| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 高糖对人足细胞Wnt/β-catenin通路及miR-200a的表达的影响 | 第12-35页 |
| 1.1 材料与方法 | 第15-28页 |
| 1.1.1 细胞来源 | 第15页 |
| 1.1.2 实验试剂和耗材 | 第15-16页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第16-17页 |
| 1.1.4 实验试剂 | 第17-18页 |
| 1.1.5 实验方法 | 第18-19页 |
| 1.1.6 细胞干预 | 第19-20页 |
| 1.1.7 足细胞总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 1.1.8 RNA纯度和浓度的检测 | 第21页 |
| 1.1.9 RNA逆转录合成cDNA | 第21-22页 |
| 1.1.10 Real-time PCR方法检测人足细胞β-catenin、nephrin、miR-200a的表达 | 第22-24页 |
| 1.1.11 Western Blot方法检测人足细胞β-catenin、nephrin的表达 | 第24-27页 |
| 1.1.12 统计学处理 | 第27-28页 |
| 1.2 结果 | 第28-32页 |
| 1.2.1 未分化、分化成熟及高糖刺激24h人足细胞形态学改变 | 第28页 |
| 1.2.2 25mM高糖刺激人足细胞不同时间对β-catenin mRNA表达的影响 | 第28-29页 |
| 1.2.3 25mM高糖刺激人足细胞不同时间对β-catenin蛋白表达的影响 | 第29页 |
| 1.2.4 25mM高糖刺激人足细胞不同时间对nephrin mRNA表达的影响 | 第29-30页 |
| 1.2.5 25mM高糖刺激人足细胞不同时间对nephrin蛋白表达的影响 | 第30页 |
| 1.2.6 25mM高糖刺激人足细胞不同时间对miR-200a表达的影响 | 第30-32页 |
| 1.3 讨论 | 第32-34页 |
| 1.4 小结 | 第34-35页 |
| 第二章 Wnt/β-catenin通路和miR-200a在足细胞损伤中的作用 | 第35-45页 |
| 2.1 材料与方法 | 第36-39页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第36页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第36页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第36页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第36-37页 |
| 2.1.5 Real-time PCR检测瞬时转染足细胞内miR-200a、β-catenin、nephrin mRNA的表达 | 第37页 |
| 2.1.6 westen blot检测瞬时转染足细胞内β-catenin、nephrin蛋白的表达 | 第37页 |
| 2.1.7 统计学分析 | 第37-39页 |
| 2.2 结果 | 第39-42页 |
| 2.2.1 转染miR-200a-3p mimics荧光对照 | 第39页 |
| 2.2.2 转染miR-200a-3p mimics对人足细胞miR-200a表达的影响 | 第39页 |
| 2.2.3 转染miR-200a-3p mimics对人足细胞β-catenin mRNA表达的影响 | 第39-40页 |
| 2.2.4 转染miR-200a-3p mimics后β-catenin蛋白表达变化 | 第40页 |
| 2.2.5 转染miR-200a-3p mimics对人足细胞nephrin mRNA表达的影响 | 第40-41页 |
| 2.2.6 转染miR-200a-3p mimics对人足细胞nephrin蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
| 2.3 讨论 | 第42-44页 |
| 2.4 小结 | 第44-45页 |
| 全文总结 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 综述 | 第49-62页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
