| 中英文缩略表 | 第4-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第14-25页 |
| 1.1 花青苷研究进展 | 第14-24页 |
| 1.1.1 花青苷的结构和种类 | 第14-15页 |
| 1.1.2 花青苷的作用 | 第15页 |
| 1.1.3 花青苷生物合成途径 | 第15-16页 |
| 1.1.4 花青苷合成的结构基因 | 第16-18页 |
| 1.1.5 调控花青苷合成的转录因子 | 第18-22页 |
| 1.1.5.1 MYB转录因子 | 第18-20页 |
| 1.1.5.2 bHLH转录因子 | 第20页 |
| 1.1.5.3 WD40蛋白 | 第20-21页 |
| 1.1.5.4 MYB-bHLH-WD40蛋白复合体调控花青苷的合成 | 第21-22页 |
| 1.1.6 花青苷合成的影响因子 | 第22-23页 |
| 1.1.6.1 光照 | 第22页 |
| 1.1.6.2 温度 | 第22-23页 |
| 1.1.6.3 植物激素 | 第23页 |
| 1.1.7 红皮梨花青苷研究进展 | 第23-24页 |
| 1.2 研究的主要内容 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-36页 |
| 2.1 试验材料及其处理 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第25页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-36页 |
| 2.2.1 花青苷的提取和测定 | 第26页 |
| 2.2.2 植物DNA的提取 | 第26页 |
| 2.2.3 植物总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.4 cDNA第一链合成 | 第27-28页 |
| 2.2.5 PyMYB10.1 全长克隆 | 第28页 |
| 2.2.6 PyMYB10.1 生物信息学分析 | 第28页 |
| 2.2.7 qRT-PCR分析 | 第28页 |
| 2.2.8 PCR扩增 | 第28-29页 |
| 2.2.9 琼脂糖凝胶DNA回收 | 第29页 |
| 2.2.10 DNA片段与克隆载体连接 | 第29页 |
| 2.2.11 大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第29-30页 |
| 2.2.11.1 大肠杆菌DH5α 感受态细胞制备 | 第29-30页 |
| 2.2.11.2 热击法转化DH5α 感受态细胞 | 第30页 |
| 2.2.12 筛菌、测序 | 第30页 |
| 2.2.13 质粒DNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.14 土壤农杆菌感受态的制备与转化 | 第31-32页 |
| 2.2.14.1 土壤农杆菌感受态的制备 | 第31页 |
| 2.2.14.2 农杆菌感受态细胞的转化 | 第31-32页 |
| 2.2.15 酵母双杂交 | 第32-34页 |
| 2.2.15.1 构建表达载体 | 第32页 |
| 2.2.15.2 试剂配制 | 第32-33页 |
| 2.2.15.3 实验步骤 | 第33-34页 |
| 2.2.16 双分子荧光互补（BiFC） | 第34页 |
| 2.2.16.1 构建表达载体 | 第34页 |
| 2.2.16.2 洋葱表皮遗传转化 | 第34页 |
| 2.2.16.3 共聚焦显微镜观察 | 第34页 |
| 2.2.17 烟草瞬时表达分析 | 第34-36页 |
| 2.2.17.1 构建表达载体 | 第34-35页 |
| 2.2.17.2 转化农杆菌，注射烟草叶片 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-46页 |
| 3.1‘奥冠’梨PyMYB10.1 基因克隆与生物信息学分析 | 第36-38页 |
| 3.1.1 PyMYB10.1 基因克隆 | 第36页 |
| 3.1.2 PyMYB10.1 基因序列分析 | 第36-37页 |
| 3.1.3 PyMYB10.1 进化树分析 | 第37-38页 |
| 3.2‘奥冠’梨果实花青苷含量测定及PyMYB10.1 基因表达分析 | 第38-42页 |
| 3.2.1 PyMYB10.1 在‘奥冠’梨各组织器官中的表达 | 第38-39页 |
| 3.2.2 光照对‘奥冠’梨花青苷合成及PyMYB10.1 基因表达的影响 | 第39-40页 |
| 3.2.3 MeJA处理对‘奥冠’梨花青苷合成及PyMYB10.1 基因表达的影响 | 第40-42页 |
| 3.3 PyMYB10.1、PyMYB10与PybHLH蛋白互作 | 第42-43页 |
| 3.3.1 酵母双杂交 | 第42-43页 |
| 3.3.2 双分子荧光互补（BiFC） | 第43页 |
| 3.4 转录因子对花青苷生物合成基因的调控 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 4.1 PyMYB10.1 为PyMYB10的同源基因 | 第46页 |
| 4.2 PyMYB10.1 的基因表达模式 | 第46-47页 |
| 4.3 PyMYB10.1 与Pyb HLH蛋白互作 | 第47页 |
| 4.4 PyMYB10.1 与Pyb HLH通过激活结构基因的启动子调控花青苷合成 | 第47-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-63页 |
| 附录 | 第63-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第67页 |
