中文摘要 | 第8-13页 |
ABSTRACT | 第13-18页 |
符号说明 | 第19-21页 |
第一章 文献综述 | 第21-47页 |
1.1 横纹肌肉瘤的研究现状与治疗进展 | 第21-27页 |
1.1.1 横纹肌肉瘤的染色体变异 | 第22-25页 |
1.1.2 横纹肌肉瘤临床特点 | 第25-26页 |
1.1.3 横纹肌肉瘤诊断、治疗以及预后 | 第26-27页 |
1.2 糖酵解 | 第27-33页 |
1.2.1 糖酵解是肿瘤细胞最主要的能量来源 | 第27-30页 |
1.2.2 糖酵解抑制剂的分类和研究进展 | 第30-33页 |
1.3 细胞自噬 | 第33-47页 |
1.3.1 自噬调控蛋白 | 第34-40页 |
1.3.2 经典的自噬调控信号通路 | 第40-45页 |
1.3.3 自噬与肿瘤发生 | 第45-47页 |
第二章 材料方法 | 第47-54页 |
2.1 实验材料 | 第47-48页 |
2.1.1 细胞来源 | 第47页 |
2.1.2 实验动物与饲养 | 第47页 |
2.1.3 仪器设备 | 第47-48页 |
2.2 实验方法 | 第48-54页 |
2.2.1 细胞培养方法 | 第48-49页 |
2.2.2 药物处理 | 第49-50页 |
2.2.3 乳酸测定 | 第50页 |
2.2.4 MTS比色法检测细胞活性 | 第50页 |
2.2.5 细胞活力和克隆形成测定 | 第50-51页 |
2.2.6 蛋白免疫印迹检测 | 第51页 |
2.2.7 siRNA干扰及GFP-LC3质粒转染 | 第51-52页 |
2.2.8 免疫荧光染色 | 第52页 |
2.2.9 电子显微镜 | 第52页 |
2.2.10 裸鼠成瘤实验 | 第52-53页 |
2.2.11 统计分析 | 第53-54页 |
第三章 实验结果 | 第54-73页 |
3.1 PFK15诱导横纹肌肉瘤细胞的活性下降和形态改变 | 第54-61页 |
3.1.1 PFK15抑制RD细胞乳酸分泌 | 第54页 |
3.1.2 PFK15对RD细胞增殖活性的影响 | 第54-57页 |
3.1.3 PFK15对RD细胞克隆形成的影响 | 第57-58页 |
3.1.4 PFK15引起RD细胞的形态改变 | 第58-59页 |
3.1.5 免疫荧光分析PFK15对RD细胞核影响 | 第59页 |
3.1.6 透射电镜检测RD细胞超微结构改变 | 第59-60页 |
3.1.7 PFK15诱导的核损伤并调节RAD51和H2AX信号通路 | 第60-61页 |
3.2 PFK15对横纹肌肉瘤细胞自噬的影响 | 第61-65页 |
3.2.1 电镜检测PFK15对RD细胞自噬的影响 | 第61页 |
3.2.2 GFPLC3质粒转染观察PFK15对RD细胞自噬的影响 | 第61-62页 |
3.2.3 免疫荧光分析PFK15对RD细胞LC3表达的影响 | 第62-63页 |
3.2.4 PFK15浓度梯度对RD细胞自噬影响的分析 | 第63-64页 |
3.2.5 Western blot法分析PFK15对RD细胞自噬的影响 | 第64-65页 |
3.3 PFK15诱发RD细胞凋亡 | 第65-67页 |
3.3.1 PFK15导致RD细胞中PARP-1的切割现象 | 第65-66页 |
3.3.2 PFK15联合CQ对RD细胞PARP-1切割的影响分析 | 第66页 |
3.3.3 自噬损伤模型中PFK15对RD细胞PARP-1切割的影响分析 | 第66-67页 |
3.4 PFK15通过AMPK信号通路调节RD细胞自噬 | 第67-69页 |
3.4.1 PFK15调控RD细胞AMPK蛋白表达 | 第67-68页 |
3.4.2 PFK15调控RD细胞mTOR的活性 | 第68-69页 |
3.5 AMPK激动剂AICAR缓解了PFK15对RD细胞的作用 | 第69-71页 |
3.5.1 AICAR缓解了PFK15引起的RD细胞克隆形成的影响 | 第69页 |
3.5.2 AICAR对PFK15引起的RD细胞活性的影响 | 第69-70页 |
3.5.3 AICAR对PFK15引起的RD细胞自噬抑制的影响 | 第70-71页 |
3.5.4 AICAR对PFK15调控的AMPK通路的影响 | 第71页 |
3.6 PFK15在裸鼠成瘤模型中的作用 | 第71-73页 |
第四章 讨论 | 第73-80页 |
第五章 结论及展望 | 第80-83页 |
5.1 PFK15具有显著的抑瘤效果 | 第80-81页 |
5.2 PFK15通过AMPK通路抑制细胞生长,自噬和代谢 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-109页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第109-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
攻读博士期间发表论文 | 第111-112页 |
英文文章1 | 第112-136页 |
英文文章2 | 第136-164页 |