| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第1章 引言 | 第13-17页 |
| 第2章 材料与方法 | 第17-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-33页 |
| 2.2.1 器材的灭菌、去RNA酶处理 | 第19页 |
| 2.2.2 相关液体的配制 | 第19-21页 |
| 2.2.3 乳鼠心肌细胞的培养及鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.4 PGC-FU-microRNA-21-GFP慢病毒表达载体的构建 | 第22页 |
| 2.2.5 实验分组 | 第22-23页 |
| 2.2.6 pGC- FU-microRNA-21-GFP慢病毒载体转染心肌细胞 | 第23页 |
| 2.2.7 利用 TNF-α建立心肌细胞凋亡模型 | 第23-24页 |
| 2.2.8 心肌细胞总RNA提取及检测总RNA的浓度及纯度 | 第24页 |
| 2.2.9 qRT-PCR测定各组心肌细胞中microRNA-21及PTEN mRNA的表达 | 第24-27页 |
| 2.2.10 心肌细胞总蛋白的提取及测定蛋白浓度 | 第27-28页 |
| 2.2.11 Westernblot法检测心肌细胞的PTEN/AKT/FOXO3a通路蛋白的表达 | 第28-31页 |
| 2.2.12 心肌细胞增值及凋亡的检测 | 第31-32页 |
| 2.2.13 统计学处理 | 第32-33页 |
| 第3章 结果 | 第33-41页 |
| 3.1 乳鼠心肌细胞的生长特点及免疫鉴定结果 | 第33-34页 |
| 3.2 构建 PGC-FU-microRNA-21-GFP慢病毒表达载体并鉴定 | 第34-35页 |
| 3.3 PGC-FU- microRNA-21-GFP慢病毒表达载体转染入心肌细胞的结果 | 第35页 |
| 3.4 qRT-PCR法检测各组心肌细胞中 microRNA-21和PTEN mRNA的表达及Westernblot法检测PTEN/AKT/FOXO3a通路蛋白的表达 | 第35-39页 |
| 3.4.1 qRT-PCR法检测各组心肌细胞中microRNA-21和PTEN mRNA的表达 | 第35-37页 |
| 3.4.2 Westernblot法检测PTEN/AKT/FOXO3a通路蛋白的表达 | 第37-39页 |
| 3.5 Hoechst33342/PI及Annexin V-FITC法检测各组心肌细胞凋亡率 | 第39-41页 |
| 3.5.1 Annexin V-FITC法检测各组心肌细胞凋亡率 | 第39页 |
| 3.5.2 Hoechst33342/PI法检测各组心肌细胞凋亡率 | 第39-41页 |
| 第4章 讨论 | 第41-48页 |
| 第5章 结论与展望 | 第48-49页 |
| 5.1 结论 | 第48页 |
| 5.2 展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第54-55页 |
| 综述 | 第55-62页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
