摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-12页 |
前言 | 第12-16页 |
第一部分 抗IgE 单克隆抗体的制备 | 第16-51页 |
一、材料 | 第16-17页 |
(一) 细胞株、菌株、实验动物 | 第16页 |
(二) 试剂 | 第16-17页 |
(三) 主要仪器设备 | 第17页 |
二、方法 | 第17-25页 |
(一) IgE Fcε2-4 表达载体的构建 | 第17-18页 |
(二) IgE Fc 高亲和力受体FcεRIA 胞外区表达载体的构建 | 第18页 |
(三) 蛋白表达、纯化和理化性质鉴定 | 第18-20页 |
(四) 杂交瘤制备 | 第20-21页 |
(五) 抗IgE 单克隆抗体的人源化 | 第21-25页 |
三、结果 | 第25-48页 |
(一) IgE Fcε2-4 及IgE FcεRIA 的构建、表达及鉴定 | 第25-34页 |
(二) 抗IgE Fc 单克隆抗体的制备、纯化及鉴定 | 第34-36页 |
(三) 抗IgE 鼠源单抗7A5 的人源化改造 | 第36-48页 |
四、讨论 | 第48-51页 |
第二部分 抗IgE 人源化单抗Hu7A5m18 的功能研究 | 第51-70页 |
一、材料 | 第51-52页 |
(一) 重组蛋白、抗体及细胞系 | 第51页 |
(二) 试剂 | 第51-52页 |
(三) 主要仪器设备 | 第52页 |
二、方法 | 第52-57页 |
(一) Hu7A5m18 抑制IgE 与可溶性FcεRI 的结合实验 | 第52-54页 |
(二) Hu7A5m18 抑制IgE 与细胞表面FcεRI 的结合实验 | 第54-55页 |
(三) Hu7A5m18 与结合于细胞表面FcεRI 的IgE 的结合实验 | 第55-56页 |
(四) Hu7A5m18 抑制IgE 引起脱颗粒的功能学实验 | 第56-57页 |
三、结果 | 第57-68页 |
(一) Hu7A5m18 抑制IgE 与可溶性FcεRI 结合 | 第57-62页 |
(二) Hu7A5m18 抑制IgE 与细胞表面FcεRI 结合 | 第62-66页 |
(三) Hu7A5m18 不与结合于细胞表面FcεRI 的IgE 的结合 | 第66-67页 |
(四) Hu7A5m18 抑制IgE 导致的脱颗粒 | 第67-68页 |
四、讨论 | 第68-70页 |
第三部分 抗IgE 人源化单抗Hu7A5m18 的结构研究 | 第70-85页 |
一、材料 | 第70-72页 |
(一) 菌株、噬菌体随机文库及抗体 | 第70页 |
(二) 试剂配制 | 第70-72页 |
(三) 实验设备、器材 | 第72页 |
二、方法 | 第72-76页 |
(一) 噬菌体随机肽库筛选Hu7A5m18 抗原表位 | 第72-76页 |
(二) Hu7A5m18 抗原表位的鉴定 | 第76页 |
三、结果 | 第76-84页 |
(一) 噬菌体随机肽库筛选Hu7A5m18 抗原表位 | 第76-80页 |
(二) Hu7A5m18 抗原表位的鉴定 | 第80-84页 |
四、讨论 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-89页 |
综述 | 第89-109页 |
参考文献 | 第104-109页 |
在读期间发表论文和参加科研工作情况说明 | 第109-112页 |
致谢 | 第112页 |