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利用CRISPR/Cas9技术编辑淀粉合成基因Pullulan

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-23页
    1.1 胚乳发育第12-15页
        1.1.1 胚乳发育与淀粉第12-13页
        1.1.2 胚乳发育与蛋白第13-14页
        1.1.3 胚乳细胞中的程序性死亡过程第14-15页
    1.2 淀粉代谢相关基因研究进展第15-19页
        1.2.1 淀粉的合成相关基因第15-17页
            1.2.1.1 淀粉的结构第16-17页
        1.2.2 糖转运过程与淀粉合成第17-18页
        1.2.3 PUL研究进展第18-19页
    1.3 基因编辑技术研究进展第19-22页
        1.3.1 ZFNs系统第19-20页
        1.3.2 TALENs系统第20页
        1.3.3 CRISPR/Cas9系统第20-22页
    1.4 本实验研究的目的第22-23页
第二章 实验材料与方法第23-32页
    2.1 实验材料与试剂第23页
        2.1.1 水稻材料第23页
        2.1.2 质粒载体第23页
        2.1.3 菌株种类第23页
        2.1.4 主要试剂第23页
    2.2 实验方法第23-32页
        2.2.1 PUl的CRISPR/Cas9载体构建第23-28页
            2.2.1.1. 靶序列选择及引物设计第23-24页
            2.2.1.2. SK-gRNA中间载体构建第24-26页
            2.2.1.3 pC1300-Cas9最终载体构建第26-28页
        2.2.2 农杆菌介导水稻愈伤遗传转化第28页
        2.2.3 阳性转基因植株验证第28页
        2.2.4 突变检测第28-29页
        2.2.5 农艺性状考察第29页
        2.2.6 稻米生理生化品质第29页
        2.2.7 粒重和淀粉合成相关基因表达第29-32页
第三章 结果与分析第32-42页
    3.1 gRNA靶位点选择及引物设计第32-33页
    3.2 SK-gRNA和pC1300 Cas9::PUL载体的鉴定第33-34页
    3.3 PUL的编辑及后代的鉴定分析第34-37页
    3.4 农艺性状第37-39页
    3.5 稻米品质分析第39-40页
    3.6 相关基因表达第40-42页
第四章 结论与讨论第42-43页
参考文献第43-49页
附图第49-50页
致谢第50-51页
个人简历第51页

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