摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
前言 | 第9-12页 |
第一章 miR-150在肌肉组织和细胞中的表达及功能的探索 | 第12-30页 |
1. 材料和方法 | 第12-19页 |
1.0 实验所需材料 | 第12页 |
1.1 生物信息学预测 | 第12-13页 |
1.2 质粒的构建和鲁米诺发光检测 | 第13页 |
1.3 组织RNA的提取步骤 | 第13-15页 |
1.4 组织蛋白质的提取步骤 | 第15页 |
1.5 细胞培养与细胞转染 | 第15-16页 |
1.6 CCK-8细胞增殖分析 | 第16页 |
1.7 BrdU分析 | 第16-17页 |
1.8 定量逆转录-聚合酶链反应 | 第17-18页 |
1.9 蛋白质印迹法(免疫印迹试验)(Western Blot) | 第18-19页 |
统计分析 | 第19页 |
结果 | 第19-27页 |
1. miR-150在不同种属中具有高度的保守性 | 第19-21页 |
2. miR-150能靶向作用于CDK3 | 第21-22页 |
3. miR-150在肌萎缩小鼠中有助于控制mdx小鼠肌肉组织中的CDK3 | 第22-24页 |
4. miR-150抑制C2C12成肌细胞增殖 | 第24-26页 |
5. miR-150抑制C2C12细胞中的CDK3的表达 | 第26-27页 |
讨论 | 第27-30页 |
第二章 miR-150在肺癌组织和细胞中的表达情况和功能探索 | 第30-45页 |
1. 材料与方法 | 第30-38页 |
1.1 肺癌与癌旁组织收集 | 第30页 |
1.2 肺癌细胞系 | 第30-31页 |
1.3 主要试剂 | 第31页 |
1.4 肺癌细胞的复苏 | 第31-32页 |
1.5 肺癌细胞系传代培养 | 第32-34页 |
1.6 肺癌细胞系冻存 | 第34-35页 |
1.7 肺癌细胞的转染操作 | 第35-36页 |
1.8 细胞RNA提取 | 第36-37页 |
1.9 集落形成测定 | 第37页 |
统计分析 | 第37-38页 |
结果 | 第38-42页 |
1. miR-150和CDK3在原发性人肺癌中的表达不同 | 第38-40页 |
2. miR-150在肺癌细胞系中通过靶向抑制CDK3 | 第40-41页 |
3. miR-150抑制肺癌细胞的增殖和集落形成 | 第41-42页 |
讨论 | 第42-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
综述 | 第50-54页 |
参考文献 | 第52-54页 |