| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 文献回顾 | 第16-36页 |
| 实验一 重组人抗 HER2 scFv-9R 融合蛋白的基因构建 | 第36-47页 |
| 1 材料 | 第36-39页 |
| 1.1 菌种与质粒 | 第36-37页 |
| 1.2 主要仪器 | 第37-38页 |
| 1.3 主要试剂 | 第38页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第38-39页 |
| 2 方法 | 第39-44页 |
| 2.1 scFv-9R 基因扩增 PCR 引物设计与合成 | 第39页 |
| 2.2 scFv-9R 基因的扩增及纯化 | 第39-40页 |
| 2.3 PCR 产物的电泳回收 | 第40页 |
| 2.4 基因重组表达质粒的构建 | 第40-44页 |
| 3 结果 | 第44-45页 |
| 3.1 重组质粒的结构 | 第44页 |
| 3.2 目的基因的扩增及鉴定 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 实验二 抗 HER2 scFv-9R 融合蛋白的表达及鉴定 | 第47-59页 |
| 1 材料 | 第47-49页 |
| 1.1 菌种与质粒 | 第47页 |
| 1.2 主要仪器 | 第47页 |
| 1.3 主要试剂 | 第47-48页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第48-49页 |
| 2 方法 | 第49-55页 |
| 2.1 融合蛋白的诱导表达与可溶性分析 | 第49-51页 |
| 2.2 表达产物的 Western blot 鉴定 | 第51-53页 |
| 2.3 融合蛋白的诱导表达条件的优化 | 第53页 |
| 2.4 表达产物的纯化 | 第53-54页 |
| 2.5 纯化蛋白的定量和保存 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-58页 |
| 3.1 重组融合蛋白表达的可溶性分析及 Western blot 鉴定 | 第55-56页 |
| 3.2 重组融合蛋白诱导表达的摸索 | 第56-57页 |
| 3.3 表达产物的纯化 | 第57页 |
| 3.4 纯化蛋白的定量 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 实验三 抗 HER2 scFv-9R 融合蛋白的活性研究 | 第59-67页 |
| 1 材料 | 第59-60页 |
| 1.1 细胞系 | 第59页 |
| 1.2 主要仪器 | 第59页 |
| 1.3 主要试剂 | 第59-60页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第60页 |
| 2 方法 | 第60-62页 |
| 2.1 细胞培养 | 第60页 |
| 2.2 ELISA 检测表达产物抗原结合活性 | 第60-61页 |
| 2.3 间接免疫荧光检测 scFv-9R 抗原结合及细胞内化能力 | 第61页 |
| 2.4 表达产物的 siRNA 结合活性检测 | 第61-62页 |
| 2.5 蛋白结合 siRNA 量分析 | 第62页 |
| 3 结果 | 第62-66页 |
| 3.1 表达产物的抗原结合活性分析 | 第62-63页 |
| 3.2 融合蛋白抗原结合活性间接免疫荧光验证 | 第63-64页 |
| 3.3 scFv-9R 融合蛋白的 siRNA 结合活性检测 | 第64页 |
| 3.4 融合蛋白 siRNA 结合量分析 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-67页 |
| 小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 个人简历和研究成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
