| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-33页 |
| 1.1 课题的提出 | 第12-13页 |
| 1.2 马铃薯块茎低温糖化机制 | 第13-17页 |
| 1.3 SNF1/AMPK/SnRK1蛋白激酶超家族研究进展 | 第17-32页 |
| 1.3.1 SNF1/AMPK/SnRK1的分类和特点 | 第17-19页 |
| 1.3.2 SNF1/AMPK/SnRK1的结构 | 第19-24页 |
| 1.3.3 SNF1/AMPK/SnRK1的调节方式 | 第24-28页 |
| 1.3.4 SNF1/AMPK/SnRK1的下游底物 | 第28-29页 |
| 1.3.5 植物SnRK1的研究进展 | 第29-32页 |
| 1.4 本研究的目的和内容 | 第32-33页 |
| 第二章 材料与方法 | 第33-45页 |
| 2.1 植物材料 | 第33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-45页 |
| 2.2.1 mRNA提取和纯化 | 第33页 |
| 2.2.2 酵母双杂交(Y2H)文库的构建 | 第33-34页 |
| 2.2.3 饵蛋白的生物信息学分析以及修饰 | 第34-35页 |
| 2.2.4 酵母双杂交饵菌株的构建和检测 | 第35-36页 |
| 2.2.5 酵母双杂交文库筛选 | 第36-38页 |
| 2.2.6 双分子荧光杂交(BiFC) | 第38-40页 |
| 2.2.7 融合蛋白的原核表达纯化和体外实验 | 第40-42页 |
| 2.2.8 转基因植株的获得 | 第42-43页 |
| 2.2.9 转基因植株生理生化指标测定 | 第43-44页 |
| 2.2.10 实时定量qRT-PCR | 第44页 |
| 2.2.11 数据分析 | 第44-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-92页 |
| 3.1 马铃薯块茎抗/感低温糖化基因型酵母双杂交文库的构建 | 第45-50页 |
| 3.1.1 总RNA提取和mRNA的分离纯化 | 第45页 |
| 3.1.2 cDNA文库的构建 | 第45-47页 |
| 3.1.3 酵母双杂交文库的构建 | 第47-50页 |
| 3.2 酵母双杂交(Y2H)文库杂交及分析 | 第50-65页 |
| 3.2.1 饵载体构建 | 第50-53页 |
| 3.2.2 文库杂交 | 第53-59页 |
| 3.2.3 互作蛋白的确认 | 第59-64页 |
| 3.2.4 讨论 | 第64-65页 |
| 3.3 StvacINV1-StInvInh2B-SbSnRK1复合体调控机制研究 | 第65-81页 |
| 3.3.1 基因克隆以及序列分析 | 第65-66页 |
| 3.3.2 互作再验证 | 第66-69页 |
| 3.3.3 复合体对StvacINV1活性调控的机制 | 第69-80页 |
| 3.3.4 讨论 | 第80-81页 |
| 3.4 SbSnRK1α在马铃薯内的基因功能验证 | 第81-92页 |
| 3.4.1 SbSnRK1α马铃薯转基因株系的获得 | 第82-84页 |
| 3.4.2 转基因株系生理指标测定 | 第84-91页 |
| 3.4.3 讨论 | 第91-92页 |
| 第四章 总讨论 | 第92-104页 |
| 4.1 VI和VIH蛋白互作组 | 第92-94页 |
| 4.2 转化酶酶活在翻译后的精细调控模式 | 第94-99页 |
| 4.2.1 SbSnRK1复合体β亚基对转化酶的间接调控 | 第95-96页 |
| 4.2.2 α亚基磷酸化对β亚基StInvInh2B封阻作用的解除 | 第96-97页 |
| 4.2.3 转化酶的多抑制子机制在StvacINV1-StInvInh2B-SbSnRK1复合体中的表现 | 第97-99页 |
| 4.3 SbSnRK1调控马铃薯块茎低温糖化的可能机制 | 第99-102页 |
| 4.3.1 SbSnRK1α在翻译后水平调控CIS | 第99页 |
| 4.3.2 SbSnRK1蛋白序列在抗感基因型中的差别 | 第99-102页 |
| 4.4 研究展望 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-124页 |
| 附录 | 第124-133页 |
| 附录一 酵母双杂交文库筛选的潜在互作蛋白结果 | 第124-125页 |
| 附表二 块茎中代谢产物的含量测定 | 第125-126页 |
| 附录三 块茎中氨基酸含量测定 | 第126-127页 |
| 附录四 克隆的各基因在GeneBank的登陆信息 | 第127-131页 |
| 附录五 攻读博士期间发表成果 | 第131-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
