| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 共生固氮 | 第11页 |
| 1.2 豆科植物与根瘤菌共生固氮 | 第11-14页 |
| 1.2.1 共生过程的起始 | 第11-12页 |
| 1.2.2 植物对根瘤菌的响应 | 第12-14页 |
| 1.2.3 根瘤的形成和结构 | 第14页 |
| 1.3 细菌的分泌系统 | 第14-15页 |
| 1.4 根瘤菌III型分泌系统 | 第15-16页 |
| 1.5 根瘤菌III型分泌系统效应蛋白 | 第16-19页 |
| 1.5.1 效应蛋白对共生过程的影响 | 第16-17页 |
| 1.5.2 效应蛋白的功能 | 第17-19页 |
| 1.6 研究内容和技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 假定效应蛋白6739的预测和表达分析 | 第21-26页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料、试剂和仪器 | 第21页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第21页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.3.1 效应蛋白预测 | 第21-22页 |
| 2.3.2 类黄酮诱导6739基因表达 | 第22-23页 |
| 2.4 结果与分析 | 第23-25页 |
| 2.4.1 效应蛋白预测 | 第23-24页 |
| 2.4.2 类黄酮诱导基因表达分析 | 第24-25页 |
| 2.5 讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 6739突变菌株的构建 | 第26-34页 |
| 3.1 引言 | 第26页 |
| 3.2 实验材料、试剂和仪器 | 第26-27页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第27页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第27页 |
| 3.3 实验方法 | 第27-31页 |
| 3.3.1 根瘤菌基因组DNA提取 | 第27页 |
| 3.3.2 基因敲除载体的构建 | 第27-29页 |
| 3.3.3 电转化及缺失突变体筛选 | 第29-30页 |
| 3.3.4 互补菌株的筛选 | 第30-31页 |
| 3.4 结果与分析 | 第31-32页 |
| 3.4.1 基因敲除载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.4.2 突变菌株的筛选 | 第32页 |
| 3.4.3 互补菌株C6739筛选 | 第32页 |
| 3.5 讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 6739突变菌株与刺槐共生 | 第34-43页 |
| 4.1 引言 | 第34页 |
| 4.2 实验材料、试剂和仪器 | 第34-35页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第34页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第34-35页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第35页 |
| 4.3 实验方法 | 第35-37页 |
| 4.3.1 植物实验 | 第35-36页 |
| 4.3.2 根瘤中豆血红蛋白基因定量 | 第36-37页 |
| 4.3.3 石蜡切片的制作和观察 | 第37页 |
| 4.3.4 透射电子显微镜切片观察 | 第37页 |
| 4.4 结果与分析 | 第37-41页 |
| 4.4.1 植物实验 | 第37-39页 |
| 4.4.2 豆血红蛋白基因定量 | 第39-40页 |
| 4.4.3 石蜡切片观察 | 第40-41页 |
| 4.4.4 透射电子显微镜切片观察 | 第41页 |
| 4.5 讨论 | 第41-43页 |
| 第五章 烟草叶片瞬时表达6739基因 | 第43-48页 |
| 5.1 引言 | 第43页 |
| 5.2 实验材料、试剂和仪器 | 第43-44页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第43页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第43页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第43-44页 |
| 5.3 实验方法 | 第44-46页 |
| 5.3.1 烟草瞬时表达载体的构建 | 第44-45页 |
| 5.3.2 重组载体转化农杆菌 | 第45-46页 |
| 5.3.3 农杆菌注射烟草瞬时表达 | 第46页 |
| 5.4 结果与分析 | 第46-47页 |
| 5.4.1 双元载体的构建 | 第46页 |
| 5.4.2 目的基因瞬时表达 | 第46-47页 |
| 5.5 讨论 | 第47-48页 |
| 第六章 蛋白纯化和分泌实验 | 第48-60页 |
| 6.1 引言 | 第48页 |
| 6.2 实验材料、试剂和仪器 | 第48-49页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第48页 |
| 6.2.2 实验试剂 | 第48-49页 |
| 6.2.3 实验仪器 | 第49页 |
| 6.3 实验方法 | 第49-55页 |
| 6.3.1 表达载体的构建和转化 | 第49-50页 |
| 6.3.2 融合蛋白诱导表达及可溶性分析 | 第50-52页 |
| 6.3.3 融合蛋白的纯化 | 第52-55页 |
| 6.3.4 M.amorphaeCCNWGS0123蛋白分泌实验 | 第55页 |
| 6.4 结果与分析 | 第55-58页 |
| 6.4.1 表达载体的构建和转化 | 第55-56页 |
| 6.4.2 融合蛋白诱导表达及可溶性分析 | 第56页 |
| 6.4.3 融合蛋白纯化 | 第56-58页 |
| 6.4.4 M.amorphaeCCNWGS0123分泌实验 | 第58页 |
| 6.5 讨论 | 第58-60页 |
| 第七章 结论与展望 | 第60-63页 |
| 7.1 本研究结论 | 第60-61页 |
| 7.2 展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录 | 第70-83页 |
| 缩略词 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 作者简介 | 第85页 |