中文摘要 | 第12-13页 |
英文摘要 | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第15-26页 |
1.1 糖尿病简介 | 第15-18页 |
1.1.1 糖尿病类型 | 第15-16页 |
1.1.2 糖尿病最新数据 | 第16-18页 |
1.2 多糖降血糖的研究进展 | 第18-19页 |
1.2.1 植物多糖降血糖的应用 | 第18页 |
1.2.2 苦瓜多糖降血糖的研究 | 第18-19页 |
1.3 细胞模型的应用 | 第19-20页 |
1.3.1 细胞模型在科研中的应用 | 第19页 |
1.3.2 胰岛素抵抗细胞模型 | 第19-20页 |
1.3.3 3T3-L1脂肪细胞与糖尿病研究 | 第20页 |
1.4 高通量测序与精准医疗 | 第20-24页 |
1.4.1 精准医疗计划 | 第20页 |
1.4.2 RNA-seq的简介 | 第20-22页 |
1.4.3 RNA-seq的应用 | 第22页 |
1.4.4 RNA-seq与糖尿病研究 | 第22-24页 |
1.5 本课题的研究意义及主要内容 | 第24-26页 |
1.5.1 研究意义 | 第24页 |
1.5.2 研究内容 | 第24-25页 |
1.5.3 技术路线 | 第25-26页 |
第二章 苦瓜多糖的分离制备 | 第26-32页 |
2.1 材料与试剂 | 第26页 |
2.2 仪器和设备 | 第26页 |
2.3 试验方法 | 第26-29页 |
2.3.1 苦瓜粗多糖(MCP)的制备 | 第26-27页 |
2.3.2 苦瓜粗多糖除蛋白 | 第27页 |
2.3.3 G-250法检测粗多糖中蛋白质的含量 | 第27页 |
2.3.4 苯酚-硫酸法检测多糖的含量 | 第27-28页 |
2.3.5 苦瓜多糖的纯化 | 第28-29页 |
2.3.6 苦瓜多糖成分的分析 | 第29页 |
2.4 结果与分析 | 第29-30页 |
2.4.1 苦瓜多糖的纯化 | 第29-30页 |
2.4.2 MCPIIa的单糖组成 | 第30页 |
2.5 讨论 | 第30-31页 |
2.6 小结 | 第31-32页 |
第三章 苦瓜多糖降血糖活性组分的筛选 | 第32-43页 |
3.1 材料与试剂 | 第32页 |
3.2 仪器和设备 | 第32页 |
3.3 试验方法 | 第32-38页 |
3.3.1 苦瓜多糖组分的制备 | 第32页 |
3.3.2 细胞试验溶液的配制 | 第32-34页 |
3.3.3 3T3-L1前脂肪细胞的复苏,传代和冻存 | 第34-35页 |
3.3.4 脂肪细胞的诱导分化 | 第35-36页 |
3.3.5 脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)模型的建立 | 第36-37页 |
3.3.6 胰岛素抵抗(IR)细胞模型的维持 | 第37页 |
3.3.7 苦瓜多糖对胰岛素抵抗(IR)细胞模型活力的影响 | 第37页 |
3.3.8 苦瓜多糖降糖活性组分的筛选 | 第37-38页 |
3.4 结果与分析 | 第38-41页 |
3.4.1 油红O染色结果分析 | 第38-39页 |
3.4.2 胰岛素抵抗(IR)模型的建立 | 第39页 |
3.4.3 胰岛素抵抗(IR)模型的维持情况 | 第39页 |
3.4.4 MTT检测结果分析 | 第39-40页 |
3.4.5 降糖活性组分的筛选结果 | 第40-41页 |
3.5 讨论 | 第41-42页 |
3.6 小结 | 第42-43页 |
第四章 MCPⅡa在Ⅱ型糖尿病大鼠体内的降血糖试验 | 第43-54页 |
4.1 材料与试剂 | 第43页 |
4.2 仪器和设备 | 第43页 |
4.3 试验方法 | 第43-47页 |
4.3.1 MCPⅡa的分离与制备 | 第43页 |
4.3.2 MCPⅡa调控Ⅱ型糖尿病大鼠血糖的试验 | 第43-44页 |
4.3.3 大鼠糖耐量变化的测定 | 第44页 |
4.3.4 大鼠体重变化的测定 | 第44页 |
4.3.5 大鼠肝脏中总蛋白质浓度的测定 | 第44页 |
4.3.6 大鼠肝脏中总超氧化物歧化酶(T-SOD)的测定 | 第44-45页 |
4.3.7 大鼠肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的测定 | 第45-46页 |
4.3.8 大鼠肝脏中丙二醛(MDA)的测定 | 第46-47页 |
4.3.9 大鼠肝脏中甘油三脂的测定 | 第47页 |
4.4 结果与分析 | 第47-52页 |
4.4.1 MCPⅡa调控T2DM大鼠血糖的分析 | 第47-48页 |
4.4.2 MCPⅡa对T2DM大鼠糖耐量的影响 | 第48页 |
4.4.3 MCPⅡa调控T2DM大鼠体重的分析 | 第48-49页 |
4.4.4 大鼠肝脏总蛋白含量分析 | 第49页 |
4.4.5 大鼠肝脏T-SOD活力分析 | 第49-50页 |
4.4.6 大鼠肝脏GSH-PX活力分析 | 第50-51页 |
4.4.7 大鼠肝脏MDA含量变化 | 第51页 |
4.4.8 大鼠肝脏中甘油三酯的测定 | 第51-52页 |
4.5 讨论 | 第52-53页 |
4.6 小结 | 第53-54页 |
第五章 基于RNA-seq转录组学的T2DM大鼠及多糖处理组研究 | 第54-67页 |
5.1 材料与试剂 | 第54页 |
5.2 仪器和设备 | 第54页 |
5.3 试验方法 | 第54-56页 |
5.3.1 Total RNA样品的制备与检测 | 第54页 |
5.3.2 RNA文库的构建 | 第54-55页 |
5.3.3 上机测序 | 第55页 |
5.3.4 测序质量评估 | 第55-56页 |
5.4 结果与分析 | 第56-65页 |
5.4.1 Total RNA质量检测 | 第56-58页 |
5.4.2 测序错误率分布检查 | 第58页 |
5.4.3 A/T/G/C含量分布检查 | 第58-59页 |
5.4.4 测序数据过滤 | 第59-60页 |
5.4.5 测序数据质量情况 | 第60-61页 |
5.4.6 Reds与参考基因比对结果 | 第61-62页 |
5.4.7 Reds在染色体上的密度分布情况 | 第62-63页 |
5.4.8 基因表达水平分析 | 第63-64页 |
5.4.9 RNA-seq相关性检查 | 第64页 |
5.4.10 基因表达水平比对 | 第64-65页 |
5.5 讨论 | 第65-66页 |
5.6 小结 | 第66-67页 |
第六章 转录组基因表达注释和差异基因分析 | 第67-78页 |
6.1 分析方法 | 第67-68页 |
6.1.1 样品基因表达差异分析 | 第67页 |
6.1.2 差异表达基因的筛选 | 第67页 |
6.1.3 差异基因聚类分析 | 第67页 |
6.1.4 差异基因GO富集分析 | 第67-68页 |
6.1.5 差异基因KEGG富集分析 | 第68页 |
6.2 结果与分析 | 第68-74页 |
6.2.1 韦恩图-veen Diagram | 第68页 |
6.2.2 火山图-Hot map | 第68-69页 |
6.2.3 差异基因聚类图 | 第69-71页 |
6.2.4 差异基因GO富集柱状图 | 第71-72页 |
6.2.5 KEGG富集散点图 | 第72-73页 |
6.2.6 KEGG通路 | 第73-74页 |
6.3 差异基因表达分析 | 第74-75页 |
6.4 讨论 | 第75-76页 |
6.5 小结 | 第76-78页 |
第七章 结论 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-87页 |
附录 | 第87-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
攻读学位论文期间发表文章 | 第97页 |