| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第一章 前言 | 第7-14页 |
| 1.1 PKR的结构特征 | 第7-8页 |
| 1.2 PKR的活化 | 第8-9页 |
| 1.2.1 PKR的激活配体 | 第8-9页 |
| 1.2.2 PKR的抑制剂 | 第9页 |
| 1.2.3 PKR的蛋白底物 | 第9页 |
| 1.3 PKR的生物学功能 | 第9-12页 |
| 1.3.1 PKR的抗病毒作用 | 第10页 |
| 1.3.2 PKR调节细胞周期 | 第10页 |
| 1.3.3 PKR调节细胞生长和分化 | 第10-11页 |
| 1.3.4 PKR调节细胞信号路径 | 第11页 |
| 1.3.5 PKR与细胞凋亡 | 第11-12页 |
| 1.3.6 PKR与疾病 | 第12页 |
| 1.4 鱼类PKR的研究近况 | 第12-13页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第13-14页 |
| 第二章 材料和方法 | 第14-31页 |
| 2.1 仪器与试剂 | 第14-17页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第14-15页 |
| 2.1.2 主要试剂与试剂盒 | 第15-16页 |
| 2.1.3 载体与菌种 | 第16页 |
| 2.1.4 引物 | 第16-17页 |
| 2.2 实验材料 | 第17页 |
| 2.3 相关软件 | 第17页 |
| 2.4 实验方法 | 第17-31页 |
| 2.4.1 草鱼PKR的克隆 | 第17-21页 |
| 2.4.2 细胞培养 | 第21-22页 |
| 2.4.3 RT-PCR分析 | 第22-23页 |
| 2.4.4 二聚化分析 | 第23-26页 |
| 2.4.5 草鱼PKR抑制蛋白翻译的功能分析 | 第26-30页 |
| 2.4.6 草鱼PKR诱导细胞凋亡的功能分析 | 第30-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-43页 |
| 3.1 CiPKR基因的克隆和分析 | 第31-36页 |
| 3.1.1 CiPKR全长cDNA的克隆 | 第31页 |
| 3.1.2 CiPKR基因的核苷酸序列和推测的氨基酸序列分析 | 第31-34页 |
| 3.1.3 CiPKR基因的系统进化树 | 第34-36页 |
| 3.2 CiPKR基因的表达分析 | 第36-37页 |
| 3.2.1 CiPKR基因的组织表达分析 | 第36页 |
| 3.2.2 CiPKR基因在CIK细胞中的表达 | 第36-37页 |
| 3.3 CiPKR蛋白N-端dsRBMs的二聚化分析 | 第37-39页 |
| 3.3.1 CiPKR-dsRBMs片段的克隆 | 第37-38页 |
| 3.3.2 CiPKR-dsRBMs原核表达载体的构建及原核表达、纯化 | 第38页 |
| 3.3.3 PdsRBMs浓度的测定 | 第38-39页 |
| 3.3.4 PdsRBMs的二聚化分析 | 第39页 |
| 3.4 CiPKR抑制蛋白翻译的功能分析 | 第39-41页 |
| 3.4.1 PKR系列真核表达载体的构建 | 第39-41页 |
| 3.4.2 萤光素酶活性的检测 | 第41页 |
| 3.5 CiPKR诱导细胞凋亡的功能分析 | 第41-43页 |
| 第四章 讨论 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录：攻读学位期间发表论文 | 第50页 |
