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氟对小鼠Y染色体微缺失基因的影响及机制研究

摘要第6-8页
前言第8-11页
试验内容第11-37页
    1 试验材料第11-12页
        1.1 试验动物第11页
        1.2 主要试剂第11-12页
        1.3 主要仪器和设备第12页
        1.4 主要实验溶液的配制第12页
    2 试验方法第12-20页
        2.1 试验动物模型的建立第12-13页
        2.2 样品的采集和前处理第13页
            2.2.1 分离血清第13页
            2.2.2 分离睾丸和附睾第13页
            2.2.3 制备精子悬液第13页
            2.2.4 制备睾丸匀浆第13页
        2.3 主要观察、测定项目与方法第13-15页
            2.3.1 小鼠生长发育状况的观察及其生长性能的测定第13页
            2.3.2 脏器系数的测定第13-14页
            2.3.3 小鼠股骨氟含量的测定第14页
            2.3.4 小鼠精子密度的测定第14页
            2.3.5 精子畸形率的测定第14-15页
            2.3.6 精子头部畸形率的测定第15页
            2.3.7 小鼠睾丸组织形态学观察第15页
            2.3.8 血清和组织中睾酮含量的测定第15页
        2.4 小鼠睾丸Y染色体微缺失基因和HSF2 mRNA表达的检测第15-18页
            2.4.1 小鼠睾丸总RNA的提取第15-16页
            2.4.2 睾丸总RNA质量鉴定第16页
            2.4.3 睾丸Y染色体微缺失基因和HSF2引物设计第16-17页
            2.4.4 RT-PCR反应体系建立第17页
            2.4.5 RT-PCR扩增条件建立第17-18页
        2.5 HSF2蛋白含量的测定第18-19页
            2.5.1 小鼠睾丸蛋白的提取第18页
            2.5.2 BCA法测定蛋白浓度第18-19页
            2.5.3 ELISA检测小鼠热休克转录因子2(HSF2)蛋白的表达第19页
        2.6 数据收集处理和分析第19-20页
    3 实验结果第20-31页
        3.1 实验动物的一般情况观察及生长发育状况的测定结果第20-21页
        3.2 各组小鼠主要脏器重量及脏器系数测定结果第21-22页
        3.3 小鼠股骨氟含量的测定结果第22页
        3.4 小鼠附睾精子密度的测定结果第22页
        3.5 小鼠附睾精子畸形率的测定结果第22-23页
        3.6 小鼠附睾精子头部畸形率的测定结果第23页
        3.7 小鼠睾丸组织切片HE染色结果第23-25页
        3.8 小鼠血清中睾酮含量的测定结果第25页
        3.9 小鼠睾丸组织中睾酮含量的测定结果第25页
        3.10 小鼠睾丸Y染色体微缺失基因和HSF2mRNA表达的检测结果第25-31页
            3.10.1 睾丸组织中总RNA质量鉴定第25-26页
            3.10.2 样品扩增的动力学曲线第26-27页
            3.10.3 样品QRT-PCR溶解曲线第27-29页
            3.10.4 氟对小鼠睾丸组织中DAZ,RBMY DDX3Y Sly,Ssty2,HSF2mRNA表达影响的结果第29-31页
        3.11 HSF2蛋白含量的测定结果第31页
    4 分析与讨论第31-37页
        4.1 动物模型的建立第31-32页
        4.2 不同浓度的氟对雄性小鼠体重以及睾丸、附睾系数的影响第32页
        4.3 氟化钠对小鼠精液品质的影响第32页
        4.4 氟化钠对雄性小鼠血清和睾丸睾酮激素水平的影响第32-33页
        4.5 氟化钠对雄性小鼠睾丸组织结构的影响第33-34页
        4.6 氟化钠对雄性小鼠与精子发生有关的Y染色体微缺失基因第34-37页
            4.6.1 氟化钠对雄性小鼠精子发生的影响第34页
            4.6.2 Y染色体微缺失基因对精子发生的影响及氟化钠对这些基因的影响第34-37页
全文结论第37-38页
参考文献第38-42页
Abstract第42-43页
致谢第44页

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