| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第11-24页 |
| 1.1 GA20OX基因与植物矮化的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 GA20ox基因的概述 | 第11页 |
| 1.1.2 GA20ox基因的表达调控 | 第11-13页 |
| 1.1.2.1 时空表达 | 第11-12页 |
| 1.1.2.2 光信号表达调控 | 第12页 |
| 1.1.2.3 植物激素表达调控 | 第12-13页 |
| 1.1.3 GA20ox基因对植物矮化的影响 | 第13-14页 |
| 1.1.4 GA20ox基因的国内外研究进展与展望 | 第14页 |
| 1.2 木本植物遗传转化体系的研究 | 第14-23页 |
| 1.2.1 导入木本植物的外源基因类型 | 第14-15页 |
| 1.2.2 影响农杆菌介导木本植物遗传转化效率的因素 | 第15-18页 |
| 1.2.2.1 转化受体材料的选择 | 第15-16页 |
| 1.2.2.2 受体基因型对遗传转化效率的影响 | 第16页 |
| 1.2.2.3 选择压对遗传转化效率的影响 | 第16-17页 |
| 1.2.2.4 农杆菌的类型对遗传转化效率的影响 | 第17页 |
| 1.2.2.5 菌液浓度与侵染时间对遗传转化效率的影响 | 第17页 |
| 1.2.2.6 共培养对遗传转化效率的影响 | 第17-18页 |
| 1.2.3 木本植物遗传转化的方法 | 第18-20页 |
| 1.2.3.1 基因枪介导的遗传转化 | 第18-19页 |
| 1.2.3.2 农杆菌介导的遗传转化 | 第19页 |
| 1.2.3.3 花粉管通道法 | 第19-20页 |
| 1.2.3.4 其它方法 | 第20页 |
| 1.2.4 报告基因 | 第20-22页 |
| 1.2.4.1 β一葡萄糖苷酸酶基因 | 第21页 |
| 1.2.4.2 新霉素磷酸转移酶Ⅱ基因 | 第21页 |
| 1.2.4.3 荧光蛋白基因 | 第21-22页 |
| 1.2.5 转基因植株的鉴定 | 第22-23页 |
| 1.2.5.1 PCR检测 | 第22页 |
| 1.2.5.2 Southern杂交 | 第22-23页 |
| 1.2.5.3 其它检测方法 | 第23页 |
| 1.3 本研究的背景、目的及意义 | 第23-24页 |
| 2 薄壳山核桃体胚成熟与萌发条件的优化 | 第24-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第24页 |
| 2.1.3 实验试剂与药品 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.2.1 体胚干燥脱水 | 第25页 |
| 2.2.2 抗氧化酶活性的测定 | 第25-27页 |
| 2.2.2.1 超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定 | 第25-26页 |
| 2.2.2.2 过氧化物酶（POD）活性的测定 | 第26页 |
| 2.2.2.3 过氧化氢酶（CAT）活性的测定 | 第26-27页 |
| 2.2.3 丙二醛（MDA）含量的测定 | 第27页 |
| 2.2.4 内源激素的测定 | 第27-28页 |
| 2.2.5 数据统计与处理 | 第28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-33页 |
| 2.3.1 脱水干燥对体胚成熟与萌发的影响 | 第28-29页 |
| 2.3.2 抗氧化酶活性对体胚成熟与萌发的影响 | 第29-31页 |
| 2.3.2.1 体胚干燥过程中SOD活性的变化 | 第29-30页 |
| 2.3.2.2 体胚干燥过程中POD活性的变化 | 第30-31页 |
| 2.3.2.3 体胚干燥过程中CAT活性的变化 | 第31页 |
| 2.3.3 MDA含量对体胚成熟与萌发的影响 | 第31-32页 |
| 2.3.4 内源激素对体胚成熟与萌发的影响 | 第32-33页 |
| 2.4 本章小结 | 第33-34页 |
| 3 农杆菌介导薄壳山核桃遗传转化体系的建立 | 第34-50页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-36页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 3.1.2 农杆菌菌株及干扰载体 | 第34页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 3.1.4 实验试剂与药品 | 第35-36页 |
| 3.1.5 转化过程中所用的培养基 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-43页 |
| 3.2.1 遗传转化条件的研究 | 第36-37页 |
| 3.2.1.1 羧苄青霉素敏感性试验 | 第36-37页 |
| 3.2.1.2 潮霉素敏感性试验 | 第37页 |
| 3.2.1.3 菌液浓度对转化的影响 | 第37页 |
| 3.2.1.4 侵染时间对转化的影响 | 第37页 |
| 3.2.2 农杆菌的培养与活化 | 第37页 |
| 3.2.3 农杆菌侵染及共培养 | 第37页 |
| 3.2.4 筛选培养 | 第37-38页 |
| 3.2.5 GUS瞬间表达检测 | 第38页 |
| 3.2.6 转基因体胚的PCR分子鉴定 | 第38-41页 |
| 3.2.6.1 体胚总RNA提取 | 第38-39页 |
| 2.2.6.2 RNA检测 | 第39页 |
| 3.2.6.3 cDNA的合成 | 第39-40页 |
| 3.2.6.4 PCR检测体系 | 第40-41页 |
| 3.2.7 转基因体胚的qRT-PCR分子鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2.8 实验数据统计与图像处理 | 第42-43页 |
| 3.3 结果与分析 | 第43-49页 |
| 3.3.1 体胚抗生素选择压的确定 | 第43-45页 |
| 3.3.1.1 羧苄青霉素选择压的筛选 | 第43页 |
| 3.3.1.2 潮霉素选择压的筛选 | 第43-45页 |
| 3.3.2 不同菌液浓度对体胚转化的影响 | 第45页 |
| 3.3.3 不同侵染时间对体胚转化的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.4 抗性体胚筛选 | 第46页 |
| 3.3.5 转基因体胚的GUS染色结果 | 第46-47页 |
| 3.3.6 转基因体胚的分子生物学检测 | 第47-49页 |
| 3.3.6.1 转基因体胚的PCR检测 | 第47-48页 |
| 3.3.6.2 转基因体胚的qRT-PCR检测 | 第48-49页 |
| 3.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 关于体细胞胚成熟及萌发再生植株 | 第50页 |
| 4.2 抗氧化酶活性在体胚发育与成熟过程中的作用 | 第50-51页 |
| 4.3 木本植物遗传转化存在的问题 | 第51页 |
| 4.4 转化受体材料选择的问题 | 第51页 |
| 4.5 选择压力的问题 | 第51-52页 |
| 4.6 转化体胚假阳性的问题 | 第52页 |
| 4.7 遗传转化体系优化的问题 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-64页 |
| 个人简介 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
