| 英文缩略词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| 一 组织型纤溶酶原激活剂研究现状 | 第11-12页 |
| 二 乳腺生物反应器的进展 | 第12-15页 |
| 三 人工染色体和重组工程技术在动物乳腺生物反应器中的应用 | 第15-18页 |
| 参考文献 | 第18-21页 |
| 第二章 连续三步‘Gap repair’构建牛αS1 casein 人tPA 杂合基因座 | 第21-39页 |
| 前言 | 第21-22页 |
| 1. 材料与方法 | 第22-25页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·载体与质粒 | 第22页 |
| ·工具酶与试剂盒 | 第22页 |
| ·引物 | 第22-23页 |
| ·主要溶液 | 第23-25页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·核酸电泳用试剂 | 第23-24页 |
| ·碱裂解法提取质粒所用试剂 | 第24页 |
| ·Southern Blot 所用试剂 | 第24页 |
| ·SDS PAGE 和Western Blot 所用试剂 | 第24-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-31页 |
| ·质粒提取（碱裂解法提取小量细菌质粒DNA） | 第25页 |
| ·化学感受态细胞的制备（氯化钙法）以及质粒热击转化方法 | 第25-26页 |
| ·载体构建 | 第26-28页 |
| ·扩增同源臂T1～T6 及Km 抗性基因 | 第26-27页 |
| ·构建pGEM T T123456 载体 | 第27页 |
| ·pBR322 EM7 kn 构建 | 第27页 |
| ·基因抓捕载体pBR322 gaprepair 的构建 | 第27-28页 |
| ·电击感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·λ噬菌体Red 系统介导的gap repair 同源重组过程 | 第28-29页 |
| ·三步连续基因抓捕过程 | 第29-31页 |
| 3 结果 | 第31-36页 |
| ·PGEM T T123456 载体的构建 | 第31-32页 |
| ·基因抓捕载体pBR322 gaprepair 的鉴定 | 第32-36页 |
| ·第一步基因抓捕结果 | 第33-34页 |
| ·第二步基因抓捕结果 | 第34-35页 |
| ·第三步基因抓捕结果 | 第35-36页 |
| ·测序 | 第36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-39页 |
| 第三章 牛αS1 casein htPA 杂合基因座在转基因小鼠乳腺中表达的研究 | 第39-55页 |
| 前言 | 第39页 |
| 1 实验材料 | 第39-40页 |
| ·工具酶与试剂 | 第39页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·实验仪器 | 第39-40页 |
| 2 试验方法 | 第40-47页 |
| ·注射片段的制备 | 第40页 |
| ·显微注射制备转基因小鼠 | 第40-42页 |
| ·显微注射用小鼠的制备 | 第40页 |
| ·公鼠的输精管结扎 | 第40-41页 |
| ·超排卵 | 第41页 |
| ·取卵 | 第41页 |
| ·受精卵显微注射 | 第41页 |
| ·受精卵的输卵管移植 | 第41-42页 |
| ·小鼠鼠尾基因组DNA 的制备（酚 氯仿法抽提鼠尾DNA） | 第42-43页 |
| ·转基因小鼠的Southern Blot 杂交分析（地高辛检测） | 第43-44页 |
| ·探针的制备 | 第43页 |
| ·Southern Blot 杂交分析 | 第43-44页 |
| ·F1 代转基因小鼠乳汁中人tPA 表达的鉴定 | 第44-47页 |
| ·SDS PAGE 蛋白电泳 | 第44-45页 |
| ·Western Blot 检测 | 第45-46页 |
| ·人tPA 总抗原浓度测定（ELISA） | 第46页 |
| ·人tPA 活性测定（活性ELISA） | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-49页 |
| ·显微注射结果统计和转基因小鼠PCR 鉴定 | 第47-48页 |
| ·人tPA 转基因鼠系Southern Blot 鉴定 | 第48页 |
| ·转基因小鼠乳汁中人tPA 的Western Blot 分析 | 第48页 |
| ·转基因小鼠乳汁中表达的人tPA 浓度测定 | 第48-49页 |
| ·转基因小鼠乳汁中表达的人tPA 活性测定 | 第49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 总结 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 个人简历 | 第57-58页 |
| 文献综述 | 第58-67页 |
| 1 转基因动物基本技术 | 第58-63页 |
| ·原核显微注射技术 | 第58-59页 |
| ·精子介导的基因转移技术 | 第59页 |
| ·核移植技术 | 第59-60页 |
| ·人工染色体介导的转基因技术 | 第60-62页 |
| ·基因打靶介导的转基因技术 | 第62-63页 |
| 2 转基因动物研究的应用 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 硕士期间发表文章 | 第67-77页 |
