| 中文摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第1章 引言 | 第11-16页 |
| 1.1 KGF 的潜在医学价值 | 第11-12页 |
| 1.1.1 KGF 与器官发育 | 第11页 |
| 1.1.2 对预处理放化疗损伤的防护 | 第11-12页 |
| 1.1.3 对肝细胞的保护、增殖和分化 | 第12页 |
| 1.2 KGF 的作用方式 | 第12页 |
| 1.3 国内外研究现状及本课题的研究目的 | 第12-13页 |
| 1.3.1 国内外研究现状 | 第12页 |
| 1.3.2 本课题研究目的 | 第12-13页 |
| 1.4 课题的研究目标、内容、关键问题、实验方法、技术路线 | 第13-15页 |
| 1.4.1 研究目标 | 第13-14页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第14页 |
| 1.4.3 关键问题 | 第14页 |
| 1.4.4 技术路线 | 第14-15页 |
| 1.5 突变体序列结构特点 | 第15-16页 |
| 第2章 人角质细胞生长因子突变体上游构建 | 第16-32页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第16-18页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第16-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-25页 |
| 2.2.1 K23 目的基因的获得 | 第18-19页 |
| 2.2.2 K25、K102 和K106 目的基因的获得 | 第19页 |
| 2.2.3 K23、K25、K102 和K106 蛋白序列 | 第19-20页 |
| 2.2.4 重组质粒 pET-3C-KGF 突变体的构建及鉴定 | 第20-23页 |
| 2.2.5 重组人角质细胞生长因子二硫键突变体在大肠杆菌中的表达 | 第23-24页 |
| 2.2.6 SDS-PAGE 凝胶电泳检测 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第25-31页 |
| 2.4 本章小结 | 第31-32页 |
| 第3章 重组人角质细胞因子发酵、纯化工艺研究 | 第32-49页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第32-33页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第32页 |
| 3.1.2 主要设备及仪器 | 第32页 |
| 3.1.3 培养基 | 第32页 |
| 3.1.4 补料 | 第32-33页 |
| 3.2 方法 | 第33-41页 |
| 3.2.1 菌密度测定 | 第33页 |
| 3.2.2 糖的检测 | 第33-34页 |
| 3.2.3 细菌的培养方法 | 第34页 |
| 3.2.4 实验研究结果 | 第34-38页 |
| 3.2.5 讨论 | 第38页 |
| 3.2.6 结论 | 第38页 |
| 3.2.7 确定的发酵工艺 | 第38-39页 |
| 3.2.8 发酵验证试验结果 | 第39-40页 |
| 3.2.9 本章小结 | 第40-41页 |
| 3.3 重组人角质细胞生长因子纯化工艺研究 | 第41-49页 |
| 3.3.1 破菌方法的研究 | 第41-42页 |
| 3.3.2 目的蛋白粗纯化的研究 | 第42-43页 |
| 3.3.3 目的蛋白精纯化的研究 | 第43页 |
| 3.3.4 工艺过程质量控制方法 | 第43-44页 |
| 3.3.5 SDS-PAGE | 第44页 |
| 3.3.6 Lowry 法测蛋白浓度 | 第44页 |
| 3.3.7 高效液相色谱法测纯度 | 第44-45页 |
| 3.3.8 结果与讨论 | 第45-48页 |
| 3.3.9 本章小结 | 第48-49页 |
| 第4章 重组人角质细胞生长因子二硫键配对形式的研究 | 第49-57页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第49页 |
| 4.2 实验方法 | 第49-51页 |
| 4.2.1 质量肽图酶切条件的研究 | 第49-50页 |
| 4.2.2 LC-MS 条件研究 | 第50-51页 |
| 4.2.3 酶切条件研究结果及讨论 | 第51页 |
| 4.2.4 LC-MS 条件研究结果 | 第51页 |
| 4.3 质量肽图结果及讨论 | 第51-56页 |
| 4.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第5章 重组人角质细胞生长因子二硫键突变体体内外生物活性的研究 | 第57-64页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第57页 |
| 5.2 体外实验方法 | 第57-59页 |
| 5.2.1 NBL-7 细胞测活 | 第57页 |
| 5.2.2 NIH3T3 细胞测活 | 第57-58页 |
| 5.2.3 实验结果 | 第58-59页 |
| 5.3 体内活性检测 | 第59-62页 |
| 5.3.1 小鼠 CCl4 急性肝损伤模型体内测活方法 | 第59-60页 |
| 5.3.2 小鼠 5-Fu 尿嘧啶肠粘膜损伤模型体内测活方法 | 第60-61页 |
| 5.3.3 体内实验结果 | 第61-62页 |
| 5.4 本章小结 | 第62-64页 |
| 第6章 总结及讨论 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及取得的研究成果 | 第70页 |
