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牛源金黄色葡萄球菌FnBPA-A分子不同遗传多态性重组质粒免疫生物学特性研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
英文缩略表第9-10页
第1章 绪论第10-25页
    1.1 奶牛乳房炎概况第10-11页
    1.2 奶牛乳房炎病因及病原菌第11-12页
    1.3 奶牛乳房炎防治第12-16页
    1.4 金黄色葡萄球菌研究第16-22页
    1.5 金黄色葡萄球菌与乳腺上皮细胞研究第22-23页
    1.6 研究的目的与意义第23-25页
第2章 牛乳源金黄色葡萄球菌Fn BPA-A不同遗传多态性重组质粒免疫小鼠的免疫特性分析第25-41页
    2.1 材料第25-26页
        2.1.1 菌株及细胞第25页
        2.1.2 实验仪器第25-26页
        2.1.3 实验试剂第26页
        2.1.4 实验动物第26页
    2.2 方法第26-30页
        2.2.1 FnBPA-A遗传多态性分析第26页
        2.2.2 FnBPA-A重组质粒的构建与鉴定第26页
        2.2.3 FnBPA-A重组质粒的大量制备第26-27页
        2.2.4 FnBPA-A重组质粒表达的检测第27页
        2.2.5 FnBPA-A重组质粒免疫第27-28页
        2.2.6 鼠免疫后抗血清检测第28页
        2.2.7 免疫鼠血清抑制金黄色葡萄球菌与Fg黏附的检测第28页
        2.2.8 脾脏淋巴细胞增殖试验第28-29页
        2.2.9 IL-4 与IFN-γ检测第29-30页
        2.2.10 重组质粒免疫保护力检测第30页
    2.3 结果第30-38页
        2.3.1 FnBPA-A氨基酸序列分析第30-32页
        2.3.2 间接免疫荧光检测第32-33页
        2.3.3 重组质粒的大量制备第33页
        2.3.4 小鼠抗血清抗体水平检测第33-34页
        2.3.5 小鼠免疫血清抗体效价测定第34页
        2.3.6 小鼠抗血清对不同金黄色葡萄球菌分离株的识别第34-36页
        2.3.7 FnBPA-A不同遗传多态性重组质粒免疫小鼠的抗血清抑制金黄色葡萄球菌对纤维蛋白原(Fg)的粘附第36页
        2.3.8 FnBPA-A不同重组质粒免疫小鼠后脾脏淋巴细胞增殖效果检测第36-37页
        2.3.9 IL-4 与IFN-γ水平检测第37页
        2.3.10 重组质粒免疫保护力检测第37-38页
    2.4 讨论第38-39页
    2.5 小结第39-41页
第3章 乳腺上皮细胞的分离培养与鉴定第41-50页
    3.1 材料第41-42页
        3.1.1 乳腺组织的采集第41页
        3.1.2 实验仪器第41页
        3.1.3 主要试剂第41-42页
        3.1.4 主要试剂的配置第42页
    3.2 方法第42-44页
        3.2.1 乳腺上皮细胞的分离第42-43页
        3.2.2 乳腺上皮细胞的分离纯化第43页
        3.2.3 乳腺上皮细胞的冻存与复苏第43页
        3.2.4 乳腺上皮细胞的鉴定第43-44页
        3.2.5 生长曲线的测定第44页
    3.3 结果第44-47页
        3.3.1 细胞的分离培养结果第44-46页
        3.3.2 乳腺上皮细胞生长曲线第46页
        3.3.3 乳腺上皮细胞鉴定第46-47页
    3.4 讨论第47-49页
    3.5 小结第49-50页
第4章 牛源金黄色葡萄球菌、乳腺上皮细胞与FnBPA-A抗血清相互作用的研究第50-60页
    4.1 材料第50-51页
        4.1.1 菌株与血清第50页
        4.1.2 实验器材第50页
        4.1.3 实验试剂第50-51页
    4.2 方法第51-52页
        4.2.1 细胞细菌染色第51页
        4.2.2 不同金黄色葡萄球菌粘附牛乳腺上皮细胞第51-52页
        4.2.3 FnBPA-A不同遗传多态性抗血清抑制金黄色葡萄球菌粘附乳腺上皮细胞第52页
    4.3 结果第52-57页
        4.3.1 乳腺上皮细胞的DiI染色第52-53页
        4.3.2 金黄色葡萄球菌CFSE染色第53页
        4.3.3 金黄色葡萄球菌粘附乳腺上皮细胞染色第53-54页
        4.3.4 不同金黄色葡萄球菌粘附乳腺上皮细胞第54-55页
        4.3.5 FnBPA-A不同遗传多态性重组质粒免疫后抗血清对同一金黄色葡萄球菌分离株粘附牛乳腺上皮细胞抑制能力的检测与比较第55页
        4.3.6 FnBPA-A遗传多态性重组质粒免疫后抗血清对不同金黄色葡萄球菌分离株粘附牛乳腺上皮细胞抑制能力的比较第55-57页
    4.4 讨论第57-59页
    4.5 小结第59-60页
第5章 全文结论第60-61页
参考文献第61-70页
致谢第70-71页
个人简历第71页

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