| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 综述 | 第10-17页 |
| 1.1 蜱类简介 | 第10页 |
| 1.2 蜱唾液腺退化的研究 | 第10-12页 |
| 1.3 蛋白质组学的定义、发展及其应用 | 第12-14页 |
| 1.4 RNA干扰技术及其应用 | 第14-16页 |
| 1.5 实时荧光定量PCR技术及其应用 | 第16-17页 |
| 第二章 长角血蜱饱血后唾液腺蛋白质的动态变化及其功能分析 | 第17-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第17页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 实验仪器及耗材 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-21页 |
| 2.2.1 组织解剖及蛋白提取 | 第18页 |
| 2.2.2 蛋白酶解及iTRAQ标定 | 第18-19页 |
| 2.2.3 高效液相色谱(HPLC)反相分离 | 第19-20页 |
| 2.2.4 LC-MS/MS分析 | 第20页 |
| 2.2.5 蛋白质鉴定 | 第20-21页 |
| 2.2.6 生物信息学分析 | 第21页 |
| 2.3 实验结果 | 第21-38页 |
| 2.3.1 蛋白质鉴定 | 第21-22页 |
| 2.3.2 差异表达蛋白cluster聚类分析 | 第22页 |
| 2.3.3 差异表达蛋白GO功能注释 | 第22-31页 |
| 2.3.4 各个时期上下调表达的蛋白质GO功能注释 | 第31-33页 |
| 2.3.5 差异表达蛋白KEGG通路分析 | 第33-35页 |
| 2.3.6 差异表达蛋白的蛋白互作分析 | 第35-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-45页 |
| 第三章 差异表达蛋白质RNA干扰及qPCR分析 | 第45-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第45页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第45页 |
| 3.1.3 实验仪器及耗材 | 第45-46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-53页 |
| 3.2.1 蜱RNA提取 | 第46页 |
| 3.2.2 cDNA一链合成 | 第46-47页 |
| 3.2.3 目的片段扩增 | 第47-48页 |
| 3.2.4 PCR产物电泳检测及胶回收 | 第48-49页 |
| 3.2.5 阳性克隆筛选 | 第49页 |
| 3.2.6 基因测序与基因比对 | 第49页 |
| 3.2.7 含T7启动子目的片段扩增 | 第49-51页 |
| 3.2.8 dsRNA合成 | 第51页 |
| 3.2.9 dsRNA注射 | 第51-52页 |
| 3.2.10 荧光定量PCR | 第52-53页 |
| 3.3 实验结果 | 第53-56页 |
| 3.3.1 荧光定量结果 | 第53页 |
| 3.3.2 干扰结果 | 第53-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果清单 | 第67页 |