| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词表 | 第8-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-23页 |
| 1 粘多糖疫苗 | 第15页 |
| 2 全菌灭活疫苗和弱毒疫苗 | 第15-16页 |
| 3 弱毒沙门氏菌递呈铜绿假单胞菌抗原疫苗 | 第16-17页 |
| 4 LPS 疫苗 | 第17页 |
| 5 鞭毛疫苗 | 第17-18页 |
| 6 菌毛疫苗 | 第18-19页 |
| 7 以Ⅲ型分泌系统、外毒素和蛋白酶为基础的疫苗 | 第19-20页 |
| 8 外膜蛋白疫苗 | 第20-21页 |
| 9 铜绿假单胞菌的腺病毒载体疫苗 | 第21-23页 |
| 第二篇 研究内容 | 第23-60页 |
| 第1章 貂源铜绿假单胞菌的分离鉴定及生物学特性 | 第23-33页 |
| 1.1 材料与方法 | 第23-26页 |
| 1.1.1 病料及菌株 | 第23页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 1.1.4 细菌的分离纯化 | 第24页 |
| 1.1.5 分离株的生理生化鉴定 | 第24页 |
| 1.1.6 分离株的 PCR 鉴定 | 第24-25页 |
| 1.1.7 药敏试验 | 第25页 |
| 1.1.8 血清型鉴定 | 第25页 |
| 1.1.9 随机扩增 DNA 多态性分析（RAPD） | 第25页 |
| 1.1.10 动物回归及致病性实验 | 第25-26页 |
| 1.2 结果 | 第26-30页 |
| 1.2.1 细菌分离培养特性 | 第26页 |
| 1.2.2 分离株的生理生化鉴定 | 第26-27页 |
| 1.2.3 分离株的 PCR 鉴定 | 第27页 |
| 1.2.4 RAPD 分析 | 第27-28页 |
| 1.2.5 药敏试验 | 第28页 |
| 1.2.6 RAPD 分型与分离株耐药谱的横向比较 | 第28-29页 |
| 1.2.7 血清学分型 | 第29页 |
| 1.2.8 动物回归及致病性实验 | 第29-30页 |
| 1.3 讨论 | 第30-32页 |
| 1.4 小结 | 第32-33页 |
| 第2章 铜绿假单胞菌外膜蛋白 OprF 的原核表达 | 第33-43页 |
| 2.1 材料与方法 | 第33-39页 |
| 2.1.1 实验菌株及载体 | 第33页 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 | 第33-34页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第34-35页 |
| 2.1.4 目的基因的扩增 | 第35页 |
| 2.1.5 PCR 产物的回收 | 第35-36页 |
| 2.1.6 OprF 基因的克隆、转化和酶切鉴定 | 第36页 |
| 2.1.7 重组表达载体 pET-28a-OprF 的构建 | 第36-37页 |
| 2.1.8 表达菌株的构建 | 第37页 |
| 2.1.9 重组表达菌株的诱导表达及纯化 | 第37-38页 |
| 2.1.10 目的蛋白的 Western-blot 鉴定 | 第38-39页 |
| 2.2 实验结果 | 第39-41页 |
| 2.2.1 目的基因 OprF 的扩增 | 第39页 |
| 2.2.2 重组表达质粒的酶切及测序鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.3 OprF 在 E.coli BL21 中的表达及纯化 | 第40-41页 |
| 2.2.4 Western blot 检测 | 第41页 |
| 2.3 讨论 | 第41-42页 |
| 2.4 小结 | 第42-43页 |
| 第3章 铜绿假单胞菌 OprF 间接 ELISA 方法的建立 | 第43-49页 |
| 3.1 材料与方法 | 第43-45页 |
| 3.1.1 蛋白与血清 | 第43页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 3.1.3 主要溶液配制 | 第43-44页 |
| 3.1.4 ELISA 操作步骤 | 第44页 |
| 3.1.5 抗原和血清最佳稀释倍数的确定 | 第44页 |
| 3.1.6 临界值的确定 | 第44-45页 |
| 3.1.7 特异性试验 | 第45页 |
| 3.1.8 敏感性试验 | 第45页 |
| 3.1.9 重复性试验 | 第45页 |
| 3.1.10 符合率分析 | 第45页 |
| 3.2 结果 | 第45-48页 |
| 3.2.1 抗原和血清最佳稀释倍数的确定 | 第45-46页 |
| 3.2.2 检测结果判定标准的确定 | 第46页 |
| 3.2.3 特异性试验 | 第46-47页 |
| 3.2.4 敏感性试验 | 第47页 |
| 3.2.5 重复性试验 | 第47页 |
| 3.2.6 符合率分析 | 第47-48页 |
| 3.3 讨论 | 第48页 |
| 3.4 小结 | 第48-49页 |
| 第4章 水貂出血性肺炎灭活疫苗的制备及免疫效果的评价 | 第49-60页 |
| 4.1 材料与方法 | 第49-53页 |
| 4.1.1 菌株 | 第49页 |
| 4.1.2 主要试剂及仪器 | 第49-50页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第50页 |
| 4.1.4 疫苗株 LD50的测定 | 第50页 |
| 4.1.5 灭活疫苗的制备及检验 | 第50-51页 |
| 4.1.6 灭活疫苗血清抗体的测定 | 第51-52页 |
| 4.1.7 灭活疫苗的免疫攻毒保护实验 | 第52-53页 |
| 4.1.8 水貂出血性肺炎灭活疫苗免疫保护期的测定 | 第53页 |
| 4.1.9 灭活疫苗对水貂生产性能的影响 | 第53页 |
| 4.2 结果 | 第53-58页 |
| 4.2.1 疫苗株 LD50 的测定 | 第53-54页 |
| 4.2.2 灭活疫苗的制备及检验 | 第54页 |
| 4.2.3 灭活疫苗血清抗体的测定 | 第54-56页 |
| 4.2.4 灭活疫苗的免疫攻毒保护实验 | 第56-58页 |
| 4.2.5 水貂出血性肺炎灭活疫苗免疫保护期的测定 | 第58页 |
| 4.2.6 灭活疫苗对水貂生产性能的影响 | 第58页 |
| 4.3 讨论 | 第58-59页 |
| 4.4 小结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70-71页 |
| 导师简介 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
