| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| Abbreviations | 第11-13页 |
| 1. Introduction | 第13-14页 |
| 2. Literature review | 第14-26页 |
| 2.1. The common approach of functional characterization of the gene | 第14-15页 |
| 2.2. Abiotic stress: As major environmental factors | 第15-18页 |
| 2.2.1. Drought stress | 第16页 |
| 2.2.2. Salt stress | 第16-17页 |
| 2.2.3. Cold stress | 第17-18页 |
| 2.3. Plant responses to unfavorable abiotic stressors | 第18-23页 |
| 2.3.1. Generic pathway of plant response to abiotic stresses | 第18-20页 |
| 2.3.2. Osmotic response of plants against abiotic stress | 第20-21页 |
| 2.3.3. Reactive oxygen species (ROS) homoeostasis under abiotic stress | 第21-23页 |
| 2.4. Photosynthesis process and its related parameters | 第23-24页 |
| 2.5. Alkaline/neutral invertase genes | 第24-26页 |
| 3. The objectives | 第26-27页 |
| 4. Materials and methods | 第27-43页 |
| 4.1. Materials | 第27-28页 |
| 4.1.1. Plant materials and growth conditions | 第27页 |
| 4.1.2. Plasmids | 第27-28页 |
| 4.1.3. Bacteria | 第28页 |
| 4.1.4. Kits and Enzymes | 第28页 |
| 4.2. Methods | 第28-43页 |
| 4.2.1. Bioinformatics analysis of Ptr A/NINV sequence | 第28-29页 |
| 4.2.2. Transcription level analysis of Ptr A/NINV | 第29-32页 |
| 4.2.2.1. RNA extraction | 第29-30页 |
| 4.2.2.2. First strand c DNA synthesis | 第30-31页 |
| 4.2.2.3. Quality test of synthesized c DNA | 第31页 |
| 4.2.2.4. Quantitative real-time RT-PCR (q RT-PCR) analysis | 第31-32页 |
| 4.2.3. Subcellular localization analysis of Ptr A/NINV | 第32-36页 |
| 4.2.3.1. Construct the fusion protein of Ptr A/NINV:: GFP | 第32-35页 |
| 4.2.3.2. Agrobacterium-mediated transient expression of the Ptr A/NINV:: GFP fusion protein | 第35-36页 |
| 4.2.4. Identification the promoter sequence of Ptr A/NINV | 第36-37页 |
| 4.2.4.1. DNA extraction | 第36-37页 |
| 4.2.4.2. Isolation the promoter region of Ptr A/NINV | 第37页 |
| 4.2.5. Isolation of Ptr A/NINV protein | 第37-38页 |
| 4.2.5.1. Construct the recombinant His6:: Ptr A/NINV fusion protein | 第37页 |
| 4.2.5.2. Assay the recombinant His6:: Ptr A/NINV fusion protein | 第37-38页 |
| 4.2.6. Abiotic stress tolerance analysis of Ptr A/NINV overexpressing plants | 第38-43页 |
| 4.2.6.1. Regeneration of Ptr A/NINV overexpressing plants | 第38-39页 |
| 4.2.6.2. Cold stress tolerance assay | 第39页 |
| 4.2.6.3. Salt stress tolerance assay | 第39-40页 |
| 4.2.6.4. Drought stress tolerance assay | 第40页 |
| 4.2.6.5. Physiological and biochemical measurements | 第40-43页 |
| 4.2.7. Statistical analysis | 第43页 |
| 5. Results | 第43-61页 |
| 5.1. Identification and sequence analysis of Ptr A/NINV | 第43-46页 |
| 5.2. Identification the promoter sequence of Ptr A/NINV | 第46-47页 |
| 5.3. Expression pattern analysis of Ptr A/NINV | 第47-48页 |
| 5.4. Ptr A/NINV localizes in the mitochondria and chloroplast | 第48-50页 |
| 5.5. Generation of stable Ptr A/NINV-overexpressing plants | 第50-51页 |
| 5.6. Enhanced cold tolerance in the transgenic plants | 第51页 |
| 5.7. Ptr A/NINV overexpression renders robust salt stress tolerance | 第51-55页 |
| 5.8. Overexpression of Ptr A/NINV improved drought tolerance | 第55-57页 |
| 5.9. Ptr A/NINV-overexpressing plants accumulate lower ROS and hold moreantioxidant enzyme activities | 第57-58页 |
| 5.10. The increase in A/N-INV activity and reducing sugar contents underpin thedetoxification of ROS | 第58-60页 |
| 5.11. Analysis of the expression patterns of several genes related to antioxidantdefense, stress response and sugar metabolism under cold and salt stresses | 第60-61页 |
| 6. Discussion | 第61-67页 |
| 7. Conclusion | 第67-68页 |
| 8. References | 第68-77页 |
| 9. The achievements | 第77-78页 |
| 10. Appendixes | 第78-88页 |
| Appendix-I | 第78-80页 |
| Appendix-II | 第80-82页 |
| Appendix-III | 第82-83页 |
| Appendix-IV | 第83-84页 |
| Appendix-V | 第84-85页 |
| Appendix-VI | 第85-86页 |
| Appendix-VII | 第86-87页 |
| Appendix-VIII | 第87-88页 |
| ACKNOWLEDGMENTS | 第88-89页 |
