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松褐天牛气味结合蛋白基因克隆与分析

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略语表第11-12页
第一章 文献综述第12-18页
    1.1 松褐天牛简介第12-13页
        1.1.1 松褐天牛的发生规律及危害第12页
        1.1.2 松褐天牛生物学特性第12页
        1.1.3 松褐天牛的防治第12-13页
    1.2 植物挥发性物质与昆虫对挥发物的嗅觉反应第13-14页
        1.2.1 植物挥发性物质第13页
        1.2.2 昆虫对挥发物的嗅觉反应第13-14页
    1.3 气味结合蛋白第14-16页
        1.3.1 昆虫嗅觉作用机制第14页
        1.3.2 气味结合蛋白分类第14-15页
        1.3.3 气味结合蛋白功能第15页
        1.3.4 气味结合蛋白结合和释放机制第15-16页
    1.4 研究目的与意义第16-17页
    技术路线第17-18页
第二章 松褐天牛气味结合蛋白(MaltOBPs)基因克隆第18-27页
    2.1 材料与方法第18-23页
        2.1.1 供试昆虫第18页
        2.1.2 实验试剂及试剂盒第18页
        2.1.3 实验仪器第18-19页
        2.1.4 松褐天牛cDNA的获取第19-20页
        2.1.5 松褐天牛MaltOBPs基因的克隆第20-23页
    2.2 结果分析第23-26页
        2.2.1 松褐天牛触角总RNA提取质量检测第23页
        2.2.2 松褐天牛MaltOBPs基因信息第23-24页
        2.2.3 松褐天牛MaltOBPs基因的PCR扩增第24-25页
        2.2.4 松褐天牛MaltOBPs基因克隆第25-26页
    2.3 讨论第26-27页
第三章 松褐天牛OBPs基因时空表达特性检测第27-36页
    3.1 材料与方法第27-30页
        3.1.1 实验材料第27-28页
        3.1.2 样品RNA的提取第28页
        3.1.3 cDNA第一条链的合成第28-29页
        3.1.4 引物设计及合成第29-30页
        3.1.5 PCR反应第30页
        3.1.6 数据分析第30页
    3.2 结果和分析第30-33页
        3.2.1 引物扩增效率和特异性检测第30-31页
        3.2.2 松褐天牛气味结合蛋白基因时空表达特性分析第31-33页
    3.3 讨论第33-36页
第四章 松褐天牛MaltOBPs表达纯化及结合特性第36-52页
    4.1 材料与方法第36-44页
        4.1.1 主要菌株、试剂盒和试剂第36-37页
        4.1.2 荧光结合气味物质第37-38页
        4.1.3 主要仪器第38页
        4.1.4 质粒提取第38-39页
        4.1.5 原核表达载体的构建第39-40页
        4.1.6 融合蛋白试表达第40页
        4.1.7 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第40页
        4.1.8 融合蛋白表达条件优化和融合蛋白大量表达第40页
        4.1.9 试表达成功的融合蛋白的纯化第40-42页
        4.1.10 蛋白浓度的测定第42-43页
        4.1.11 荧光探针适合性测定第43页
        4.1.12 荧光竞争结合实验第43页
        4.1.13 荧光竞争结合实验数据分析第43-44页
    4.2 结果与分析第44-50页
        4.2.1 重组质粒的构建第44页
        4.2.2 原核表达第44-46页
        4.2.3 蛋白浓度的测定第46-47页
        4.2.4 松褐天牛MaltOBP13与荧光探针 1-NPN适合性检验第47页
        4.2.5 MaltOBP13蛋白与松树挥发物的结合特性第47-50页
    4.3 讨论第50-52页
第五章 松褐天牛成虫行为选择第52-57页
    5.1 材料与方法第52-54页
        5.1.1 供试昆虫第52页
        5.1.2 供试试剂和仪器第52-53页
        5.1.3 Y型嗅觉仪行为选择第53-54页
        5.1.4 数据统计分析第54页
    5.2 结果与分析第54-55页
    5.3 讨论第55-57页
第六章 结果与展望第57-59页
    6.1 主要结果第57页
    6.2 展望第57-59页
参考文献第59-68页
硕士期间发表的学术论文第68-69页
致谢第69页

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