| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一部分：pGPU6/GFP/Neo-shRNA-CrkL 表达载体的构建及 CrkL 在小鼠肝癌细胞株 Hca-P 中的表达 | 第14-28页 |
| 材料和方法 | 第14-20页 |
| 1. 材料 | 第14-16页 |
| 1.1 实验动物及细胞系 | 第14-15页 |
| 1.2 主要仪器及试剂 | 第15-16页 |
| 2. 方法 | 第16-20页 |
| 2.1 Western blot 检测 Hca-F 及 Hca-P 细胞CrkL 蛋白表达 | 第16-18页 |
| 2.2 载体构建及验证 | 第18-19页 |
| 2.3 Hca-P 细胞的转染 | 第19-20页 |
| 2.4 单克隆细胞的筛选 | 第20页 |
| 2.5 Western blot 检测各组细胞 CrkL 蛋白表达 | 第20页 |
| 结果 | 第20-25页 |
| 1.Western blot 检测 Hca-F 及 Hca-P 细胞 CrkL 蛋白表达结果 | 第20-21页 |
| 2.载体构建及验证结果 | 第21-23页 |
| 3.Hca-P 细胞转染结果 | 第23-24页 |
| 4.单克隆细胞筛选结果 | 第24页 |
| 5. Western blot 检测各组细胞 CrkL 蛋白表达结果 | 第24-25页 |
| 讨论 | 第25-27页 |
| 总结 | 第27-28页 |
| 第二部分：CrkL 表达下调对 Hca-P 细胞增殖、迁移与侵袭、足垫成瘤性及淋巴结转移力的影响 | 第28-43页 |
| 材料和方法 | 第28-31页 |
| 1.材料 | 第28-29页 |
| 1.1 实验动物及细胞系 | 第28页 |
| 1.2 主要仪器及试剂 | 第28-29页 |
| 2.方法 | 第29页 |
| 2.1 CCK-8 法检测 CrkL 下调对 Hca-P 细胞增殖能力的影响 | 第29-31页 |
| 2.2 Transwell 小室法检测 CrkL 下调对 Hca-P 细胞迁移及侵袭能力的影响 | 第29-31页 |
| 2.3 小鼠足垫种植方法分析 CrkL 下调对小鼠足垫的成瘤性及体内淋巴结转移率的影响 | 第31页 |
| 结果 | 第31-38页 |
| 1. CrkL 表达下调对 Hca-P 细胞增殖能力有影响 | 第31-32页 |
| 2. CrkL 表达下调促进 Hca-P 细胞的迁移能力 | 第32-34页 |
| 3. CrkL 表达下调促进 Hca-P 细胞的侵袭能力 | 第34-35页 |
| 4. CrkL 表达下调促进 Hca-P 细胞体内成瘤 | 第35-36页 |
| 5. CrkL 表达下调促进 Hca-P 细胞淋巴结转移 | 第36-38页 |
| 讨论 | 第38-41页 |
| 总结 | 第41-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 综述 | 第48-60页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
