摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-17页 |
1.1 引言 | 第9-10页 |
1.2 基因转导系统的研究进展 | 第10-11页 |
1.2.1 病毒载体 | 第10-11页 |
1.2.2 非病毒载体 | 第11页 |
1.3 嵌合抗原受体技术概述 | 第11-15页 |
1.3.1 CAR的结构 | 第11-13页 |
1.3.3 CAR-T治疗的优势和不足 | 第13-14页 |
1.3.4 效应细胞的选择 | 第14-15页 |
1.4 WT1基因与血液肿瘤 | 第15-17页 |
第二章 Ad5F11p-GFP对免疫细胞的感染效率及生物学特性的影响 | 第17-32页 |
2.1 实验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 病毒与细胞 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
2.1.3 相关溶液的配置 | 第18-19页 |
2.1.4 主要仪器 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 Ad5F11p-GFP的包装 | 第19-20页 |
2.2.2 细胞的获得与培养 | 第20-21页 |
2.2.3 Ad5F11p-GFP感染免疫细胞 | 第21页 |
2.2.4 Ad5F11p-GFP感染的免疫细胞的增殖 | 第21-22页 |
2.2.5 IFN-γ 释放实验 | 第22页 |
2.2.6 免疫细胞的毒性实验(LDH释放量) | 第22-23页 |
2.2.7 统计学方法 | 第23页 |
2.3 实验结果 | 第23-29页 |
2.3.1 Ad5F11p-GFP感染效率免疫细胞 | 第23-26页 |
2.3.2 Ad5F11p-GFP对免疫细胞形态学的影响 | 第26-27页 |
2.3.3 Ad5F11p-GFP抑制免疫细胞增殖 | 第27-28页 |
2.3.4 Ad5F11p-GFP促进免疫细胞释放IFN-γ | 第28-29页 |
2.3.5 Ad5F11p-GFP促进免疫细胞的杀伤活性 | 第29页 |
2.4 讨论与小结 | 第29-32页 |
第三章 重组腺病毒Ad5F11P-WT1/CAR的制备 | 第32-51页 |
3.1 实验材料 | 第32-36页 |
3.1.1 质粒与菌种 | 第32-34页 |
3.1.2 细胞 | 第34页 |
3.1.3 主要试剂 | 第34页 |
3.1.4 相关溶液的配置 | 第34-36页 |
3.1.5 主要仪器设备 | 第36页 |
3.2 实验方法 | 第36-44页 |
3.2.1 白血病细胞中WT1的鉴定 | 第36-39页 |
3.2.4 重组腺病毒的制备 | 第39-40页 |
3.2.5 病毒的鉴定 | 第40页 |
3.2.6 病毒的扩增 | 第40-41页 |
3.2.7 CsCl密度梯度离心法纯化腺病毒 | 第41-42页 |
3.2.8 病毒滴度的测定 | 第42-44页 |
3.3 实验结果 | 第44-49页 |
3.3.1 筛选WT1+ 的白血病细胞 | 第44-45页 |
3.3.2 重组腺病毒载体的构建 | 第45-46页 |
3.3.3 重组腺病毒的制备及鉴定 | 第46-49页 |
3.4 讨论与小结 | 第49-51页 |
第四章 结论与展望 | 第51-54页 |
4.1 结论 | 第51页 |
4.2 创新点 | 第51-52页 |
4.3 展望 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
发表论文情况 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
附录 | 第63-64页 |