| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第10-30页 |
| 1.1 brcaa1 基因的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 RNA 干扰 | 第11-16页 |
| 1.2.1 RNA 干扰的发现及研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.2 RNA 干扰的机制 | 第13-14页 |
| 1.2.3 RNA 干扰作用的自我扩增机制 | 第14-15页 |
| 1.2.4 RNA 干扰技术的特点 | 第15页 |
| 1.2.5 RNA 干扰技术的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 细胞凋亡研究概述 | 第16-24页 |
| 1.3.1 细胞凋亡与细胞坏死 | 第16-17页 |
| 1.3.2 细胞凋亡的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3.3 细胞凋亡的信号途径 | 第18-19页 |
| 1.3.4 细胞凋亡的调控 | 第19-22页 |
| 1.3.5 细胞凋亡的检测方法 | 第22-24页 |
| 1.4 本论文的主要研究工作 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-30页 |
| 2 brcaa1 基因干扰质粒载体的构建 | 第30-52页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 材料与方法 | 第30-32页 |
| 2.2.1 设备 | 第30-31页 |
| 2.2.2 主要试剂及配方 | 第31-32页 |
| 2.3 实验部分 | 第32-47页 |
| 2.3.1 shRNA 序列设计 | 第32-42页 |
| 2.3.2 shRNA 片段插入shRNA 质粒载体中 | 第42-43页 |
| 2.3.3 shRNA 质粒转化 | 第43-47页 |
| 2.4 实验结果 | 第47-48页 |
| 2.4.1 质粒小抽 | 第47页 |
| 2.4.2 质粒酶切 | 第47-48页 |
| 2.5 实验讨论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 3 siRNA 干扰后胃癌MGC-803 细胞中brcaa1 基因表达的分析 | 第52-79页 |
| 3.1 材料与方法 | 第52-55页 |
| 3.1.1 仪器设备 | 第52-53页 |
| 3.1.2 试剂 | 第53页 |
| 3.1.3 配方 | 第53-55页 |
| 3.2 实验部分 | 第55-66页 |
| 3.2.1 shRNA 质粒转染MGC-803 细胞 | 第55-56页 |
| 3.2.2 MGC-803 细胞mRNA 的表达 | 第56-61页 |
| 3.2.3 MTT 法检测BRCAA1 基因沉默后MGC-803 细胞的增殖情况 | 第61页 |
| 3.2.4 流式细胞术检测基因沉默后MGC-803 细胞的凋亡情况 | 第61-62页 |
| 3.2.5 Western blotting 检测MGC-803 细胞凋亡相关蛋白的表达 | 第62-66页 |
| 3.2.6 统计学处理 | 第66页 |
| 3.3 实验结果 | 第66-75页 |
| 3.3.1 siRNA 表达质粒对胃癌细胞MGC-803 的成功转染 | 第66-69页 |
| 3.3.2 转染后MGC-803 细胞BRCAA1 基因mRNA 的表达水平 | 第69-72页 |
| 3.3.3 BRCAA1 基因的沉默对人胃癌细胞MGC-803 的增殖速度 | 第72-73页 |
| 3.3.4 BRCAA1 基因的沉默对MGC-803 细胞凋亡的影响 | 第73-74页 |
| 3.3.5 BRCAA1 基因沉默对MGC-803 细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第74-75页 |
| 3.4 实验讨论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 4 siRNA 干扰后动物模型的分析 | 第79-84页 |
| 4.1 材料与方法 | 第79-80页 |
| 4.2 实验部分 | 第80页 |
| 4.3 实验结果 | 第80-82页 |
| 4.3.1 注射siRNA 质粒后肿瘤模型的变化 | 第80-81页 |
| 4.3.2 注射siRNA 质粒后肿瘤模型的数据分析 | 第81-82页 |
| 4.4 实验讨论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-84页 |
| 5 全文总结与展望 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第86页 |
