| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第1章 前言 | 第8-13页 |
| 1.1 引言 | 第8-9页 |
| 1.2 乳腺癌 | 第9页 |
| 1.3 乳腺癌细胞系MCF-7 | 第9-10页 |
| 1.4 microRNA | 第10-12页 |
| 1.5 本论文的研究目的与意义 | 第12-13页 |
| 第2章 实验材料 | 第13-18页 |
| 2.1 材料来源 | 第13页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第13-14页 |
| 2.3 试剂与耗材 | 第14-15页 |
| 2.3.1 细胞实验的试剂与耗材 | 第14-15页 |
| 2.3.2 分子实验的试剂与耗材 | 第15页 |
| 2.4 试剂的配制 | 第15-16页 |
| 2.5 引物序列 | 第16-17页 |
| 2.6 使用的数据库及软件 | 第17-18页 |
| 第3章 实验方法 | 第18-31页 |
| 3.1 细胞的培养 | 第18-19页 |
| 3.2 microRNA慢病毒载体的构建 | 第19-25页 |
| 3.3 microRNA靶基因预测与基因功能富集 | 第25页 |
| 3.4 病毒包装与细胞感染 | 第25-28页 |
| 3.5 MCF-7细胞系的增殖相关基因表达分析 | 第28-29页 |
| 3.5.1 总RNA的提取 | 第28页 |
| 3.5.2 逆转录 | 第28-29页 |
| 3.5.3 荧光定量PCR | 第29页 |
| 3.6 MCF-7细胞系的增殖状况检测 | 第29-31页 |
| 3.6.1 细胞的铺板 | 第29-30页 |
| 3.6.2 检测试剂与细胞增殖相关性分析 | 第30页 |
| 3.6.3 数据处理 | 第30-31页 |
| 第4章 实验结果 | 第31-38页 |
| 4.1 MicroRNA靶基因功能富集与分类 | 第31-32页 |
| 4.2 慢病毒包装结果 | 第32-34页 |
| 4.2.1 病毒包装质粒与microRNA质粒共转染293T细胞的48小时荧光检测结果 | 第32-33页 |
| 4.2.2 病毒滴度的测定 | 第33-34页 |
| 4.2.3 测定好的病毒滴度 | 第34页 |
| 4.3 慢病毒感染MCF-7细胞的结果 | 第34-38页 |
| 第5章 讨论 | 第38-40页 |
| 5.1 慢病毒对MCF-7细胞系的感染 | 第38页 |
| 5.2 microRNA对细胞靶基因的作用 | 第38-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |