中文摘要 | 第6-10页 |
ABSTRACT | 第10-17页 |
缩略词表 | 第18-20页 |
前言 | 第20-28页 |
第一部分 β-CD通过自噬诱导Sca-1~+CSCs向心肌细胞分化 | 第28-58页 |
前言 | 第28-29页 |
实验材料与方法 | 第29-44页 |
1. 实验材料与主要仪器设备 | 第29-32页 |
1.1 所用细胞与动物 | 第29页 |
1.2 试剂及耗材 | 第29-31页 |
1.3 主要仪器设备 | 第31-32页 |
2. 主要溶液及试剂配方 | 第32-38页 |
2.1 细胞培养所用试剂配方 | 第32-34页 |
2.2 成年小鼠心脏干细胞提取所用试剂配方 | 第34页 |
2.3 蛋白提取与浓度测定所需试剂配方 | 第34-35页 |
2.4 Western blot试剂及配方 | 第35-37页 |
2.5 细胞免疫荧光所用试剂及配方 | 第37页 |
2.6 EdU所用试剂及配方 | 第37-38页 |
3. 实验方法 | 第38-44页 |
3.1 小鼠内源Sca-1~+心脏干细胞(CSCs)的提取 | 第38页 |
3.2 细胞培养与传代 | 第38-39页 |
3.3 心脏干细胞冻存与复苏 | 第39页 |
3.4 慢病毒感染实验 | 第39-40页 |
3.5 实时定量-荧光定量PCR检测 | 第40-41页 |
3.6 细胞免疫荧光检测 | 第41页 |
3.7 Western blot检测 | 第41-42页 |
3.8 流式细胞仪检测分化率 | 第42-43页 |
3.8 细胞增殖检测 | 第43-44页 |
3.9 乳酸脱氢酶活性测定 | 第44页 |
3.10 统计学分析 | 第44页 |
结果 | 第44-47页 |
讨论 | 第47-50页 |
附图 | 第50-58页 |
第二部分 ROS/NF-κB/NR4A2通路参与H_2O_2经自噬诱导CSCs凋亡的过程 | 第58-76页 |
前言 | 第58-59页 |
实验材料与方法 | 第59-61页 |
1. 实验材料与主要仪器设备 | 第59-60页 |
1.1 所用细胞 | 第59页 |
1.2 试剂及耗材 | 第59页 |
1.3 主要仪器设备 | 第59-60页 |
2. 实验方法 | 第60-61页 |
2.1 Flow Cytometry检测细胞凋亡 | 第60页 |
2.2 Hoechst 33258染色 | 第60页 |
2.3 细胞活性氧水平的检测 | 第60-61页 |
2.4 Caspase3荧光检测 | 第61页 |
2.5 Dual-Luciferase实验 | 第61页 |
结果 | 第61-65页 |
讨论 | 第65-66页 |
附图 | 第66-76页 |
参考文献 | 第76-92页 |
致谢 | 第92-94页 |
攻读硕士期间发表的主要学术论文目录 | 第94-95页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第95页 |