摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
前言 | 第11-13页 |
材料及方法 | 第13-37页 |
1 实验材料 | 第13-25页 |
1.1 实验动物和细胞 | 第13页 |
1.2 实验主要试剂 | 第13-17页 |
1.3 实验主要仪器与耗材 | 第17-19页 |
1.4 主要液体配制方法 | 第19-25页 |
2 实验方法 | 第25-37页 |
2.1 VSMCs原代细胞的分离和培养 | 第25-27页 |
2.2 肠系膜动脉组织的培养 | 第27页 |
2.3 反向透化介导肠系膜动脉组织蛋白的沉默 | 第27页 |
2.4 肠系膜动脉血管张力的测定 | 第27-29页 |
2.5 逆转录聚合酶链式反应(reverse transcriptional-polymerase chainreaction,RT-PCR) | 第29-31页 |
2.6 克隆PCR | 第31页 |
2.7 Western blotting | 第31-34页 |
2.8 DNA质粒的构建 | 第34页 |
2.9 免疫荧光染色 | 第34-35页 |
2.10 细胞培养和转染 | 第35页 |
2.11 膜蛋白的提取 | 第35-36页 |
2.12 全细胞膜片钳记录 | 第36-37页 |
2.13 统计方法 | 第37页 |
实验结果 | 第37-53页 |
一、高血压动脉中Rbfox2调控Ca_V1.2钙通道exon 9*和exon 33表达 | 第37-43页 |
1 Rbfox2表达于血管平滑肌中 | 第37-38页 |
2 高血压大鼠肠系膜动脉中Rbfox2表达水平升高同时Ca_V1.2的exon 9*和exon 33表达异常 | 第38-40页 |
3 Rbfox2动态调控血管平滑肌细胞Ca_V1.2钙通道可变剪接 | 第40-42页 |
小结一 | 第42-43页 |
二、高血压动脉中DN Rbfox2抑制WT Rbfox2表达及功能 | 第43-46页 |
1 高血压动脉中WT Rbfox2表达降低,但DN Rbfox2表达明显增加 | 第43-44页 |
2 血管紧张素Ⅱ、内皮素1或苯丙肾上腺素对血管平滑肌胞中Rbfox2异常表达 | 第44-45页 |
3 在血管平滑肌细胞中,DN Rbfox2抑制WT Rbfox2对Ca_V1.2钙通道可变剪接的调控功能 | 第45-46页 |
小结二 | 第46页 |
三、Rbfox2影响血管Ca_V1.2钙通道功能与血管肌源性张力 | 第46-53页 |
1 高血压动脉中的异常剪接改变Ca_V1.2钙通道的电生理特征 | 第46-50页 |
2 Rbfox2敲降导致血管中Ca_V1.2钙通道窗电流发生超极化 | 第50-51页 |
3 Rbfox2调控肠系膜动脉管腔内压力诱导的肌源性张力 | 第51-53页 |
小结三 | 第53页 |
讨论 | 第53-55页 |
结论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
综述 | 第62-79页 |
参考文献 | 第70-79页 |
缩略词中英文对照 | 第79-81页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |