页
    2.2 方法第29-40页
        2.2.1 植物组织总RNA提取第29-30页
        2.2.2 第一链CDNA的合成及PCR反应第30-31页
        2.2.3 目的DNA片段的纯化回收第31页
        2.2.4 回收产物与T载体连接第31-32页
        2.2.5 普通质粒小量提取第32-33页
        2.2.6 热激法转化E.COLI感受态细胞第33页
        2.2.7 农杆菌感受态的制备第33页
        2.2.8 冻融法转化农杆菌感受态细胞第33-34页
        2.2.9 生物信息学分析第34页
        2.2.10 BSMV-VIGS的应用第34-36页
            2.2.10.1 BSMV基因沉默载体的构建第34页
            2.2.10.2 BSMV-VIGS技术诱导小麦基因沉默的程序第34-36页
        2.2.11 QRT-PCR分析基因表达第36页
        2.2.12 病原菌培养、接种和抗病性鉴定第36-37页
            2.2.12.1 离体叶片赤霉病接种方法及抗病性鉴定第36页
            2.2.12.2 小麦穗部赤霉病接种方法及抗病性鉴定第36-37页
            2.2.12.3 短柄草胚芽鞘的赤霉病接种方法及抗病性鉴定第37页
        2.2.13 台盼蓝染色检测小麦叶片腐生斑第37页
        2.2.14 TAICS短柄草遗传转化第37-40页
            2.2.14.1 TAICS短柄草遗传转化载体构建第37页
            2.2.14.2 短柄草愈伤组织的诱导第37-38页
            2.2.14.3 农杆菌转化短柄草愈伤组织第38页
            2.2.14.4 愈伤的筛选与再分化第38-40页
3 结果与分析第40-54页
    3.1 利用TAPDS基因探索BSMV-VIGS体系在小麦上的应用第40-44页
        3.1.1 利用BSMV对小麦苗期PDS基因沉默的研究第40-41页
        3.1.2 利用BSMV-VIGS研究小麦穗部PDS基因沉默第41-42页
        3.1.3 BSMV-VIGS技术在小麦近缘属中的应用第42-44页
    3.2 利用VIGS研究相关基因的赤霉病抗性第44-49页
        3.2.1 禾谷镰刀菌菌株的选择第44-45页
        3.2.2 利用VIGS技术鉴定SA信号路径相关基因的小麦赤霉病抗性第45-48页
            3.2.2.1 小麦苗期鉴定SA信号路径相关基因的赤霉病抗性第45-46页
            3.2.2.2 小麦成株期鉴定SA信号路径相关基因的赤霉病抗性第46-48页
        3.2.3 TAICS基因的短柄草遗传转化与赤霉病抗性鉴定第48-49页
            3.2.3.1 TAICS基因的短柄草遗传转化第48页
            3.2.3.2 转基因短柄草的赤霉病抗性鉴定第48-49页
    3.3 SA处理对赤霉病扩展的影响第49-51页
        3.3.1 叶部SA处理对赤霉病扩展的影响第49-50页
        3.3.2 穗部SA处理对赤霉病扩展的影响第50-51页
    3.4 SA信号路径关键基因的表达分析第51-53页
        3.4.1 SA信号路径基因在禾谷镰刀菌诱导下的表达分析第51-52页
        3.4.2 外源SA处理后的基因表达分析第52-53页
    3.5 小麦与白粉病互作过程中TAICS基因的作用第53-54页
4 讨论第54-57页
    4.1 BSMV-VIGS体系的建立及其在赤霉病抗性相关基因研究上的应用第54页
    4.2 SA对小麦赤霉病抗性的影响第54-55页
    4.3 SA信号转导路径相关基因对赤霉病抗性的影响第55-57页
5 结论第57-59页
参考文献第59-68页
致谢第68-69页
攻读硕士学位期间发表论文情况第69页

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