摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
1 前言 | 第12-26页 |
1.1 再生研究的进展 | 第12-16页 |
1.1.1 脊椎动物再生的研究 | 第12-13页 |
1.1.2 不同组织再生的研究 | 第13-16页 |
1.2 鱼鳍再生的研究进展 | 第16-22页 |
1.2.1 硬骨鱼鱼鳍的基本结构 | 第16-17页 |
1.2.2 鱼鳍再生的过程 | 第17-18页 |
1.2.3 鱼鳍再生有关的基因及信号通路 | 第18-21页 |
1.2.4 影响鱼鳍再生的因素 | 第21-22页 |
1.2.5 鱼鳍再生的最新研究进展 | 第22页 |
1.3 Gig2基因的研究认识 | 第22-24页 |
1.4 Frr2基因的研究 | 第24页 |
1.5 研究目的与意义 | 第24-26页 |
2 材料与方法 | 第26-44页 |
2.1 实验材料 | 第26-29页 |
2.1.1 实验动物 | 第26页 |
2.1.2 载体和宿主菌 | 第26页 |
2.1.3 常用设备和仪器 | 第26页 |
2.1.4 主要试剂 | 第26-27页 |
2.1.5 主要常用溶液及配方 | 第27-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-44页 |
2.2.1 大鳞副泥鳅Gig2与Frr2基因的筛选 | 第29-30页 |
2.2.2 Southern斑点杂交筛选表达差异变化明显的克隆 | 第30-31页 |
2.2.3 再生鱼鳍总RNA的提取 | 第31-32页 |
2.2.4 两个基因全长的克隆 | 第32-36页 |
2.2.5 大鳞副泥鳅Gig2和Frr2两种基因 3’与 5’序列的测序及分析 | 第36-38页 |
2.2.6 两种基因在大鳞副泥鳅尾鳍再生,胚胎,不同组织中的表达分析 | 第38-39页 |
2.2.7 原位杂交研究基因在再生鱼鳍部位的表达 | 第39-44页 |
3 结果与分析 | 第44-64页 |
3.1 大鳞副泥鳅GIG2和Frr2基因的筛选 | 第44页 |
3.2 大鳞副泥鳅Gig2基因和Frr2的克隆 | 第44-46页 |
3.2.1 总RNA的提取 | 第44-45页 |
3.2.2 RACE法扩增两个基因的 3’端序列 | 第45页 |
3.2.3 5’RACE法扩增两个基因的 5’端序列 | 第45-46页 |
3.3 大鳞副泥鳅中再生相关的Gig2基因的生物信息学分析 | 第46-56页 |
3.3.1 Gig2基因的全长cDNA和氨基酸序列分析 | 第46-47页 |
3.3.2 大鳞副泥鳅Gig2基因同源性及系统进化分析 | 第47-50页 |
3.3.3 氨基酸序列的跨膜分析及组成和Gig2蛋白质结构分析 | 第50-51页 |
3.3.4 Gig2基因在尾鳍再生过程中的表达模式分析 | 第51-52页 |
3.3.5 胚胎发育时期Gig2基因的表达模式分析 | 第52-53页 |
3.3.6 大鳞副泥鳅成体组织的表达模式分析 | 第53-54页 |
3.3.7 Gig2基因原位杂交结果及分析 | 第54-56页 |
3.4 大鳞副泥鳅中再生相关的 75(Frr2)基因的生物信息学分析 | 第56-64页 |
3.4.1 Frr2基因的全长cDNA和氨基酸序列分析 | 第56-57页 |
3.4.2 Frr2蛋白结构分析 | 第57-58页 |
3.4.3 Frr2基因在尾鳍再生过程中的表达模式分析 | 第58-59页 |
3.4.4 胚胎发育时期Frr2的表达模式分析 | 第59-60页 |
3.4.5 大鳞副泥鳅Frr2基因在成体组织中的表达模式分析 | 第60-61页 |
3.4.6 大鳞副泥鳅Frr2基因原位杂交结果及分析 | 第61-64页 |
4 讨论 | 第64-68页 |
4.1 Gig2基因的分析 | 第64-66页 |
4.1.1 Gig2基因的克隆及序列分析 | 第64-65页 |
4.1.2 大鳞副泥鳅Gig2基因的表达结果分析 | 第65页 |
4.1.3 大鳞副泥鳅Gig2基因原位杂交结果分析 | 第65-66页 |
4.2 Frr2基因的相关分析 | 第66-67页 |
4.2.1 Frr2基因的克隆及序列分析 | 第66页 |
4.2.2 大鳞副泥鳅Frr2基因的表达结果分析 | 第66-67页 |
4.2.3 Frr2基因的原位杂交结果的分析 | 第67页 |
4.3 展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第80-81页 |