| 致谢 | 第6-10页 |
| 摘要 | 第10-14页 |
| 1 真菌甘露糖转移酶、组蛋白乙酰转移酶、叉头转录因子及6-磷酸海藻糖合成酶的研究概况 | 第14-24页 |
| 1.1 PMT家族甘露糖转移酶 | 第14-18页 |
| 1.2 Ktr家族甘露糖转移酶 | 第18-19页 |
| 1.3 组蛋白乙酰转移酶Mst2 | 第19-20页 |
| 1.4 叉头转录因子FKH | 第20-21页 |
| 1.5 6-磷酸海藻糖合成酶 | 第21-22页 |
| 1.6 展望 | 第22-24页 |
| 2 球孢白僵菌PMT家族甘露糖转移酶的功能解析 | 第24-44页 |
| 2.1 材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 菌株及培养条件 | 第24-25页 |
| 2.1.2 试剂 | 第25页 |
| 2.2 方法 | 第25-32页 |
| 2.2.1 真菌核酸提取 | 第25-26页 |
| 2.2.2 PMT家族的基因克隆与分析 | 第26页 |
| 2.2.3 PMT成员的转录动态分析 | 第26-27页 |
| 2.2.4 单基因敲除/回补及干扰突变株的构建与鉴定 | 第27-29页 |
| 2.2.5 甘露糖转移酶的酶活检测 | 第29-30页 |
| 2.2.6 表型实验 | 第30-31页 |
| 2.2.7 细胞壁的观察与成分变化测定 | 第31-32页 |
| 2.2.8 数据统计与分析 | 第32页 |
| 2.3 结果与分析 | 第32-41页 |
| 2.3.1 球孢白僵菌PMT家族的结构、分类与转录表达特征 | 第32-34页 |
| 2.3.2 Pmt突变株的鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3.3 Pmt单基因敲除或干扰降低甘露糖转移酶活性 | 第35页 |
| 2.3.4 Pmt单基因敲除或干扰影响营养生长、产孢及孢子萌发 | 第35-38页 |
| 2.3.5 Pmt单基因敲除或干扰菌株对化学胁迫更敏感 | 第38-39页 |
| 2.3.6 Pmt单基因敲除或干扰削弱生物防治潜能 | 第39-41页 |
| 2.3.7 Pmt单基因敲除或干扰使细胞壁完整性受损 | 第41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-44页 |
| 3 球孢白僵菌KTR家族α-1,2甘露糖转移酶的功能比较 | 第44-57页 |
| 3.1 材料和方法 | 第44-46页 |
| 3.1.1 菌株、培养基和试剂 | 第44-45页 |
| 3.1.2 不同营养条件下菌株生长速率的测定 | 第45页 |
| 3.1.3 正常生长、产孢和孢子性状的测定 | 第45页 |
| 3.1.4 不同化学胁迫下菌落生长速率和孢子萌发率测定 | 第45页 |
| 3.1.5 细胞壁受损程度观察与测定 | 第45-46页 |
| 3.1.6 毒力测定 | 第46页 |
| 3.2 结果与分析 | 第46-55页 |
| 3.2.1 Ktr家族蛋白的结构特征 | 第46-47页 |
| 3.2.2 Ktr家族基因缺失对球孢白僵菌营养生长的影响 | 第47-49页 |
| 3.2.3 ktr缺失对无性发育和分生孢子性状的影响 | 第49-51页 |
| 3.2.4 ktr缺失影响孢壁完整性 | 第51-53页 |
| 3.2.5 ktr缺失影响多胁迫应答和毒力 | 第53-55页 |
| 3.3 讨论 | 第55-57页 |
| 4 球孢白僵菌组蛋白乙酰转移酶Mst2的功能解析 | 第57-73页 |
| 4.1 材料 | 第57-58页 |
| 4.1.1 菌株及其培养条件 | 第57-58页 |
| 4.1.2 试剂及试剂盒 | 第58页 |
| 4.2 方法 | 第58-63页 |
| 4.2.1 球孢白僵菌Mst2的鉴定与序列分析 | 第58页 |
| 4.2.2 Mst2敲除和回补菌株的构建与鉴定 | 第58-59页 |
| 4.2.3 Western杂交 | 第59页 |
| 4.2.4 表型分析 | 第59-63页 |
| 4.3 结果与分析 | 第63-70页 |
| 4.3.1 球孢白僵菌Mst2的基本特征及其突变菌株 | 第63页 |
| 4.3.2 Mst2缺失削弱组蛋白H3K14的乙酰化 | 第63-64页 |
| 4.3.3 Mst2缺失改变芽生孢子产量、大小、复杂度、细胞周期及DNA损伤修复 | 第64-66页 |
| 4.3.4 Mst2缺失降低分生孢子产量及活力 | 第66页 |
| 4.3.5 Mst2缺失影响营养生长和抗逆性状 | 第66-68页 |
| 4.3.6 Mst2缺失削弱球孢白僵菌的生物防治潜能 | 第68-69页 |
| 4.3.7 Mst2缺失降低抗逆蛋白活性、胞内海藻糖及露醇积累含量及孢子疏水性 | 第69页 |
| 4.3.8 Mst2缺失影响表型相关基因的转录表达 | 第69-70页 |
| 4.4 讨论 | 第70-73页 |
| 5 球孢白僵菌叉头转录因子Fkh2的转录调控与生物防治潜能的关系 | 第73-88页 |
| 5.1 材料 | 第74页 |
| 5.1.1 菌株及其培养条件 | 第74页 |
| 5.1.2 试剂及试剂盒 | 第74页 |
| 5.2 方法 | 第74-78页 |
| 5.2.1 球孢白僵菌Fkh2基因的克隆与序列分析 | 第74页 |
| 5.2.2 Fkh2敲除/回补菌株的构建和鉴定 | 第74-75页 |
| 5.2.3 表型分析 | 第75-78页 |
| 5.3 结果与分析 | 第78-84页 |
| 5.3.1 球孢白僵菌中Fkah2的基本特征及敲除、回补菌株的构建 | 第78页 |
| 5.3.2 Fkh2缺失改变芽生孢子的细胞周期、产量、大小及复杂度 | 第78-79页 |
| 5.3.3 Fkh2缺失改变菌丝分隔模式和相关基因的转录 | 第79-80页 |
| 5.3.4 Fkh2缺失影响对不同碳氮源的利用率及营养胁迫的耐受力 | 第80-82页 |
| 5.3.5 Fkh2缺失促进产孢但降低孢子活力 | 第82-83页 |
| 5.3.6 Fkh2缺失影响球孢白僵菌的抗逆性状及毒力 | 第83-84页 |
| 5.3.7 Fkh2缺失改变表型相关基因的转录水平及其蛋白活性 | 第84页 |
| 5.4 讨论 | 第84-88页 |
| 6 球孢白僵菌两个6磷酸海藻糖合成酶的功能比较 | 第88-103页 |
| 6.1 材料 | 第89页 |
| 6.1.1 菌株及其培养条件 | 第89页 |
| 6.1.2 试剂及试剂盒 | 第89页 |
| 6.2 方法 | 第89-91页 |
| 6.2.1 球孢白僵菌TpsA和TpsB的鉴定与序列分析 | 第89页 |
| 6.2.2 tpsA和tpsB敲除和回补菌株的构建 | 第89-90页 |
| 6.2.3 6-磷酸海藻糖合成酶的酶活检测 | 第90-91页 |
| 6.2.4 表型分析 | 第91页 |
| 6.3 结果与分析 | 第91-98页 |
| 6.3.1 球孢白僵菌中TpsA和TpsB的特征 | 第91页 |
| 6.3.2 tpsA和tpsB的缺失降低或消除细胞内TPS酶活、海藻糖及甘露醇积累 | 第91-93页 |
| 6.3.3 tpsA和tpsB缺失影响碳氮源的利用和营养生长 | 第93-94页 |
| 6.3.4 tpsA和tpsB缺失影响分生孢子产量和质量 | 第94-95页 |
| 6.3.5 tpsA和tpsB缺失影响胞壁结构和完整性 | 第95-96页 |
| 6.3.6 tpsA和tpsB缺失株对多种胁迫更敏感 | 第96-98页 |
| 6.3.7 tpsA和tpsB缺失削弱球孢白僵菌的生物防治潜能 | 第98页 |
| 6.4 讨论 | 第98-103页 |
| 7 结语 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-118页 |
| Summary | 第118-121页 |
| 附录：博士期间的主要成果 | 第122页 |
