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重组酯酶对映选择性水解二羧酸酯制备(S)-苯乙二醇的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第1章 绪论第10-20页
   ·手性化合物概述第10-11页
   ·不对称合成手性化合物第11-13页
     ·生物法不对称还原第11-12页
     ·化学法不对称氢化第12-13页
   ·外消旋体拆分法制备手性化合物第13页
     ·非生物拆分法第13页
     ·生物催化拆分法第13页
   ·生物拆分法制备光学纯手性化合物的特点与意义第13-14页
   ·生物法制备光学纯苯乙二醇的研究现状第14-18页
   ·本课题的研究意义及思路第18-20页
第2章 苯乙二醇二乙酸酯水解酶生产菌株的筛选第20-33页
   ·前言第20页
   ·材料与方法第20-27页
     ·主要试剂及仪器第20-22页
     ·筛选培养基第22页
     ·微生物筛选方法第22-23页
     ·底物及中间产物的化学合成第23-24页
       ·化学合成苯乙二醇二羧酸酯第23-24页
       ·化学合成外消旋苯乙二醇-1-乙酸酯和苯乙二醇-2-乙酸酯第24页
     ·分析方法的建立第24-26页
       ·薄板层析分析法第24-25页
       ·液相色谱分析法第25页
       ·气相色谱分析法第25-26页
     ·定量分析标准曲线的制作第26页
     ·相关底物和中间产物的核磁共振数据第26页
     ·酶活力的测定方法第26-27页
   ·结果与讨论第27-32页
     ·标准曲线的绘制第27-30页
       ·底物及各种产物的气相色谱分析标准曲线第27-29页
       ·对硝基苯酚溶解于pH 7.0 KPB缓冲液中的标准曲线第29-30页
     ·筛菌结果第30页
     ·重组枯草芽孢杆菌酯酶在大肠杆菌中表达条件的优化第30-32页
       ·最适诱导温度的优化第30-31页
       ·最佳IPTG浓度的优化第31-32页
   ·本章小结第32-33页
第3章 苯乙二醇二羧酸酯酶促水解反应条件的优化及(S)-PED的克级制备第33-45页
   ·前言第33页
   ·材料与方法第33-35页
     ·主要试剂第33-34页
     ·菌株第34页
     ·微生物培养基第34页
     ·重组大肠杆菌的培养条件第34页
     ·对映选择性酶促水解反应第34-35页
     ·酶促反应产物的分离纯化第35页
     ·产物的重结晶第35页
   ·结果和讨论第35-44页
     ·酶促水解苯乙二醇二乙酸酯的反应进程第35-37页
     ·酶促水解苯乙二醇二乙酸酯反应条件的优化第37-43页
       ·pH值对酶促反应的影响第37-38页
       ·温度对酶促反应的影响第38-39页
       ·助溶剂对酶促反应的影响第39页
       ·细胞浓度对酶促反应的影响第39-41页
       ·底物浓度对酶促反应的影响第41-42页
       ·底物酰基链长对酶促反应的影响第42-43页
     ·产物(S)-PED的克级制备第43-44页
   ·本章小结第44-45页
结论与展望第45-47页
参考文献第47-52页
附录第52-58页
攻读硕士期间论文撰写情况第58-59页
致谢第59页

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