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YTHDF2协调胰腺癌细胞的增殖和上皮间质转化

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
英文缩略词中英文注释表第12-14页
第一章 绪论第14-22页
    1.1 研究背景第14-19页
        1.1.1 胰腺癌第14页
        1.1.2 YTH结构域m6A RNA结合蛋白 2(YTHDF2)第14-16页
        1.1.3 上皮间质转化第16-17页
        1.1.4 增殖与迁移分歧第17-19页
    1.2 本研究的目的意义、内容、技术路线第19-22页
        1.2.1 目的意义第19页
        1.2.2 研究内容第19-20页
        1.2.3 技术路线图第20-22页
第二章 生物信息学分析、载体构建与鉴定、稳转细胞株筛选第22-47页
    2.1 材料和试剂第22-27页
        2.1.1 主要材料第22-23页
        2.1.2 配制试剂第23-25页
        2.1.3 实验试剂第25-26页
        2.1.4 主要仪器第26-27页
    2.2 实验方法第27-38页
        2.2.1 细胞复苏、培养及传代:第27-28页
        2.2.2 定量PCR第28-30页
        2.2.3 Western blotting第30-32页
        2.2.4 DH5α/ Stbl3感受态细胞制备方法慢病毒包装第32-33页
        2.2.5 构建sh-EGFP和sh-YTHDF2载体第33-37页
        2.2.6 包装病毒第37页
        2.2.7 筛选稳转细胞第37-38页
        2.2.8 统计学分析第38页
    2.3 结果第38-44页
        2.3.1 正常胰腺组织和胰腺癌组织YTHDF2 mRNA和蛋白表达量的差异第38-39页
        2.3.2 YTHDF2的表达与胰腺癌分期的联系第39-40页
        2.3.3 检测YTHDF2 mRNA和蛋白在三种胰腺癌细胞的表达量第40-41页
        2.3.4 pLKO.1-TRC质粒双酶切及菌液PCR鉴定第41-42页
        2.3.5 sh-YTHDF2质粒测序结果第42-43页
        2.3.6 验证sh-YTHDF2质粒的干扰效果第43-44页
    2.4 讨论第44-47页
第三章 YTHDF2对胰腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭的影响第47-58页
    3.1 材料和试剂第47-48页
        3.1.1 主要材料第47页
        3.1.2 主要试剂第47-48页
        3.1.3 主要仪器第48页
    3.2 方法第48-51页
        3.2.1 细胞复苏、培养及传代第48页
        3.2.2 Western blotting第48页
        3.2.3 定量PCR第48页
        3.2.4 平板克隆形成实验第48-49页
        3.2.5 CCK-8 实验第49页
        3.2.6 Transwell迁移实验第49-50页
        3.2.7 Transwell侵袭实验第50页
        3.2.8 细胞划痕实验第50页
        3.2.9 统计学分析第50-51页
    3.3 结果第51-55页
        3.3.1 平板克隆形成实验检测YTHDF2对胰腺癌细胞克隆形成能力的影响第51页
        3.3.2 CCK-8 实验检测YTHDF2对胰腺癌细胞增殖能力的影响第51-52页
        3.3.3 Transwell迁移实验和划痕实验检测YTHDF2对胰腺癌细胞迁移能力的影响第52-53页
        3.3.4 Transwell侵袭实验检测YTHDF2对胰腺癌细胞侵袭能力的影响第53-54页
        3.3.5 Western blot检测YTHDF2对Akt/ GSK3β/CyclinD1信号通路相关蛋白的影响第54-55页
        3.3.6 检测YTHDF2对侵袭相关蛋白的影响第55页
    3.4 讨论第55-58页
第四章 YTHDF2对胰腺癌EMT的影响及分子机制第58-64页
    4.1 材料和试剂第58-59页
        4.1.1 主要材料第58页
        4.1.2 主要试剂第58页
        4.1.3 主要仪器第58-59页
    4.2 方法第59页
        4.2.1 细胞复苏、培养及传代第59页
        4.2.2 Western blotting第59页
        4.2.3 统计学分析第59页
    4.3 结果第59-61页
        4.3.1 下调YTHDF2对上皮间质转化(EMT)相关蛋白的影响第59-60页
        4.3.2 YTHDF2通过YAP介导了上皮间质转化第60-61页
    4.4 讨论第61-64页
结论与展望第64-65页
致谢第65-66页
在校期间发表论文第66-67页
参考文献第67-74页

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