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大鳞副泥鳅尾鳍再生相关基因PdGig2和PdFrr2的克隆及表达分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
1 前言第12-26页
    1.1 再生研究的进展第12-16页
        1.1.1 脊椎动物再生的研究第12-13页
        1.1.2 不同组织再生的研究第13-16页
    1.2 鱼鳍再生的研究进展第16-22页
        1.2.1 硬骨鱼鱼鳍的基本结构第16-17页
        1.2.2 鱼鳍再生的过程第17-18页
        1.2.3 鱼鳍再生有关的基因及信号通路第18-21页
        1.2.4 影响鱼鳍再生的因素第21-22页
        1.2.5 鱼鳍再生的最新研究进展第22页
    1.3 Gig2基因的研究认识第22-24页
    1.4 Frr2基因的研究第24页
    1.5 研究目的与意义第24-26页
2 材料与方法第26-44页
    2.1 实验材料第26-29页
        2.1.1 实验动物第26页
        2.1.2 载体和宿主菌第26页
        2.1.3 常用设备和仪器第26页
        2.1.4 主要试剂第26-27页
        2.1.5 主要常用溶液及配方第27-29页
    2.2 实验方法第29-44页
        2.2.1 大鳞副泥鳅Gig2与Frr2基因的筛选第29-30页
        2.2.2 Southern斑点杂交筛选表达差异变化明显的克隆第30-31页
        2.2.3 再生鱼鳍总RNA的提取第31-32页
        2.2.4 两个基因全长的克隆第32-36页
        2.2.5 大鳞副泥鳅Gig2和Frr2两种基因 3’与 5’序列的测序及分析第36-38页
        2.2.6 两种基因在大鳞副泥鳅尾鳍再生,胚胎,不同组织中的表达分析第38-39页
        2.2.7 原位杂交研究基因在再生鱼鳍部位的表达第39-44页
3 结果与分析第44-64页
    3.1 大鳞副泥鳅GIG2和Frr2基因的筛选第44页
    3.2 大鳞副泥鳅Gig2基因和Frr2的克隆第44-46页
        3.2.1 总RNA的提取第44-45页
        3.2.2 RACE法扩增两个基因的 3’端序列第45页
        3.2.3 5’RACE法扩增两个基因的 5’端序列第45-46页
    3.3 大鳞副泥鳅中再生相关的Gig2基因的生物信息学分析第46-56页
        3.3.1 Gig2基因的全长cDNA和氨基酸序列分析第46-47页
        3.3.2 大鳞副泥鳅Gig2基因同源性及系统进化分析第47-50页
        3.3.3 氨基酸序列的跨膜分析及组成和Gig2蛋白质结构分析第50-51页
        3.3.4 Gig2基因在尾鳍再生过程中的表达模式分析第51-52页
        3.3.5 胚胎发育时期Gig2基因的表达模式分析第52-53页
        3.3.6 大鳞副泥鳅成体组织的表达模式分析第53-54页
        3.3.7 Gig2基因原位杂交结果及分析第54-56页
    3.4 大鳞副泥鳅中再生相关的 75(Frr2)基因的生物信息学分析第56-64页
        3.4.1 Frr2基因的全长cDNA和氨基酸序列分析第56-57页
        3.4.2 Frr2蛋白结构分析第57-58页
        3.4.3 Frr2基因在尾鳍再生过程中的表达模式分析第58-59页
        3.4.4 胚胎发育时期Frr2的表达模式分析第59-60页
        3.4.5 大鳞副泥鳅Frr2基因在成体组织中的表达模式分析第60-61页
        3.4.6 大鳞副泥鳅Frr2基因原位杂交结果及分析第61-64页
4 讨论第64-68页
    4.1 Gig2基因的分析第64-66页
        4.1.1 Gig2基因的克隆及序列分析第64-65页
        4.1.2 大鳞副泥鳅Gig2基因的表达结果分析第65页
        4.1.3 大鳞副泥鳅Gig2基因原位杂交结果分析第65-66页
    4.2 Frr2基因的相关分析第66-67页
        4.2.1 Frr2基因的克隆及序列分析第66页
        4.2.2 大鳞副泥鳅Frr2基因的表达结果分析第66-67页
        4.2.3 Frr2基因的原位杂交结果的分析第67页
    4.3 展望第67-68页
参考文献第68-78页
致谢第78-80页
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录第80-81页

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