| 摘要 | 第7-11页 |
| ABSTRACT | 第11-16页 |
| 目录 | 第17-21页 |
| 第1章 绪论 | 第21-40页 |
| 1.1 研究背景 | 第21-35页 |
| 1.1.1 新疆紫草次生代谢研究概况 | 第21-23页 |
| 1.1.2 诱导子对植物次生代谢作用研究概况 | 第23-28页 |
| 1.1.3 基因过表达和RNA干扰株系植物的次生代谢研究 | 第28-30页 |
| 1.1.4 生物信息学在药用植物研究中的应用 | 第30-35页 |
| 1.2 研究目的和意义 | 第35-37页 |
| 1.2.1 研究目的 | 第35-36页 |
| 1.2.2 研究意义 | 第36-37页 |
| 1.3 研究内容 | 第37-38页 |
| 1.4 课题来源及立题依据 | 第38-39页 |
| 1.4.1 课题来源 | 第38页 |
| 1.4.2 立题依据 | 第38-39页 |
| 1.5 技术路线图 | 第39-40页 |
| 第2章 几种诱导子对新疆紫草次生代谢的影响 | 第40-137页 |
| 2.1 实验目的 | 第40页 |
| 2.2 实验材料 | 第40页 |
| 2.3 实验仪器和试剂 | 第40-41页 |
| 2.4 实验方法 | 第41-44页 |
| 2.4.1 新疆紫草改良LS培养基配方 | 第41页 |
| 2.4.2 新疆紫草的培养 | 第41-42页 |
| 2.4.3 YE和重金属诱导方法 | 第42页 |
| 2.4.4 低温诱导方法 | 第42页 |
| 2.4.5 UV-C诱导方法 | 第42页 |
| 2.4.6 HPLC定量检测次生代谢物 | 第42-44页 |
| 2.5 实验结果与分析 | 第44-136页 |
| 2.5.1 YE和重金属对新疆紫草悬浮细胞次生代谢的影响 | 第44-95页 |
| 2.5.2 低温对新疆紫草悬浮细胞次生代谢的影响 | 第95-102页 |
| 2.5.3 UV-C对新疆紫草愈伤组织细胞次生代谢的影响 | 第102-136页 |
| 2.6 讨论 | 第136-137页 |
| 第3章 新疆紫草PAL、HMGR、PGT基因的过表达和RNA干扰载体的构建 | 第137-150页 |
| 3.1 实验目的 | 第137页 |
| 3.2 实验材料 | 第137页 |
| 3.3 实验仪器和试剂 | 第137-138页 |
| 3.4 实验方法 | 第138-145页 |
| 3.4.1 目的基因序列的获取和引物设计 | 第138页 |
| 3.4.2 新疆紫草总RNA提取和质量检测 | 第138-139页 |
| 3.4.3 新疆紫草cDNA的获得 | 第139页 |
| 3.4.4 PCR扩增方法 | 第139-141页 |
| 3.4.5 PCR产物的回收与纯化 | 第141页 |
| 3.4.6 PCR产物的T载体克隆 | 第141-142页 |
| 3.4.7 遗传转化 | 第142页 |
| 3.4.8 质粒提取 | 第142-143页 |
| 3.4.9 GATEWAY方法构建载体 | 第143页 |
| 3.4.10 EH105农杆菌感受态细胞的制备 | 第143-144页 |
| 3.4.11 农杆菌电激转化 | 第144-145页 |
| 3.5 实验结果 | 第145-149页 |
| 3.5.1 引物合成 | 第145页 |
| 3.5.2 RNA质量检测结果 | 第145-146页 |
| 3.5.3 T载体克隆 | 第146页 |
| 3.5.4 过表达和RNA干扰载体的构建 | 第146-149页 |
| 3.6 讨论 | 第149-150页 |
| 第4章 新疆紫草AP2/ERF转录因子的电子克隆和生物信息学分析 | 第150-160页 |
| 4.1 实验目的 | 第150页 |
| 4.2 实验材料 | 第150-151页 |
| 4.3 实验方法 | 第151-152页 |
| 4.3.1 电子克隆获得新基因序列 | 第151页 |
| 4.3.2 新疆紫草AP2/ERF基因的生物信息学分析 | 第151-152页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第152-159页 |
| 4.4.1 新疆紫草AP2/ERF基因的获得和ORF预测 | 第152页 |
| 4.4.2 新疆紫草AP2/ERF蛋白质一级结构预测 | 第152-153页 |
| 4.4.3 新疆紫草AP2/ERF蛋白质亲疏水性分析 | 第153-154页 |
| 4.4.4 新疆紫草AP2/ERF蛋白质跨膜结构预测 | 第154页 |
| 4.4.5 新疆紫草AP2/ERF蛋白的亚细胞定位 | 第154-155页 |
| 4.4.6 新疆紫草AP2/ERF蛋白信号肽预测与分析 | 第155-156页 |
| 4.4.7 新疆紫草AP2/ERF蛋白质二级结构预测 | 第156-157页 |
| 4.4.8 新疆紫草AP2/ERF蛋白质三级结构预测 | 第157页 |
| 4.4.9 新疆紫草AP2/ERF蛋白质结构域分析 | 第157页 |
| 4.4.10 新疆紫草AP2/ERF蛋白质进化分析 | 第157-158页 |
| 4.4.11 新疆紫草AP2/ERF蛋白质功能预测 | 第158-159页 |
| 4.5 讨论 | 第159-160页 |
| 第5章 基于转录组的新疆紫草ERF转录因子家族生物信息学分析 | 第160-169页 |
| 5.1 实验目的 | 第160页 |
| 5.2 实验材料 | 第160-161页 |
| 5.3 实验方法 | 第161-163页 |
| 5.3.1 新疆紫草ERF基因的分离 | 第161页 |
| 5.3.2 新疆紫草ERF基因结构和表达分析 | 第161页 |
| 5.3.3 新疆紫草ERF蛋白质结构分析 | 第161-162页 |
| 5.3.4 新疆紫草ERF蛋白质的系统发育分析 | 第162-163页 |
| 5.4 实验结果与分析 | 第163-168页 |
| 5.4.1 新疆紫草ERF家族基因分离结果 | 第163页 |
| 5.4.2 新疆紫草ERF家族基因结构和表达分析 | 第163页 |
| 5.4.3 新疆紫草ERF家族蛋白质结构分析 | 第163-166页 |
| 5.4.4 新疆紫草ERF家族蛋白质系统发育分析 | 第166-168页 |
| 5.5 讨论 | 第168-169页 |
| 结论 | 第169-172页 |
| 致谢 | 第172-173页 |
| 参考文献 | 第173-192页 |
| 附录 | 第192-203页 |
| 附录1 | 第192-195页 |
| 附录2 | 第195-196页 |
| 附录3 | 第196-198页 |
| 附录4 | 第198-199页 |
| 附录5 | 第199-201页 |
| 附录6 | 第201-202页 |
| 附录7 | 第202-203页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第203页 |
