摘要 | 第6-8页 |
前言 | 第8-11页 |
试验内容 | 第11-37页 |
1 试验材料 | 第11-12页 |
1.1 试验动物 | 第11页 |
1.2 主要试剂 | 第11-12页 |
1.3 主要仪器和设备 | 第12页 |
1.4 主要实验溶液的配制 | 第12页 |
2 试验方法 | 第12-20页 |
2.1 试验动物模型的建立 | 第12-13页 |
2.2 样品的采集和前处理 | 第13页 |
2.2.1 分离血清 | 第13页 |
2.2.2 分离睾丸和附睾 | 第13页 |
2.2.3 制备精子悬液 | 第13页 |
2.2.4 制备睾丸匀浆 | 第13页 |
2.3 主要观察、测定项目与方法 | 第13-15页 |
2.3.1 小鼠生长发育状况的观察及其生长性能的测定 | 第13页 |
2.3.2 脏器系数的测定 | 第13-14页 |
2.3.3 小鼠股骨氟含量的测定 | 第14页 |
2.3.4 小鼠精子密度的测定 | 第14页 |
2.3.5 精子畸形率的测定 | 第14-15页 |
2.3.6 精子头部畸形率的测定 | 第15页 |
2.3.7 小鼠睾丸组织形态学观察 | 第15页 |
2.3.8 血清和组织中睾酮含量的测定 | 第15页 |
2.4 小鼠睾丸Y染色体微缺失基因和HSF2 mRNA表达的检测 | 第15-18页 |
2.4.1 小鼠睾丸总RNA的提取 | 第15-16页 |
2.4.2 睾丸总RNA质量鉴定 | 第16页 |
2.4.3 睾丸Y染色体微缺失基因和HSF2引物设计 | 第16-17页 |
2.4.4 RT-PCR反应体系建立 | 第17页 |
2.4.5 RT-PCR扩增条件建立 | 第17-18页 |
2.5 HSF2蛋白含量的测定 | 第18-19页 |
2.5.1 小鼠睾丸蛋白的提取 | 第18页 |
2.5.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第18-19页 |
2.5.3 ELISA检测小鼠热休克转录因子2(HSF2)蛋白的表达 | 第19页 |
2.6 数据收集处理和分析 | 第19-20页 |
3 实验结果 | 第20-31页 |
3.1 实验动物的一般情况观察及生长发育状况的测定结果 | 第20-21页 |
3.2 各组小鼠主要脏器重量及脏器系数测定结果 | 第21-22页 |
3.3 小鼠股骨氟含量的测定结果 | 第22页 |
3.4 小鼠附睾精子密度的测定结果 | 第22页 |
3.5 小鼠附睾精子畸形率的测定结果 | 第22-23页 |
3.6 小鼠附睾精子头部畸形率的测定结果 | 第23页 |
3.7 小鼠睾丸组织切片HE染色结果 | 第23-25页 |
3.8 小鼠血清中睾酮含量的测定结果 | 第25页 |
3.9 小鼠睾丸组织中睾酮含量的测定结果 | 第25页 |
3.10 小鼠睾丸Y染色体微缺失基因和HSF2mRNA表达的检测结果 | 第25-31页 |
3.10.1 睾丸组织中总RNA质量鉴定 | 第25-26页 |
3.10.2 样品扩增的动力学曲线 | 第26-27页 |
3.10.3 样品QRT-PCR溶解曲线 | 第27-29页 |
3.10.4 氟对小鼠睾丸组织中DAZ,RBMY DDX3Y Sly,Ssty2,HSF2mRNA表达影响的结果 | 第29-31页 |
3.11 HSF2蛋白含量的测定结果 | 第31页 |
4 分析与讨论 | 第31-37页 |
4.1 动物模型的建立 | 第31-32页 |
4.2 不同浓度的氟对雄性小鼠体重以及睾丸、附睾系数的影响 | 第32页 |
4.3 氟化钠对小鼠精液品质的影响 | 第32页 |
4.4 氟化钠对雄性小鼠血清和睾丸睾酮激素水平的影响 | 第32-33页 |
4.5 氟化钠对雄性小鼠睾丸组织结构的影响 | 第33-34页 |
4.6 氟化钠对雄性小鼠与精子发生有关的Y染色体微缺失基因 | 第34-37页 |
4.6.1 氟化钠对雄性小鼠精子发生的影响 | 第34页 |
4.6.2 Y染色体微缺失基因对精子发生的影响及氟化钠对这些基因的影响 | 第34-37页 |
全文结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
Abstract | 第42-43页 |
致谢 | 第44页 |