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驱动神经元特异性表达24-脱氢胆固醇还原酶的重组腺病毒的构建

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
引言第9-20页
    0.1 概述第9-10页
    0.2 阿尔茨海默病第10-12页
        0.2.1 阿尔茨海默病的症状第10页
        0.2.2 阿尔茨海默病的病理表现第10-11页
        0.2.3 阿尔茨海默病的发病机制第11-12页
        0.2.4 阿尔茨海默病的治疗方法第12页
    0.3 DHCR24第12-16页
        0.3.1 DHCR24的发现第12-13页
        0.3.2 DHCR24通过合成胆固醇发挥其生理作用第13-16页
    0.4 基因治疗第16-17页
    0.5 组织特异性表达第17-18页
        0.5.1 组织特异性表达的概念第17-18页
        0.5.2 SYN1启动子介导神经细胞特异性表达第18页
    0.6 本研究的目的与意义第18-20页
第一章 神经特异表达DHCR24的重组腺病毒及功能验证第20-36页
    1.1 引言第20页
    1.2 材料第20-22页
        1.2.1 菌种和载体第20-21页
        1.2.2 工具酶和生化试剂第21页
        1.2.3 主要仪器和设备第21-22页
        1.2.4 培养基与溶液的配制第22页
    1.3 实验方法第22-36页
        1.3.1 实验设计与流程第22-25页
        1.3.2 模板及引物设计第25页
        1.3.3 PCR扩增SYN1序列第25-26页
        1.3.4 重组质粒真核表达载体的构建第26-31页
        1.3.5 重组质粒的同源重组第31-32页
        1.3.6 重组质粒转染293细胞第32页
        1.3.7 重组腺病毒鉴定第32-33页
        1.3.8 Western Blot第33-34页
        1.3.9 重组病毒的纯化第34-35页
        1.3.10 重组腺病毒的神经特异性表达检验第35页
        1.3.11 重组腺病毒的抗氧化应激的细胞保护作用第35-36页
第二章 实验结果第36-44页
    2.1 SYN1基因序列的获得第36页
    2.2 重组质粒pGEMT-easy/SYN1鉴定第36-39页
    2.3 pcDNA3.1A-SYN1-DHCR24-myc的构建及双酶切验证第39页
    2.4 pShttule-SYN1-DHCR24质粒双酶切验证第39-40页
    2.5 pAdEasy-1-SYN1-DHCR24同源重组质粒的重组及验证第40-41页
    2.6 重组腺病毒的包装、蛋白提取和DHCR24蛋白表达的验证第41-42页
    2.7 重组腺病毒的扩增、提纯及DHCR24蛋白神经特异性表达的验证第42页
    2.8 Ad-hSYN-DHCR24重组腺病毒的抗氧化应激的神经细胞保护作用第42-44页
第三章 讨论与结论第44-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-50页
攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况第50页

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