中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第11-15页 |
第一章、NRP-2mAb的制备、纯化及鉴定 | 第15-25页 |
一、材料和方法 | 第15-23页 |
1. 材料 | 第15-20页 |
1.1 细胞株 | 第15页 |
1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
1.3 主要仪器 | 第16页 |
1.4 主要溶液和配制 | 第16-20页 |
2. 方法 | 第20-23页 |
2.1 NRP-2 杂交瘤细胞的培养 | 第20页 |
2.2 抗体的纯化 | 第20-21页 |
2.3 抗体的透析和冻干 | 第21-22页 |
2.4 抗体的纯度鉴定 | 第22页 |
2.5 抗体的滴度鉴定 | 第22-23页 |
二、结果与分析 | 第23-25页 |
1 纯度测定 | 第23-24页 |
2 滴度测定 | 第24-25页 |
第二章、NRP-2 单克隆抗体在胃癌细胞株和胃癌组织中的表达 | 第25-41页 |
一、材料和方法 | 第25-35页 |
1、材料 | 第25-30页 |
1.1 细胞株 | 第25页 |
1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
1.3 主要仪器 | 第26页 |
1.4 主要溶液和配制 | 第26-30页 |
2. 方法 | 第30-35页 |
2.1 Western blotting | 第30-32页 |
2.2 流式细胞术 | 第32-33页 |
2.3 细胞免疫荧光染色 | 第33-34页 |
2.4 免疫组织化学染色 | 第34-35页 |
二、结果与分析 | 第35-39页 |
1 Western blotting | 第35页 |
2 RT-PCR | 第35-36页 |
3 流式细胞术 | 第36页 |
4 细胞免疫荧光染色 | 第36-37页 |
5 免疫组织化学染色 | 第37-39页 |
三、讨论 | 第39-41页 |
第三章、NRP-2mAb 对胃癌细胞的抗肿瘤作用 | 第41-53页 |
一、材料和方法 | 第41-45页 |
1、材料 | 第41-42页 |
1.1 细胞株 | 第41页 |
1.2 主要试剂 | 第41页 |
1.3 主要仪器 | 第41-42页 |
1.4 主要溶液和配制 | 第42页 |
2. 方法 | 第42-45页 |
2.1 细胞的培养 | 第42-43页 |
2.2 细胞增殖抑制实验(CCK8) | 第43页 |
2.3 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第43-44页 |
2.4 Transwell 检测 NRP-2mAb 对 BGC-823 细胞的迁移侵袭作用 | 第44页 |
2.5 统计学处理 | 第44-45页 |
二、结果与分析 | 第45-50页 |
1. NRP-2 mAb抑制胃癌细胞的增殖 | 第45-47页 |
1.1 光学显微镜下观察细胞形态 | 第45-46页 |
1.2 CCK8法 | 第46-47页 |
2. NRP-2 单克隆抗体促进细胞凋亡 | 第47-48页 |
3. NRP-2 mAb抑制胃癌细胞的迁移、侵袭 | 第48-50页 |
3.1 Transwell 检测 NRP-2 抗体对细胞迁移的影响 | 第48-49页 |
3.2 Transwell 检测 NRP-2mAb 对胃癌细胞侵袭的影响 | 第49-50页 |
三、讨论 | 第50-53页 |
第四章、NRP-2mAb 对胃癌细胞的生长抑制作用机制的研究 | 第53-59页 |
一、材料和方法 | 第53-54页 |
1、材料 | 第53-54页 |
1.1 细胞株 | 第53页 |
1.2 主要试剂 | 第53-54页 |
1.3 主要仪器 | 第54页 |
1.4 主要溶液和配制 | 第54页 |
2. 方法 | 第54页 |
二、结果与分析 | 第54-56页 |
1. 增殖相关蛋白 pAKT、PI3K 、pERK1/2 的表达 | 第54-55页 |
2. 凋亡相关蛋白 Caspase3、Bax 、Bcl-2 的表达 | 第55-56页 |
三、讨论 | 第56-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
综述 | 第64-71页 |
参考文献 | 第67-71页 |
致谢 | 第71页 |