| 符号说明 | 第6-12页 |
| 中文摘要 | 第12-16页 |
| ABSTRACT | 第16-19页 |
| 1 前言 | 第20-35页 |
| 1.1 动物磷吸收的机制 | 第20-22页 |
| 1.1.1 肠道磷吸收的形式 | 第20-21页 |
| 1.1.2 磷转运体 | 第21-22页 |
| 1.2 影响磷在骨中沉积的因子 | 第22-24页 |
| 1.2.1 Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ) | 第22页 |
| 1.2.2 Runt相关转录因子(Runt-relatedtranscriptionfactor2,RUNX2) | 第22-23页 |
| 1.2.3 骨钙素(osteocalcin) | 第23页 |
| 1.2.4 细胞外基质磷酸化糖蛋白(Matrixextracellularphosphoglycoprotein,MEPE) | 第23页 |
| 1.2.5 牙本质基质蛋白1(dentinmatrixprotein,DMP1) | 第23-24页 |
| 1.2.6 组织蛋白酶K(cathepsinK) | 第24页 |
| 1.3 FGF23与磷代谢的研究进展 | 第24-35页 |
| 1.3.1 FGF23存在形式及其受体 | 第24-25页 |
| 1.3.2 FGF23对磷代谢的调控机制 | 第25-28页 |
| 1.3.3 调控FGF23表达的因素 | 第28-31页 |
| 1.3.4 与FGF23异常相关的骨骼畸变 | 第31-33页 |
| 1.3.5 FGF23对骨的直接作用 | 第33-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-50页 |
| 2.1 试验材料 | 第35页 |
| 2.2 试验试剂和主要仪器 | 第35-37页 |
| 2.3 试验设计 | 第37-43页 |
| 2.3.1 家禽FGF23生物信息学分析及时空表达 | 第37-38页 |
| 2.3.2 FGF23过表达对磷代谢的调控 | 第38-39页 |
| 2.3.3 磷转运体在肾脏及肠道的表达规律 | 第39页 |
| 2.3.4 LPS诱导的免疫应激对1周龄蛋雏鸡FGF23及磷转运体基因表达的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.5 LPS诱导免疫应激对骨髓间充质干细胞(bonemarrowstemcell,BMSC)诱导分化的成骨细胞FGF23基因表达的影响 | 第40页 |
| 2.3.6 日粮磷水平对蛋鸡生产性能、蛋品质及FGF23及磷转运体表达的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.7 日粮维生素D添加水平对蛋鸡生产性能、蛋品质及FGF23及磷转运体表达的影响 | 第41-43页 |
| 2.4 试验方法 | 第43-50页 |
| 2.4.1 BMSC成骨诱导分化 | 第43页 |
| 2.4.2 HE染色 | 第43-44页 |
| 2.4.3 组织中相关基因的mRNA的检测 | 第44-47页 |
| 2.4.4 蛋白提取和WesternBlotting | 第47-48页 |
| 2.4.5 蛋品质的测定 | 第48页 |
| 2.4.6 血液相关指标的测定 | 第48-49页 |
| 2.4.7 数据处理 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-84页 |
| 3.1 海兰褐蛋鸡FGF23生物信息分析 | 第50-60页 |
| 3.1.1 FGF23CDS区测序 | 第50-53页 |
| 3.1.2 海兰褐蛋鸡FGF23蛋白理化性质、信号肽分析、细胞定位、疏水性分析 | 第53-54页 |
| 3.1.3 家禽FGF23序列比对与其他物种FGF23序列比对及进化树分析 | 第54-55页 |
| 3.1.4 FGF23蛋白二级结构及三级结构的预测 | 第55-57页 |
| 3.1.5 FGF23mRNA时空表达规律 | 第57-60页 |
| 3.2 FGF23过表达对磷转运体表达的调控 | 第60-64页 |
| 3.2.1 pcDNA3.1(+)FGF23M重组质粒的设计 | 第60页 |
| 3.2.2 重组质粒的酶切鉴定与测序 | 第60-62页 |
| 3.2.3 重组质粒转染鸡胚的成纤维细胞 | 第62页 |
| 3.2.4 重组质粒在小鼠体内的过表达 | 第62-64页 |
| 3.3 磷转运体在肾脏及肠道中的表达规律 | 第64页 |
| 3.4 LPS诱导的免疫应激对蛋雏鸡FGF23及磷转运体基因表达的影响 | 第64-70页 |
| 3.4.1 LPS诱导的免疫应激对蛋雏鸡日增重及采食量的影响 | 第64-65页 |
| 3.4.2 LPS诱导的免疫应激对蛋鸡血钙血磷的影响 | 第65-66页 |
| 3.4.3 LPS第二次注射后5d骨组织炎症细胞浸润的影响 | 第66页 |
| 3.4.4 LPS诱导的免疫应激对骨组织炎症因子基因表达的影响 | 第66-67页 |
| 3.4.5 LPS诱导的免疫应激对骨组织调控FGF23的相关基因表达的影响 | 第67-68页 |
| 3.4.6 LPS诱导的免疫应激对骨转换相关基因及磷转运体表达的影响 | 第68-69页 |
| 3.4.7 LPS诱导的免疫应激对FGF23表达的影响 | 第69-70页 |
| 3.5 LPS诱导的免疫应激对BMSC成骨诱导分化FGF23基因表达调控 | 第70-71页 |
| 3.5.1 BMSC成骨诱导分化鉴定 | 第70-71页 |
| 3.5.2 LPS对成骨诱导的BMSCFGF23调控相关基因的影响 | 第71页 |
| 3.6 日粮磷水平对蛋鸡生产性能、蛋品质及FGF23及磷转运体基因的影响 | 第71-78页 |
| 3.6.1 日粮磷水平对蛋鸡生产性能的影响 | 第71-72页 |
| 3.6.2 日粮磷水平对蛋品质的影响 | 第72-73页 |
| 3.6.3 日粮磷水平对血钙、血磷及碱性磷酸酶的影响 | 第73-74页 |
| 3.6.4 日粮磷水平对骨组织调控FGF23相关基因mRNA表达的影响 | 第74页 |
| 3.6.5 日粮磷水平对FGF23mRNA表达的影响 | 第74-75页 |
| 3.6.6 日粮磷水平对骨转换相关基因表达的影响 | 第75-76页 |
| 3.6.7 日粮磷水平对蛋鸡肾脏磷代谢相关基因表达的影响 | 第76页 |
| 3.6.8 日粮磷水平对十二指肠及骨组织磷转体基因表达的影响 | 第76-77页 |
| 3.6.9 日粮磷水平对FGF23蛋白的影响 | 第77页 |
| 3.6.10 日粮磷水平对VDR蛋白的影响 | 第77-78页 |
| 3.7 日粮维生素D添加水平对蛋鸡生产性能、蛋品质及FGF23及磷转运体基因的调控 | 第78-84页 |
| 3.7.1 日粮维生素D添加水平对蛋鸡生产性能及蛋品质的影响 | 第78-80页 |
| 3.7.2 日粮维生素D添加水平对血钙血磷及碱性磷酸酶的影响 | 第80页 |
| 3.7.3 日粮维生素D添加水平对肾脏磷代谢相关基因表达的影响 | 第80-81页 |
| 3.7.4 日粮维生素D添加水平对骨组织、肝脏FGF23基因表达的影响 | 第81-82页 |
| 3.7.5 日粮维生素D添加水平骨转换相关基因表达的影响 | 第82-83页 |
| 3.7.6 日粮维生素D添加水平对肠道及骨组织磷转运体基因表达的影响 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-94页 |
| 4.1 蛋鸡FGF23mRNA组织分布 | 第84页 |
| 4.2 FGF23过表达对磷转运体基因表达的影响 | 第84-85页 |
| 4.3 蛋鸡NPT2a、NPT2b、SLC20A1、SLC20A2mRNA的组织分布 | 第85-86页 |
| 4.4 LPS对FGF23及磷转运体基因的影响 | 第86-87页 |
| 4.4.1 LPS对FGF23基因表达调控 | 第86页 |
| 4.4.2 LPS对肾脏及肠道磷转运体的影响 | 第86页 |
| 4.4.3 LPS对骨代谢的影响 | 第86-87页 |
| 4.5 日粮磷水平对FGF23及磷转运体基因表达的影响 | 第87-90页 |
| 4.5.1 日粮水平对FGF23表达的调控 | 第87-88页 |
| 4.5.2 日粮磷水平对生产性能的影响 | 第88页 |
| 4.5.3 日粮磷水平对骨转换的调控 | 第88-89页 |
| 4.5.4 日粮磷水平对肾脏及肠道磷转运体的影响 | 第89-90页 |
| 4.6 维生素D水平对FGF23及磷转运体基因表达的影响 | 第90-94页 |
| 4.6.1 日粮维生素D水平对生产性能的影响 | 第90-91页 |
| 4.6.2 日粮维生素D水平FGF23基因表达的调控 | 第91-92页 |
| 4.6.3 日粮维生素D水平对肾脏、肠道、骨组织磷转运体的影响 | 第92-93页 |
| 4.6.4 日粮维生素D水平对骨转换相关基因表达的影响 | 第93-94页 |
| 5 总体结论 | 第94-95页 |
| 6 研究的创新点及研究展望 | 第95-96页 |
| 6.1 研究的创新点 | 第95页 |
| 6.2 研究展望 | 第95-96页 |
| 7 参考文献 | 第96-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
