| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-23页 |
| 1 PBDEs性质、来源及危害 | 第16-19页 |
| ·PBDEs的物理化学性质 | 第16-17页 |
| ·海洋环境中PBDEs的来源及分布 | 第17-19页 |
| ·海洋环境中PBDEs的来源 | 第17-18页 |
| ·海洋环境中PBDEs的分布 | 第18-19页 |
| ·PBDEs的危害 | 第19页 |
| 2 PBDEs对生物体毒性效应的研究进展 | 第19-21页 |
| 3 POPs海洋污染监测现状 | 第21-22页 |
| ·POPs污染的化学监测法 | 第21-22页 |
| ·POPs污染的生物标志物监测法 | 第22页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 菲律宾蛤仔解毒代谢酶基因的克隆与序列分析 | 第23-57页 |
| 第一节 菲律宾蛤仔细胞色素P450(CYP4)酶基因的克隆与序列分析 | 第23-44页 |
| 1 材料与方法 | 第23-36页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-35页 |
| ·调取CYP4基因的核心片段 | 第24-27页 |
| ·总RNA提取 | 第24页 |
| ·组织样品总RNA中DNA的消除 | 第24-25页 |
| ·反转录反应 | 第25-26页 |
| ·PCR扩增条件 | 第26-27页 |
| ·末端加尾法(TDT)技术扩增CYP4-5' | 第27-30页 |
| ·总RNA提取 | 第27页 |
| ·组织样品总RNA中DNA的消除 | 第27页 |
| ·末端加尾(TDT)法5'cDNA的合成 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增条件 | 第28-30页 |
| ·RACE技术扩增CYP4-3' | 第30-32页 |
| ·总RNA提取 | 第30页 |
| ·组织样品总RNA中DNA的消除 | 第30页 |
| ·3'-RACE cDNA合成 | 第30-31页 |
| ·PCR扩增条件 | 第31-32页 |
| ·目的基因的回收纯化 | 第32-33页 |
| ·目的基因的克隆与测序 | 第33-34页 |
| ·CYP4的组织特异性分析 | 第34-35页 |
| ·序列分析与系统进化树构建 | 第35-36页 |
| 2 实验结果 | 第36-42页 |
| ·菲律宾蛤仔CYP4基因cDNA全序列分析 | 第36-38页 |
| ·氨基酸同源性分析与结构功能域比较 | 第38-40页 |
| ·系统进化树构建 | 第40-42页 |
| ·组织特异性分析 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 第二节 菲律宾蛤仔谷胱甘肽硫转移酶(GST)基因的克隆与序列分析 | 第44-57页 |
| 1 材料与方法 | 第44-50页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·调取GST基因的核心片段 | 第45-46页 |
| ·总RNA提取 | 第45页 |
| ·组织样品总RNA中DNA的消除 | 第45页 |
| ·cDNA合成 | 第45页 |
| ·PCR扩增条件 | 第45-46页 |
| ·末端加尾(TDT)法扩增GST-5' | 第46-48页 |
| ·总RNA提取 | 第46页 |
| ·组织样品总RNA中DNA的消除 | 第46页 |
| ·cDNA合成 | 第46页 |
| ·PCR扩增条件 | 第46-48页 |
| ·RACE技术扩增GST-3' | 第48页 |
| ·总RNA提取 | 第48页 |
| ·组织样品总RNA中DNA的消除 | 第48页 |
| ·cDNA合成 | 第48页 |
| ·PCR扩增条件 | 第48页 |
| ·目的基因的胶回收纯化 | 第48页 |
| ·目的基因的克隆与测序 | 第48页 |
| ·GST基因的组织特异性 | 第48-49页 |
| ·序列分析与系统进化树构建 | 第49-50页 |
| 2 实验结果 | 第50-55页 |
| ·菲律宾蛤仔GST基因cDNA全序列分析 | 第50-51页 |
| ·氨基酸同源性分析与结构功能域比较 | 第51-53页 |
| ·系统进化树构建 | 第53-55页 |
| ·组织特异性分析 | 第55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 第三章 四溴联苯醚BDE-47对菲律宾蛤仔解毒代谢酶基因表达的影响 | 第57-66页 |
| 1 材料与方法 | 第57-60页 |
| ·实验材料 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-59页 |
| ·实验梯度设置 | 第58页 |
| ·样品制备 | 第58页 |
| ·PCR反应体系及程序 | 第58-59页 |
| ·数据处理与分析 | 第59-60页 |
| 2 实验结果 | 第60-62页 |
| ·BDE-47对菲律宾蛤仔鳃和消化盲囊中AhR基因表达的影响 | 第60页 |
| ·BDE-47对菲律宾蛤仔鳃和消化盲囊CYP4基因表达的影响 | 第60-61页 |
| ·BDE-47对菲律宾蛤仔鳃和消化盲囊GST-pi基因表达的影响 | 第61-62页 |
| ·BDE-47对菲律宾蛤仔鳃和消化盲囊PgP基因表达的影响 | 第62页 |
| 3 讨论 | 第62-66页 |
| 第四章 四溴联苯醚(BDE-47)对菲律宾蛤仔组织解毒代谢酶活力与DNA损伤的影响 | 第66-76页 |
| 1 材料与方法 | 第67-70页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·实验方法 | 第67-70页 |
| ·实验梯度设置 | 第67-68页 |
| ·样品制备 | 第68页 |
| ·解毒代谢酶活力的测定 | 第68-69页 |
| ·DNA损伤的测定 | 第69-70页 |
| ·数据统计分析 | 第70页 |
| 2 实验结果 | 第70-73页 |
| ·BDE-47对菲律宾蛤仔组织解毒代谢酶活力的影响 | 第70-71页 |
| ·BDE-47对菲律宾蛤仔组织DNA损伤的影响 | 第71-72页 |
| ·菲律宾蛤仔组织解毒代谢和DNA损伤指标与BDE-47的相关性 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-76页 |
| ·BDE-47对菲律宾蛤仔组织解毒代谢酶活力和DNA损伤的影响 | 第73-74页 |
| ·基于菲律宾蛤仔的BDE-47生物标志物的探讨 | 第74-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 个人简历 | 第89-90页 |
| 发表学术论文 | 第90页 |
