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PFKFB3拮抗剂PFK15抑制横纹肌肉瘤细胞的自噬和增殖的作用研究

中文摘要第8-13页
ABSTRACT第13-18页
符号说明第19-21页
第一章 文献综述第21-47页
    1.1 横纹肌肉瘤的研究现状与治疗进展第21-27页
        1.1.1 横纹肌肉瘤的染色体变异第22-25页
        1.1.2 横纹肌肉瘤临床特点第25-26页
        1.1.3 横纹肌肉瘤诊断、治疗以及预后第26-27页
    1.2 糖酵解第27-33页
        1.2.1 糖酵解是肿瘤细胞最主要的能量来源第27-30页
        1.2.2 糖酵解抑制剂的分类和研究进展第30-33页
    1.3 细胞自噬第33-47页
        1.3.1 自噬调控蛋白第34-40页
        1.3.2 经典的自噬调控信号通路第40-45页
        1.3.3 自噬与肿瘤发生第45-47页
第二章 材料方法第47-54页
    2.1 实验材料第47-48页
        2.1.1 细胞来源第47页
        2.1.2 实验动物与饲养第47页
        2.1.3 仪器设备第47-48页
    2.2 实验方法第48-54页
        2.2.1 细胞培养方法第48-49页
        2.2.2 药物处理第49-50页
        2.2.3 乳酸测定第50页
        2.2.4 MTS比色法检测细胞活性第50页
        2.2.5 细胞活力和克隆形成测定第50-51页
        2.2.6 蛋白免疫印迹检测第51页
        2.2.7 siRNA干扰及GFP-LC3质粒转染第51-52页
        2.2.8 免疫荧光染色第52页
        2.2.9 电子显微镜第52页
        2.2.10 裸鼠成瘤实验第52-53页
        2.2.11 统计分析第53-54页
第三章 实验结果第54-73页
    3.1 PFK15诱导横纹肌肉瘤细胞的活性下降和形态改变第54-61页
        3.1.1 PFK15抑制RD细胞乳酸分泌第54页
        3.1.2 PFK15对RD细胞增殖活性的影响第54-57页
        3.1.3 PFK15对RD细胞克隆形成的影响第57-58页
        3.1.4 PFK15引起RD细胞的形态改变第58-59页
        3.1.5 免疫荧光分析PFK15对RD细胞核影响第59页
        3.1.6 透射电镜检测RD细胞超微结构改变第59-60页
        3.1.7 PFK15诱导的核损伤并调节RAD51和H2AX信号通路第60-61页
    3.2 PFK15对横纹肌肉瘤细胞自噬的影响第61-65页
        3.2.1 电镜检测PFK15对RD细胞自噬的影响第61页
        3.2.2 GFPLC3质粒转染观察PFK15对RD细胞自噬的影响第61-62页
        3.2.3 免疫荧光分析PFK15对RD细胞LC3表达的影响第62-63页
        3.2.4 PFK15浓度梯度对RD细胞自噬影响的分析第63-64页
        3.2.5 Western blot法分析PFK15对RD细胞自噬的影响第64-65页
    3.3 PFK15诱发RD细胞凋亡第65-67页
        3.3.1 PFK15导致RD细胞中PARP-1的切割现象第65-66页
        3.3.2 PFK15联合CQ对RD细胞PARP-1切割的影响分析第66页
        3.3.3 自噬损伤模型中PFK15对RD细胞PARP-1切割的影响分析第66-67页
    3.4 PFK15通过AMPK信号通路调节RD细胞自噬第67-69页
        3.4.1 PFK15调控RD细胞AMPK蛋白表达第67-68页
        3.4.2 PFK15调控RD细胞mTOR的活性第68-69页
    3.5 AMPK激动剂AICAR缓解了PFK15对RD细胞的作用第69-71页
        3.5.1 AICAR缓解了PFK15引起的RD细胞克隆形成的影响第69页
        3.5.2 AICAR对PFK15引起的RD细胞活性的影响第69-70页
        3.5.3 AICAR对PFK15引起的RD细胞自噬抑制的影响第70-71页
        3.5.4 AICAR对PFK15调控的AMPK通路的影响第71页
    3.6 PFK15在裸鼠成瘤模型中的作用第71-73页
第四章 讨论第73-80页
第五章 结论及展望第80-83页
    5.1 PFK15具有显著的抑瘤效果第80-81页
    5.2 PFK15通过AMPK通路抑制细胞生长,自噬和代谢第81-83页
参考文献第83-109页
学位论文评阅及答辩情况表第109-110页
致谢第110-111页
攻读博士期间发表论文第111-112页
英文文章1第112-136页
英文文章2第136-164页

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