摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-10页 |
文献综述 | 第14-28页 |
第一章 Wnt/β-catenin信号转导通路研究进展 | 第14-18页 |
1.1 Wnt/β-catenin通路组成 | 第14-15页 |
1.2 Wnt/β-catenin通路与卵巢发育 | 第15-16页 |
1.3 Wnt/β-catenin通路与褪黑素对神经系统的保护作用 | 第16页 |
1.4 Wnt/β-catenin通路与PI3K/Akt通路互作 | 第16-18页 |
第二章 褪黑素研究进展 | 第18-23页 |
2.1 褪黑素受体 | 第18-19页 |
2.2 褪黑素抗氧化功能 | 第19-20页 |
2.2.1 以电子供体的形式与自由基直接结合达到清除自由基的作用 | 第19页 |
2.2.2 调控抗氧化酶类活性及表达 | 第19-20页 |
2.3 褪黑素对卵巢发育的影响 | 第20-21页 |
2.4 褪黑素与卵母细胞成熟及胚胎发育 | 第21-23页 |
第三章 PI3K信号转导通路研究进展 | 第23-28页 |
3.1 PI3K信号转导通路构成 | 第23-24页 |
3.2 PI3K信号转导通路对卵巢、卵母细胞发育的影响 | 第24-26页 |
3.3 PI3K信号转导通路与卵巢肿瘤 | 第26-27页 |
3.4 本研究目的与意义 | 第27-28页 |
试验研究 | 第28-61页 |
第四章 Wnt/β-catenin通路对猪卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响 | 第28-36页 |
4.1 前言 | 第28页 |
4.2 材料与方法 | 第28-31页 |
4.2.1 主要仪器 | 第28页 |
4.2.2 主要试验试剂 | 第28页 |
4.2.3 猪卵巢采集和运送 | 第28-29页 |
4.2.4 猪卵巢细胞收集和体外培养 | 第29页 |
4.2.5 猪卵巢颗粒细胞的鉴定 | 第29页 |
4.2.6 猪卵巢颗粒细胞增殖活力检测 | 第29页 |
4.2.7 RNA提取与qRT-PCR | 第29-30页 |
4.2.8 猪卵巢颗粒细胞蛋白提取与免疫印迹 | 第30页 |
4.2.9 统计分析 | 第30-31页 |
4.3 试验结果与分析 | 第31-34页 |
4.3.1 猪卵巢颗粒细胞体外培养与细胞鉴定 | 第31-32页 |
4.3.2 IWR-1-endo降低猪卵巢颗粒细胞增殖活力 | 第32页 |
4.3.3 IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路调控猪卵巢颗粒细胞周期基因表达 | 第32-34页 |
4.3.4 IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路诱导猪卵巢颗粒凋亡相关基因表达 | 第34页 |
4.4 讨论 | 第34-35页 |
4.5 小结 | 第35-36页 |
第五章 Wnt通路对猪卵巢颗粒细胞类固醇激素合成和性腺激素受体相关基因表达的影响 | 第36-43页 |
5.1 前言 | 第36页 |
5.2 材料与方法 | 第36-37页 |
5.2.1 主要仪器 | 第36页 |
5.2.2 主要试验试剂 | 第36-37页 |
5.2.3 猪卵巢采集和运送 | 第37页 |
5.2.4 猪卵巢颗粒细胞收集和体外培养 | 第37页 |
5.2.4 RNA提取与qRT-PCR | 第37页 |
5.2.5 猪卵巢颗粒细胞蛋白提取及WesternBlot | 第37页 |
5.2.6 统计分析 | 第37页 |
5.3 试验结果与分析 | 第37-40页 |
5.3.1 无FSH培养体系中IWR-1-endo抑制Wnt/β-catenin通路 | 第37页 |
5.3.2 FSH影响Wnt/β-catenin通路对CYP19A1和StAR基因的调控 | 第37-39页 |
5.3.3 FSH影响Wnt/β-catenin通路对性腺激素受体基因和CCND2基因的调控 | 第39-40页 |
5.4 讨论 | 第40-42页 |
5.5 小结 | 第42-43页 |
第六章 褪黑素通过Wnt/β-catenin通路调控猪卵巢颗粒细胞增殖、凋亡和类固醇激素生成 | 第43-53页 |
6.1 前言 | 第43-44页 |
6.2 材料与方法 | 第44-45页 |
6.2.1 主要仪器 | 第44页 |
6.2.2 主要试验试剂 | 第44页 |
6.2.3 猪卵巢采集和运送 | 第44页 |
6.2.4 猪卵巢颗粒细胞收集和体外培养 | 第44页 |
6.2.5 猪卵巢颗粒细胞增殖活力检测 | 第44页 |
6.2.6 RNA提取与qRT-PCR | 第44页 |
6.2.7 猪卵巢颗粒细胞蛋白提取与WesternBlot | 第44页 |
6.2.8 统计分析 | 第44-45页 |
6.3 试验结果与分析 | 第45-50页 |
6.3.1 不同浓度褪黑素对猪卵巢颗粒细胞增殖活力的影响 | 第45-46页 |
6.3.2 褪黑素对Wnt/β-catenin通路的影响 | 第46-47页 |
6.3.3 褪黑素调控猪卵巢颗粒细胞细胞周期和细胞凋亡 | 第47页 |
6.3.4 褪黑素调控猪卵巢颗粒细胞类固醇激素合成相关基因表达 | 第47-50页 |
6.4 讨论 | 第50-51页 |
6.5 小结 | 第51-53页 |
第七章 抑制PI3K通路对Wnt/β-catenin通路的影响 | 第53-61页 |
7.1 前言 | 第53-54页 |
7.2 材料与方法 | 第54-55页 |
7.2.1 主要仪器 | 第54页 |
7.2.2 主要试剂 | 第54页 |
7.2.3 猪卵巢采集和运送 | 第54页 |
7.2.4 猪卵巢颗粒细胞收集和体外培养 | 第54页 |
7.2.5 猪卵巢颗粒细胞增殖活力检测 | 第54页 |
7.2.6 RNA提取与qRT-PCR | 第54页 |
7.2.7 猪卵巢颗粒细胞蛋白质提取与WesternBlot | 第54-55页 |
7.2.8 统计分析 | 第55页 |
7.3 试验结果与分析 | 第55-59页 |
7.3.1 不同浓度Wortmannin对猪卵巢颗粒细胞增殖活力的影响 | 第55-56页 |
7.3.2 不同浓度Wortmannin对猪卵巢颗粒细胞Wnt/β-catenin通路的影响 | 第56-57页 |
7.3.3 Wortmannin处理猪卵巢颗粒细胞下调CYP19A1和CYP11A1基因表达 | 第57-58页 |
7.3.4 Wortmannin处理猪卵巢颗粒细胞调控性腺激素受体和凋亡相关基因的表达. | 第58-59页 |
7.4 讨论 | 第59-60页 |
7.5 小结 | 第60-61页 |
结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
附录一 | 第70-72页 |
附录二 | 第72-73页 |
附录三 | 第73-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
作者简介 | 第76页 |