| 中文摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-23页 |
| 1.1 p,p'-DDT简介 | 第17-18页 |
| 1.2 大肠癌 | 第18-22页 |
| 1.2.1 大肠癌简介 | 第18页 |
| 1.2.2 Warburg效应与大肠癌 | 第18-20页 |
| 1.2.3 PKM2与大肠癌 | 第20页 |
| 1.2.4 活性氧与大肠癌 | 第20-21页 |
| 1.2.5 上皮间充质转化与大肠癌 | 第21-22页 |
| 1.3 p,p'-DDT与大肠癌 | 第22页 |
| 1.4 本课题研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 p,p'-DDT通过丙酮酸激酶M2促进大肠癌细胞的Warburg效应 | 第23-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验试剂及抗体 | 第23-24页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 细胞的复苏、冻存与培养 | 第24页 |
| 2.2.2 药物处理 | 第24页 |
| 2.2.3 培养基中葡萄糖和乳酸含量检测 | 第24页 |
| 2.2.4 总RNA提取 | 第24页 |
| 2.2.5 荧光定量PCR | 第24-25页 |
| 2.2.6 RNA干扰实验 | 第25页 |
| 2.2.7 细胞蛋白提取 | 第25-26页 |
| 2.2.8 Western印迹 | 第26页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-30页 |
| 2.3.1 p,p'-DDT暴露促进人大肠癌细胞的Warburg效应 | 第26页 |
| 2.3.2 p,p'-DDT处理促进PKM2的表达和核易位 | 第26页 |
| 2.3.3 敲减PKM2抑制p,p'-DDT诱导的Warburg效应 | 第26-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 p,p'-DDT通过ERK1/2调节PKM2介导的Warburg效应 | 第31-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第31页 |
| 3.1.1 实验试剂及抗体 | 第31页 |
| 3.1.2 细胞株 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-32页 |
| 3.2.1 细胞的复苏、冻存与培养 | 第31页 |
| 3.2.2 药物处理 | 第31页 |
| 3.2.3 培养基中葡萄糖和乳酸含量检测 | 第31页 |
| 3.2.4 总RNA提取 | 第31页 |
| 3.2.5 荧光定量PCR | 第31页 |
| 3.2.6 细胞蛋白提取 | 第31-32页 |
| 3.2.7 Western印迹 | 第32页 |
| 3.2.8 统计学分析 | 第32页 |
| 3.3 实验结果 | 第32-35页 |
| 3.3.1 p,p'-DDT通过激活ERK1/2调节PKM2表达 | 第32页 |
| 3.3.2 p,p'-DDT通过ERK1/2途径调节Warbur2效应 | 第32页 |
| 3.3.3 p,p'-DDT激活肿瘤组织内ERK1/2并调节Warburg效应的关键蛋白 | 第32-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 p,p'-DDT通过ROS调节大肠癌细胞的Warburg效应 | 第36-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第36页 |
| 4.1.1 实验试剂及抗体 | 第36页 |
| 4.1.2 细胞株 | 第36页 |
| 4.2 实验方法 | 第36-37页 |
| 4.2.1 细胞的复苏、冻存与培养 | 第36页 |
| 4.2.2 药物处理 | 第36页 |
| 4.2.3 ROS水平检测 | 第36-37页 |
| 4.2.4 培养基中葡萄糖和乳酸含量检测 | 第37页 |
| 4.2.5 总RNA提取 | 第37页 |
| 4.2.6 荧光定量PCR | 第37页 |
| 4.2.7 细胞蛋白提取 | 第37页 |
| 4.2.8 Western印迹 | 第37页 |
| 4.2.9 统计学分析 | 第37页 |
| 4.3 结果 | 第37-40页 |
| 4.3.1 p,p'-DDT不通过ER途径促进大肠癌细胞的Warburg效应 | 第37-38页 |
| 4.3.2 p,p'-DDT暴露对大肠癌细胞ROS水平的影响 | 第38页 |
| 4.3.3 p,p'-DDT通过ROS调节PKM2和ERK1/2 | 第38-39页 |
| 4.3.4 p,p'-DDT通过ROS促进大肠癌细胞的Warburg效应 | 第39-40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第五章 p,p'-DDT通过STAT3/Snail1信号通路促进大肠癌细胞上皮间充质转化 | 第42-48页 |
| 5.1 实验材料 | 第42页 |
| 5.1.1 实验试剂 | 第42页 |
| 5.1.2 细胞株 | 第42页 |
| 5.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 5.2.1 细胞的复苏、冻存与培养 | 第42页 |
| 5.2.2 药物处理 | 第42页 |
| 5.2.3 细胞形态学观察 | 第42页 |
| 5.2.4 总RNA提取 | 第42-43页 |
| 5.2.5 荧光定量PCR | 第43页 |
| 5.2.6 细胞蛋白提取 | 第43页 |
| 5.2.7 Western印迹 | 第43页 |
| 5.2.8 统计学分析 | 第43页 |
| 5.3 结果 | 第43-46页 |
| 5.3.1 p,p'-DDT暴露对DLD1细胞形态的影响 | 第43-44页 |
| 5.3.2 p,p'-DDT暴露促进DLD1细胞上皮间充质转化 | 第44页 |
| 5.3.3 p,p'-DDT暴露激活STAT3/Snail1信号通路 | 第44-46页 |
| 5.4 讨论 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附录1 主要试剂配方 | 第56-58页 |
| 附录2 实验主要仪器设备 | 第58-59页 |
| 附录3 英文缩略语表 | 第59-60页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 个人简况及联系方式 | 第62-64页 |
