| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 缩略 词 | 第10-11页 |
| 1 绪论 | 第11-25页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第11-22页 |
| 1.2.1 莱氏野村菌概况 | 第11-12页 |
| 1.2.2 真菌菌核形成的条件及机理的研究 | 第12-13页 |
| 1.2.3 莱氏野村菌微菌核的诱导培养及微菌核形成过程 | 第13页 |
| 1.2.4 莱氏野村菌微菌核的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2.5 铁元素对莱氏野村菌微菌核形成的影响 | 第14-15页 |
| 1.2.6 真菌对铁元素的摄入途径研究进展 | 第15-19页 |
| 1.2.7 铁元素的储存途径 | 第19页 |
| 1.2.8 真菌中铁平衡调控机制研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2.9 液泡铁储存途径相关基因CccA和CccB在真菌中的研究进展 | 第21页 |
| 1.2.10 莱氏野村菌微菌核中铁调控机制研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第22页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第22页 |
| 1.3.2 研究意义 | 第22页 |
| 1.4 研究内容及技术路线 | 第22-25页 |
| 1.4.1 研究内容与实施方案 | 第22-23页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第23页 |
| 1.4.3 本研究的创新之处 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 菌株和生测昆虫 | 第25页 |
| 2.1.2 载体 | 第25页 |
| 2.1.3 主要培养基配制方法 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要试剂和试剂盒 | 第26页 |
| 2.1.5 主要溶液配制 | 第26-27页 |
| 2.1.6 主要实验设备 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-43页 |
| 2.2.1 菌种的保存与活化 | 第28页 |
| 2.2.2 目的片段及NrCccA和NrCccB基因侧翼的扩增 | 第28-33页 |
| 2.2.3 NrCccA和NrCccB基因敲除载体的构建 | 第33-35页 |
| 2.2.4 ?NrCccA和?NrCccB突变体菌株的构建与验证 | 第35-37页 |
| 2.2.5 NrCccA和NrCccB基因及其蛋白生物信息学分析 | 第37页 |
| 2.2.6 ?NrCccA和?NrCccB突变体菌株萌发率的测定 | 第37-38页 |
| 2.2.7 ?NrCccA和?NrCccB突变体菌株对各种离子及H2O2等抗逆性检测 | 第38页 |
| 2.2.8 NrCccA和NrCccB对微菌核形成的影响 | 第38-39页 |
| 2.2.9 干燥微菌核萌发速率及产孢量的测定 | 第39页 |
| 2.2.10 微菌核形成以及高铁诱导条件下表达谱分析 | 第39-40页 |
| 2.2.11 毒力分析 | 第40-41页 |
| 2.2.12 数据分析 | 第41-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-65页 |
| 3.1 基因的克隆及其蛋白生物信息学分析 | 第43-47页 |
| 3.1.1 基因的克隆 | 第43页 |
| 3.1.2 NrCccA和NrCccB基因及其编码的蛋白生物信息学分析 | 第43-47页 |
| 3.2 敲除载体的构建 | 第47-51页 |
| 3.3 转化子的筛选及验证 | 第51-52页 |
| 3.4 NrCccA和NrCccB基因对微菌核形成的影响 | 第52-55页 |
| 3.4.1 ?NrCccA和?NrCccB对微菌核形态、生物量以及微菌核产量的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.2 ?NrCccA和?NrCccB突变菌株对微菌核胞内铁含量的影响 | 第53-54页 |
| 3.4.3 对微菌核萌发菌丝速率以及产孢量的影响 | 第54-55页 |
| 3.5 NrCccA和NrCccB的表达谱分析 | 第55-59页 |
| 3.5.1 NrCccA和NrCccB在微菌核形成过程中的表达谱分析 | 第55-57页 |
| 3.5.2 高铁诱导下NrCccA和NrCccB基因的表达谱分析 | 第57-58页 |
| 3.5.3 WT和突变菌株中NrSidA和NrMrs3基因的表达谱分析 | 第58-59页 |
| 3.6 ?NrCccA和?NrCccB突变菌株的表型分析 | 第59-64页 |
| 3.6.1 铁浓度对突变菌株的表型影响 | 第59-61页 |
| 3.6.2 突变体对H2O2抗逆性 | 第61页 |
| 3.6.3 突变体对各种盐离子、高渗透压以及细胞破坏剂抗逆性 | 第61-63页 |
| 3.6.4 NrCccA和NrCccB基因对分生孢子萌发速率的影响 | 第63-64页 |
| 3.7 NrCccA和NrCccB基因突变体对斜纹夜蛾致病力分析 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 4.1 NrCccA高铁诱导大量表达并与NrCccB在微菌核形成过程中共同调节细胞铁稳态 | 第65页 |
| 4.2 NrCccA基因提高莱氏野村菌对刚果红以及铁离子的耐受性 | 第65-66页 |
| 4.3 NrCccA和NrCccB与铁载体合成关键基因NrSidA以及线粒体内铁的利用相关基因NrMrs3共同维持细胞内铁的稳态 | 第66-67页 |
| 5 主要结论与后续工作 | 第67-69页 |
| 5.1 主要研究结论 | 第67页 |
| 5.2 后续工作 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| A. 作者在攻读硕士学位期间发表论文目录 | 第79页 |
| B. 作者在攻读硕士学位期间参与科研项目 | 第79页 |
| C. 蛋白序列名称及登录号 | 第79-80页 |
| D. 基因序列 | 第80-81页 |
