| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10页 |
| 1 引言 | 第11-30页 |
| 1.1 RNA解旋酶 | 第11-15页 |
| 1.1.1 RNA解旋酶的结构 | 第11-12页 |
| 1.1.2 RNA结合影响解旋 | 第12-13页 |
| 1.1.3 ATP与RNA结合 | 第13-14页 |
| 1.1.4 ATP在解旋酶解旋过程中的作用 | 第14-15页 |
| 1.2 RNA分子伴侣 | 第15-18页 |
| 1.3 病毒编码的RNA重塑蛋白 | 第18-22页 |
| 1.3.1 病毒编码的RNA解旋酶 | 第18-19页 |
| 1.3.2 病毒编码的RNA分子伴侣研究进展 | 第19-22页 |
| 1.4 小RNA病毒研究进展 | 第22-26页 |
| 1.4.1 小RNA病毒的结构 | 第22-23页 |
| 1.4.2 小RNA病毒的分类 | 第23页 |
| 1.4.3 小RNA病毒生命周期 | 第23-24页 |
| 1.4.4 参与小RNA病毒复制的病毒蛋白及宿主蛋白 | 第24-26页 |
| 1.5 肠道病毒71型研究进展 | 第26-29页 |
| 1.5.1 肠道病毒71型基因组结构 | 第26页 |
| 1.5.2 肠道病毒非结构蛋白2C的研究进展 | 第26-29页 |
| 1.6 本课题的研究意义 | 第29-30页 |
| 2 EV71非结构蛋白2C的表达、纯化与结构分析 | 第30-50页 |
| 2.1 前言 | 第30-31页 |
| 2.2 材料与方法 | 第31-42页 |
| 2.2.1 材料 | 第31-33页 |
| 2.2.2 方法 | 第33-42页 |
| 2.3 结果 | 第42-48页 |
| 2.3.1 EV71 2C的基因克隆 | 第42-43页 |
| 2.3.2 EV71 2C杆状病毒重组质粒的构建 | 第43-44页 |
| 2.3.3 EV71 2C MBP标签融合蛋白SDS-PAGE鉴定 | 第44-45页 |
| 2.3.4 EV71 2C与其他SF3超家族解旋酶保守结构域对比 | 第45-46页 |
| 2.3.5 结构模拟EV71 2C三维结构并比对AAV2 Rep40的三维结构 | 第46-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-50页 |
| 3 EV71非结构蛋白2C具有解旋酶活性 | 第50-67页 |
| 3.1 前言 | 第51页 |
| 3.2 材料与方法 | 第51-56页 |
| 3.2.1 材料 | 第51-52页 |
| 3.2.2 方法 | 第52-56页 |
| 3.3 结果 | 第56-63页 |
| 3.3.1 真核表达的EV712C蛋白具有RNA双链解旋功能 | 第56-57页 |
| 3.3.2 EV712C蛋白的解旋活性对底物不具有特异性 | 第57-58页 |
| 3.3.3 EV712C蛋白的RNA双链解旋活性方向性研究 | 第58-59页 |
| 3.3.4 ATP对2C蛋白解旋酶活性的影响 | 第59-61页 |
| 3.3.5 二价金属阳离子对2C蛋白解旋酶活性的影响 | 第61-62页 |
| 3.3.6 盐酸胍对2C蛋白ATPase和解旋酶活性的影响 | 第62-63页 |
| 3.3.7 pH值对2C蛋白解旋酶活性的影响 | 第63页 |
| 3.4 讨论 | 第63-67页 |
| 4 EV71非结构蛋白2C具有RNA分子伴侣活性 | 第67-83页 |
| 4.1 前言 | 第68页 |
| 4.2 材料和方法 | 第68-72页 |
| 4.2.1 材料 | 第68页 |
| 4.2.2 方法 | 第68-72页 |
| 4.3 结果 | 第72-80页 |
| 4.3.1 2C的ATPase活性是严格依赖于Mg~(2+) | 第72-73页 |
| 4.3.2 EV712C具有RNA分子伴侣活性 | 第73-74页 |
| 4.3.3 2C能促进RNA互补双链退火 | 第74-76页 |
| 4.3.4 2C能促进核酶对底物的剪切 | 第76-77页 |
| 4.3.5 2C的CTD区域对2C的RNA分子伴侣活性很重要 | 第77-79页 |
| 4.3.6 CAV 2C也同时具有RNA解旋酶活性和RNA分子伴侣活性 | 第79-80页 |
| 4.4 讨论 | 第80-83页 |
| 5 非结构蛋白2C对病毒RNA复制的影响 | 第83-97页 |
| 5.1 前言 | 第83-84页 |
| 5.2 材料和方法 | 第84-89页 |
| 5.2.1 材料 | 第84-85页 |
| 5.2.2 方法 | 第85-89页 |
| 5.3 结果 | 第89-94页 |
| 5.3.1 在体外2C能够促进RdRP反应 | 第89-92页 |
| 5.3.2 2C解旋酶活性对病毒复制的影响 | 第92-93页 |
| 5.3.3 在病毒RNA正链复制中2C的作用 | 第93-94页 |
| 5.4 讨论 | 第94-97页 |
| 研究总结 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-109页 |
| 攻博期间发表和待发表的科研成果 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
