摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
英文缩略表 | 第9-10页 |
第1章 绪论 | 第10-25页 |
1.1 奶牛乳房炎概况 | 第10-11页 |
1.2 奶牛乳房炎病因及病原菌 | 第11-12页 |
1.3 奶牛乳房炎防治 | 第12-16页 |
1.4 金黄色葡萄球菌研究 | 第16-22页 |
1.5 金黄色葡萄球菌与乳腺上皮细胞研究 | 第22-23页 |
1.6 研究的目的与意义 | 第23-25页 |
第2章 牛乳源金黄色葡萄球菌Fn BPA-A不同遗传多态性重组质粒免疫小鼠的免疫特性分析 | 第25-41页 |
2.1 材料 | 第25-26页 |
2.1.1 菌株及细胞 | 第25页 |
2.1.2 实验仪器 | 第25-26页 |
2.1.3 实验试剂 | 第26页 |
2.1.4 实验动物 | 第26页 |
2.2 方法 | 第26-30页 |
2.2.1 FnBPA-A遗传多态性分析 | 第26页 |
2.2.2 FnBPA-A重组质粒的构建与鉴定 | 第26页 |
2.2.3 FnBPA-A重组质粒的大量制备 | 第26-27页 |
2.2.4 FnBPA-A重组质粒表达的检测 | 第27页 |
2.2.5 FnBPA-A重组质粒免疫 | 第27-28页 |
2.2.6 鼠免疫后抗血清检测 | 第28页 |
2.2.7 免疫鼠血清抑制金黄色葡萄球菌与Fg黏附的检测 | 第28页 |
2.2.8 脾脏淋巴细胞增殖试验 | 第28-29页 |
2.2.9 IL-4 与IFN-γ检测 | 第29-30页 |
2.2.10 重组质粒免疫保护力检测 | 第30页 |
2.3 结果 | 第30-38页 |
2.3.1 FnBPA-A氨基酸序列分析 | 第30-32页 |
2.3.2 间接免疫荧光检测 | 第32-33页 |
2.3.3 重组质粒的大量制备 | 第33页 |
2.3.4 小鼠抗血清抗体水平检测 | 第33-34页 |
2.3.5 小鼠免疫血清抗体效价测定 | 第34页 |
2.3.6 小鼠抗血清对不同金黄色葡萄球菌分离株的识别 | 第34-36页 |
2.3.7 FnBPA-A不同遗传多态性重组质粒免疫小鼠的抗血清抑制金黄色葡萄球菌对纤维蛋白原(Fg)的粘附 | 第36页 |
2.3.8 FnBPA-A不同重组质粒免疫小鼠后脾脏淋巴细胞增殖效果检测 | 第36-37页 |
2.3.9 IL-4 与IFN-γ水平检测 | 第37页 |
2.3.10 重组质粒免疫保护力检测 | 第37-38页 |
2.4 讨论 | 第38-39页 |
2.5 小结 | 第39-41页 |
第3章 乳腺上皮细胞的分离培养与鉴定 | 第41-50页 |
3.1 材料 | 第41-42页 |
3.1.1 乳腺组织的采集 | 第41页 |
3.1.2 实验仪器 | 第41页 |
3.1.3 主要试剂 | 第41-42页 |
3.1.4 主要试剂的配置 | 第42页 |
3.2 方法 | 第42-44页 |
3.2.1 乳腺上皮细胞的分离 | 第42-43页 |
3.2.2 乳腺上皮细胞的分离纯化 | 第43页 |
3.2.3 乳腺上皮细胞的冻存与复苏 | 第43页 |
3.2.4 乳腺上皮细胞的鉴定 | 第43-44页 |
3.2.5 生长曲线的测定 | 第44页 |
3.3 结果 | 第44-47页 |
3.3.1 细胞的分离培养结果 | 第44-46页 |
3.3.2 乳腺上皮细胞生长曲线 | 第46页 |
3.3.3 乳腺上皮细胞鉴定 | 第46-47页 |
3.4 讨论 | 第47-49页 |
3.5 小结 | 第49-50页 |
第4章 牛源金黄色葡萄球菌、乳腺上皮细胞与FnBPA-A抗血清相互作用的研究 | 第50-60页 |
4.1 材料 | 第50-51页 |
4.1.1 菌株与血清 | 第50页 |
4.1.2 实验器材 | 第50页 |
4.1.3 实验试剂 | 第50-51页 |
4.2 方法 | 第51-52页 |
4.2.1 细胞细菌染色 | 第51页 |
4.2.2 不同金黄色葡萄球菌粘附牛乳腺上皮细胞 | 第51-52页 |
4.2.3 FnBPA-A不同遗传多态性抗血清抑制金黄色葡萄球菌粘附乳腺上皮细胞 | 第52页 |
4.3 结果 | 第52-57页 |
4.3.1 乳腺上皮细胞的DiI染色 | 第52-53页 |
4.3.2 金黄色葡萄球菌CFSE染色 | 第53页 |
4.3.3 金黄色葡萄球菌粘附乳腺上皮细胞染色 | 第53-54页 |
4.3.4 不同金黄色葡萄球菌粘附乳腺上皮细胞 | 第54-55页 |
4.3.5 FnBPA-A不同遗传多态性重组质粒免疫后抗血清对同一金黄色葡萄球菌分离株粘附牛乳腺上皮细胞抑制能力的检测与比较 | 第55页 |
4.3.6 FnBPA-A遗传多态性重组质粒免疫后抗血清对不同金黄色葡萄球菌分离株粘附牛乳腺上皮细胞抑制能力的比较 | 第55-57页 |
4.4 讨论 | 第57-59页 |
4.5 小结 | 第59-60页 |
第5章 全文结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
个人简历 | 第71页 |