摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
引言 | 第11-13页 |
第一部分 BAG5在PINK1~(R492X)突变型PD患者皮肤中的表达 | 第13-33页 |
1 材料与仪器 | 第13-19页 |
1.1 临床标本的收集 | 第13-14页 |
1.1.1 标本来源 | 第13页 |
1.1.2 临床评价 | 第13页 |
1.1.3 皮肤活检取材 | 第13-14页 |
1.2 实验材料 | 第14-19页 |
1.2.1 主要试剂及仪器 | 第14-16页 |
1.2.2 主要溶液的配制 | 第16-19页 |
2 实验方法 | 第19-24页 |
2.1 免疫荧光法检测BAG5的表达 | 第20页 |
2.2 免疫组化法检测Ub的表达 | 第20-21页 |
2.3 Western blot检测BAG5、Ub的表达 | 第21-24页 |
2.3.1 蛋白样本的提取制备 | 第21-22页 |
2.3.2 SDS-PAGE电泳 | 第22页 |
2.3.3 转膜 | 第22页 |
2.3.4 封闭及杂交 | 第22-23页 |
2.3.5 显影及曝光鉴定 | 第23页 |
2.3.6 统计学处理 | 第23-24页 |
3 结果 | 第24-28页 |
3.1 临床资料 | 第24-25页 |
3.2 免疫荧光法检测皮肤组织中BAG5的分布 | 第25页 |
3.3 免疫组化法检测皮肤组织中Ub的分布 | 第25-26页 |
3.4 免疫印迹检测皮肤组织中BAG5和Ub的表达 | 第26-28页 |
4 讨论 | 第28-33页 |
第二部分 BAG5蛋白对R492X突变型PINK1蛋白降解的影响 | 第33-43页 |
1 材料与仪器 | 第33-36页 |
1.1 主要试剂及仪器 | 第33-34页 |
1.2 主要溶液的配制 | 第34-36页 |
2 实验方法 | 第36-39页 |
2.1 细胞复苏 | 第36页 |
2.2 细胞传代 | 第36页 |
2.3 细胞冻存 | 第36-37页 |
2.4 细胞转染 | 第37页 |
2.5 siRNA转染 | 第37-38页 |
2.6 细胞免疫荧光化学 | 第38页 |
2.7 追踪实验 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-42页 |
3.1 BAG5蛋白与PINK1~(R492X)蛋白的亚细胞共定位 | 第39页 |
3.2 BAG5蛋白对R492X突变型PINK1蛋白的调节 | 第39-41页 |
3.3 BAG5对PINK1~(R492X)蛋白降解的调节 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
结论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
综述 线粒体功能与帕金森病 | 第49-67页 |
参考文献 | 第61-67页 |
附录 | 第67-69页 |
中英文缩略词对照表 | 第69-71页 |
致谢 | 第71-73页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第73-74页 |