| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第15-31页 |
| 第一章 卵母细胞的成熟与早期胚胎培养研究进展 | 第15-25页 |
| 1.1 卵母细胞的发生与成熟 | 第15-16页 |
| 1.2 影响卵母细胞体外成熟的因素 | 第16-20页 |
| 1.2.1 卵母细胞的来源 | 第16-18页 |
| 1.2.2 培养条件 | 第18页 |
| 1.2.3 其他影响因素 | 第18-20页 |
| 1.3 卵母细胞体外成熟培养的研究进展 | 第20页 |
| 1.4 卵母细胞的体外成熟培养系统 | 第20-21页 |
| 1.4.1 微滴培养系统 | 第20-21页 |
| 1.4.2 开放培养系统 | 第21页 |
| 1.4.3 密闭培养系统 | 第21页 |
| 1.5 卵母细胞微环境——卵母细胞与颗粒细胞之间的相互作用 | 第21-24页 |
| 1.5.1 卵母细胞对卵丘细胞及颗粒细胞的影响 | 第21-22页 |
| 1.5.2 卵丘细胞在卵母细胞成熟发育中的作用 | 第22-23页 |
| 1.5.3 卵丘细胞与卵母细胞的旁分泌与缝隙连接作用 | 第23-24页 |
| 1.6 卵母细胞激活与早期胚胎的发育 | 第24-25页 |
| 第二章 Wnt信号通路对卵母细胞发育的的影响 | 第25-31页 |
| 2.1 WNT对反转发育、生理和病理过程的调节 | 第25页 |
| 2.2 WNT信号诱导 | 第25-27页 |
| 2.3 出生后卵巢的WNT信号调节 | 第27-28页 |
| 2.4 WNT信号通路抑制剂与激活剂 | 第28-30页 |
| 2.5 目前存在的主要问题及本研究的意义 | 第30-31页 |
| 试验研究 | 第31-66页 |
| 第三章 猪卵母细胞体外成熟培养体系的建立 | 第31-41页 |
| 3.1 前言 | 第31页 |
| 3.2 材料与方法 | 第31-35页 |
| 3.2.1 猪卵巢采集 | 第31-32页 |
| 3.2.2 主要仪器与用品 | 第32页 |
| 3.2.3 主要化学试剂 | 第32页 |
| 3.2.4 试剂的配制 | 第32-33页 |
| 3.2.5 猪卵母细胞的收集与培养 | 第33页 |
| 3.2.6 猪卵母细胞的成熟和孤雌激活后卵裂率的观察 | 第33-34页 |
| 3.2.7 不同培养方法培养猪卵母细胞 | 第34页 |
| 3.2.8 不同浓度激素配伍培养猪卵母细胞 | 第34页 |
| 3.2.9 不同浓度EGF培养猪卵母细胞 | 第34-35页 |
| 3.2.10不同激素处理方式培养猪卵母细胞 | 第35页 |
| 3.2.11统计分析方法 | 第35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-38页 |
| 3.3.1 不同培养方法对猪卵母细胞成熟的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.2 不同浓度激素配伍对猪卵母细胞成熟的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.3 不同浓度EGF对猪卵母细胞成熟的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.4 不同激素处理方式对猪卵母细胞成熟的影响 | 第38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-40页 |
| 3.4.1 培养方法对猪卵母细胞成熟的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.2 不同激素配伍对猪卵母细胞成熟的影响 | 第39页 |
| 3.4.3 EGF对猪卵母细胞成熟的影响 | 第39页 |
| 3.4.4 激素处理方式对猪卵母细胞成熟的影响 | 第39-40页 |
| 3.5 小结 | 第40-41页 |
| 第四章 抑制剂FH535对猪卵母细胞成熟的影响 | 第41-51页 |
| 4.1 前言 | 第41-42页 |
| 4.2 材料与方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 猪卵巢采集 | 第42页 |
| 4.2.2 主要仪器与用品 | 第42页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第42页 |
| 4.2.4 试剂的配制 | 第42页 |
| 4.2.5 猪卵母细胞的收集与培养 | 第42-43页 |
| 4.2.6 猪卵母细胞成熟的观察 | 第43页 |
| 4.2.7 猪卵母细胞孤雌激活及早期胚胎发育的观察 | 第43页 |
| 4.2.8 猪卵母细胞母系基因的检测 | 第43-44页 |
| 4.2.9 β-catenin蛋白的表达 | 第44页 |
| 4.2.10 统计分析方法 | 第44-45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-49页 |
| 4.3.1 抑制剂FH535对卵丘扩散的影响 | 第45页 |
| 4.3.2 抑制剂FH535对猪卵母细胞成熟的影响 | 第45-47页 |
| 4.3.3 抑制剂FH535对猪卵母细胞母系基因表达的影响 | 第47-48页 |
| 4.3.4 抑制剂FH535对猪卵母细胞WNT信号通路 β-catenin表达的影响 | 第48-49页 |
| 4.4 讨论 | 第49-50页 |
| 4.4.1 抑制剂FH535对卵丘扩散和猪卵母细胞成熟的影响 | 第49页 |
| 4.4.2 抑制剂FH535对猪卵母细胞母系基因表达的影响 | 第49-50页 |
| 4.4.3 抑制剂FH535对猪卵母细胞WNT信号通路 β-catenin表达的影响 | 第50页 |
| 4.5 小结 | 第50-51页 |
| 第五章 抑制剂SB202190对猪卵母细胞成熟的影响 | 第51-57页 |
| 5.1 前言 | 第51页 |
| 5.2 材料与方法 | 第51-52页 |
| 5.2.1 猪卵巢采集 | 第51页 |
| 5.2.2 主要仪器与用品 | 第51页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第51-52页 |
| 5.2.4 试剂的配制 | 第52页 |
| 5.2.5 猪卵母细胞的收集与培养 | 第52页 |
| 5.2.6 猪卵母细胞成熟的观察 | 第52页 |
| 5.2.7 猪卵母细胞母系基因的检测 | 第52页 |
| 5.2.8 p38MAPK和p-p38MAPK蛋白的表达 | 第52页 |
| 5.2.9 统计分析方法 | 第52页 |
| 5.3 结果与分析 | 第52-55页 |
| 5.3.1 抑制剂SB202190对猪卵母细胞卵丘扩散的影响 | 第52-53页 |
| 5.3.2 抑制剂SB202190对猪卵母细胞成熟的影响 | 第53页 |
| 5.3.3 抑制剂SB202190对猪卵母细胞母系基因表达的影响 | 第53-54页 |
| 5.3.4 抑制剂SB202190对猪卵母细胞p38MAPK/p-p38MAPK表达的影响 | 第54-55页 |
| 5.4 讨论 | 第55-56页 |
| 5.4.1 抑制剂SB202190对猪卵母细胞卵丘扩散和猪卵母细胞成熟的影响 | 第55-56页 |
| 5.4.2 抑制剂SB202190对猪卵母细胞母系基因表达的影响 | 第56页 |
| 5.4.3 抑制剂SB202190对猪卵母细胞p38MAPK/p-p38MAPK表达的影响 | 第56页 |
| 5.5 小结 | 第56-57页 |
| 第六章 抑制剂SB202190对猪卵母细胞微环境-猪颗粒细胞作用的研究 | 第57-66页 |
| 6.1 前言 | 第57页 |
| 6.2 材料与方法 | 第57-60页 |
| 6.2.1 猪卵巢的采集 | 第57页 |
| 6.2.2 试剂和仪器 | 第57-58页 |
| 6.2.3 猪颗粒细胞的分离与培养 | 第58页 |
| 6.2.4 猪颗粒细胞的鉴定 | 第58页 |
| 6.2.5 抑制剂SB202190对猪颗粒细胞生长的影响 | 第58页 |
| 6.2.6 抑制剂SB202190对猪颗粒细胞凋亡的影响 | 第58页 |
| 6.2.7 抑制剂SB202190对猪颗粒细胞周期的影响 | 第58-59页 |
| 6.2.8 抑制剂SB202190对猪颗粒细胞相关基因表达的影响 | 第59页 |
| 6.2.9 抑制剂SB202190对猪颗粒细胞p38MAPK/p-p38MAPK表达的影响 | 第59-60页 |
| 6.2.10统计分析方法 | 第60页 |
| 6.3 结果与分析 | 第60-64页 |
| 6.3.1 猪卵巢颗粒细胞培养及形态学观察 | 第60-61页 |
| 6.3.2 猪卵巢颗粒细胞的鉴定 | 第61页 |
| 6.3.3 抑制剂SB202190处理对猪卵巢颗粒细胞增殖活力的影响 | 第61页 |
| 6.3.4 抑制剂SB202190处理对猪卵巢颗粒细胞凋亡的影响 | 第61-62页 |
| 6.3.5 抑制剂SB202190对猪卵巢颗粒细胞周期的影响 | 第62页 |
| 6.3.6 抑制剂SB202190对猪颗粒细胞凋亡、周期相关基因表达的影响 | 第62-63页 |
| 6.3.7 抑制剂SB202190对猪颗粒细胞p38MAPK/p-p38MAPK表达的影响 | 第63-64页 |
| 6.4 讨论 | 第64-65页 |
| 6.4.1 抑制剂SB202190对猪颗粒细胞生长、凋亡、周期的影响 | 第64页 |
| 6.4.2 抑制剂SB202190对猪颗粒细胞凋亡、周期相关基因表达的影响 | 第64页 |
| 6.4.3 抑制剂SB202190对猪颗粒细胞p38MAPK/p-p38MAPK表达的影响 | 第64-65页 |
| 6.5 小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 创新点 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 缩略词 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简介 | 第80页 |
