| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-25页 |
| 1.1 基因沉默的原理及研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1.1 siRNA | 第12页 |
| 1.1.2 microRNA | 第12-15页 |
| 1.2 人工microRNA（amiRNA）技术的建立与发展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 amiRNA技术简介 | 第15页 |
| 1.2.2 amiRNA序列的设计与克隆 | 第15-16页 |
| 1.2.3 amiRNA技术的实际应用 | 第16-18页 |
| 1.3 芥子油苷的代谢调控 | 第18-21页 |
| 1.3.1 芥子油苷简介 | 第18-19页 |
| 1.3.2 芥子油苷的合成 | 第19-21页 |
| 1.4 FMO基因的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.4.1 拟南芥中FMO基因简介 | 第22-23页 |
| 1.4.2 FMO_(GS-OX)基因家族的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.5 目的意义及实验思路 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 材料 | 第25页 |
| 2.1.2 试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.3 培养基 | 第26页 |
| 2.1.4 仪器 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 amiRNA的设计 | 第26页 |
| 2.2.2 amiRNA前体的克隆 | 第26-27页 |
| 2.2.3 35S::amiRNA植物表达载体的构建 | 第27页 |
| 2.2.4 拟南芥的遗传转化 | 第27-28页 |
| 2.2.5 转基因植株的分子生物学检测 | 第28-29页 |
| 2.2.6 转基因植株中amiRNA沉默效应的分析 | 第29-30页 |
| 2.2.7 转基因植株中芥子油苷组分及含量变化的分析 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-38页 |
| 3.1 amiRNA基因的设计 | 第31-32页 |
| 3.2 amiRNA前体序列的克隆与载体构建 | 第32页 |
| 3.3 35S::amiRNA转基因植株的建立 | 第32-34页 |
| 3.4 转基因植株中amiRNA的PCR检测 | 第34页 |
| 3.5 转基因植株中amiRNA的RT-PCR检测 | 第34-35页 |
| 3.6 转基因植株中amiRNA靶基因FMO_(GS-OX1-4) 的RT-PCR检测 | 第35-36页 |
| 3.7 转基因植株中芥子油苷组分及含量变化的分析 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-41页 |
| 4.1 amiRNA技术特点及应用 | 第38-39页 |
| 4.1.1 amiRNA技术的优势 | 第38页 |
| 4.1.2 amiRNA技术的局限 | 第38页 |
| 4.1.3 amiRNA技术的改进策略 | 第38-39页 |
| 4.1.4 amiRNA技术的应用前景 | 第39页 |
| 4.2 amiRNA沉默多个基因的具体应用 | 第39-41页 |
| 4.2.1 amiRNA沉默FMO_(GS-OX1-4) 基因的效应分析 | 第39页 |
| 4.2.2 转基因植株中芥子油苷组分及含量变化的分析 | 第39-40页 |
| 4.2.3 下一步工作的方法及方向建议 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第53页 |
