| 中文摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略词表 | 第15-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-31页 |
| 第1节 HMGB1 基因分子生物学特性 | 第17-26页 |
| 1.1 HMG 家族 | 第17-18页 |
| 1.1.1 HMG 家族的发现 | 第17页 |
| 1.1.2 HMG 家族的分类 | 第17页 |
| 1.1.3 HMG 蛋白的生物学特点 | 第17-18页 |
| 1.2 HMGB1 的结构特点及生物学功能 | 第18-24页 |
| 1.2.1 HMGB1 基因结构及蛋白结构特点 | 第18-20页 |
| 1.2.2 HMGB1 的生物学作用 | 第20页 |
| 1.2.3 HMGB1 与肿瘤的关系 | 第20-23页 |
| 1.2.4 HMGB1 与炎症的关系 | 第23-24页 |
| 1.3 针对 HMGB1 的干预措施 | 第24-25页 |
| 1.4 结束语 | 第25-26页 |
| 第2节 RNAi 技术在喉癌中的应用进展 | 第26-31页 |
| 2.1 以人乳头瘤病毒基因为靶点的研究 | 第26-27页 |
| 2.2 以血管内皮生长因子基因为靶点的研究 | 第27页 |
| 2.3 以 Survivin 基因为靶点的研究 | 第27-28页 |
| 2.4 以基质金属蛋白酶基因为靶点的研究 | 第28页 |
| 2.5 以端粒酶逆转录酶基因为靶点的研究 | 第28-29页 |
| 2.6 以 E-钙黏蛋白基因为靶点的研究 | 第29页 |
| 2.7 以信号转导和转录激活因子为靶点的研究 | 第29-30页 |
| 2.8 结束语 | 第30-31页 |
| 第2章 实验研究 | 第31-85页 |
| 第1节 HMGB1 蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达 | 第31-37页 |
| 1.1 前言 | 第31页 |
| 1.2 材料与方法 | 第31-34页 |
| 1.2.1 研究对象 | 第31-32页 |
| 1.2.2 实验仪器及耗材 | 第32页 |
| 1.2.3 主要试剂 | 第32页 |
| 1.2.4 试剂配置 | 第32-33页 |
| 1.2.5 实验方法 | 第33-34页 |
| 1.3 结果 | 第34-36页 |
| 1.3.1 HMGB1 在喉鳞状细胞癌组织中表达情况 | 第34-35页 |
| 1.3.2 HMGB1 表达阳性率及染色强度比较 | 第35-36页 |
| 1.4 讨论 | 第36页 |
| 1.5 小结 | 第36-37页 |
| 第2节 HMGB1 蛋白在喉癌细胞中的表达 | 第37-43页 |
| 2.1 前言 | 第37页 |
| 2.2 材料与方法 | 第37-40页 |
| 2.2.1 研究对象 | 第37页 |
| 2.2.2 实验仪器及耗材 | 第37-38页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第38页 |
| 2.2.4 试剂配置 | 第38-39页 |
| 2.2.5 实验方法 | 第39-40页 |
| 2.3 结果 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 2.5 小结 | 第42-43页 |
| 第3节 siRNA 靶向干扰对Hep-2 细胞中HMGB1基因及相关蛋白的影响 | 第43-64页 |
| 3.1 前言 | 第43页 |
| 3.2 材料与方法 | 第43-56页 |
| 3.2.1 研究对象 | 第43页 |
| 3.2.2 实验仪器及耗材 | 第43-44页 |
| 3.2.3 实验试剂 | 第44-45页 |
| 3.2.4 试剂配置 | 第45-47页 |
| 3.2.5 shRNA 设计与合成 | 第47页 |
| 3.2.6 质粒抽提与测序 | 第47-49页 |
| 3.2.7 瞬时转染 Hep-2 细胞 | 第49-50页 |
| 3.2.8 RT-PCR 检测 HMGB1 基因表达 | 第50-53页 |
| 3.2.9 Western Blot 检测 HMGB1 及相关蛋白表达 | 第53-55页 |
| 3.2.10 明胶酶谱分析 MMPs 活性 | 第55-56页 |
| 3.3 结果 | 第56-60页 |
| 3.3.1 构建质粒序列正确性 | 第56-58页 |
| 3.3.2 Hep-2 细胞瞬时转染效率 | 第58页 |
| 3.3.3 siRNA 对 Hep-2 细胞 HMGB1 mRNA 表达的抑制作用 | 第58-59页 |
| 3.3.4 siRNA 对 Hep-2 细胞 HMGB1 及相关蛋白表达的抑制作用 | 第59-60页 |
| 3.3.5 siRNA 对 Hep-2 细胞 MMPs 蛋白活性的抑制作用 | 第60页 |
| 3.4 讨论 | 第60-63页 |
| 3.5 小结 | 第63-64页 |
| 第4节 siRNA 靶向干扰HMGB1 基因对Hep-2细胞侵袭行为的影响 | 第64-75页 |
| 4.1 前言 | 第64页 |
| 4.2 材料与方法 | 第64-68页 |
| 4.2.1 研究对象 | 第64页 |
| 4.2.2 实验仪器及耗材 | 第64页 |
| 4.2.3 实验试剂 | 第64-65页 |
| 4.2.4 试剂配置 | 第65页 |
| 4.2.5 细胞划痕实验 | 第65-66页 |
| 4.2.6 平板克隆形成实验 | 第66-67页 |
| 4.2.7 Transwell 侵袭实验 | 第67-68页 |
| 4.3 结果 | 第68-71页 |
| 4.3.1 siRNA 对 Hep-2 细胞体外迁移能力的影响 | 第68-70页 |
| 4.3.2 siRNA 对 Hep-2 细胞克隆形成的抑制 | 第70-71页 |
| 4.3.3 Transwell 检测 siRNA 对 Hep-2 细胞侵袭能力的影响 | 第71页 |
| 4.4 讨论 | 第71-73页 |
| 4.5 小结 | 第73-75页 |
| 第5节 siRNA靶向干扰HMGB1基因对Hep-2/v细胞增殖及耐药性的影响 | 第75-85页 |
| 5.1 前言 | 第75页 |
| 5.2 材料与方法 | 第75-79页 |
| 5.2.1 研究对象 | 第75页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第75页 |
| 5.2.3 实验试剂及耗材 | 第75-76页 |
| 5.2.4 试剂配置 | 第76页 |
| 5.2.5 瞬时转染 Hep-2/v 细胞 | 第76页 |
| 5.2.6 Western Blot 检测 HMGB1 及相关蛋白表达 | 第76-77页 |
| 5.2.7 CCK-8 检测 Hep-2/v 细胞增殖活性变化 | 第77页 |
| 5.2.8 流式细胞术检测 Hep-2/v 细胞周期变化 | 第77-78页 |
| 5.2.9 细胞免疫荧光检测 HMGB1 及 MDR1 蛋白表达变化 | 第78-79页 |
| 5.3 结果 | 第79-82页 |
| 5.3.1 瞬时转染 Hep-2/v 细胞 | 第79页 |
| 5.3.2 Western Blot 检测 HMGB1 及相关蛋白表达 | 第79-80页 |
| 5.3.3 siRNA 对 Hep-2/v 细胞增殖活性的影响 | 第80-81页 |
| 5.3.4 siRNA 对 Hep-2/v 细胞周期影响 | 第81-82页 |
| 5.3.5 siRNA 对Hep-2/v 细胞HMGB1 及MDR1 蛋白表达的影响 | 第82页 |
| 5.4 讨论 | 第82-84页 |
| 5.5 小结 | 第84-85页 |
| 第3章 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-98页 |
| 作者简介及在读期间取得的科研成果 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
